| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| ·人溶菌酶的研究现状 | 第10-12页 |
| ·溶菌酶概述 | 第10-11页 |
| ·人溶菌酶概述 | 第11页 |
| ·人溶菌酶的应用 | 第11-12页 |
| ·乳腺表达载体的研究进展 | 第12-15页 |
| ·Red同源重组技术的原理研究 | 第15-18页 |
| ·转基因技术研究 | 第18-19页 |
| ·显微注射技术 | 第18页 |
| ·精子介导的基因转移技术 | 第18页 |
| ·核移植技术 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的、内容和意义 | 第19-22页 |
| ·研究目的与内容 | 第19页 |
| ·研究意义 | 第19-22页 |
| 第2章 连续三步基因抓捕构建“mWAP-hLYZ”乳蛋白杂合基因座 | 第22-54页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·工具酶、试剂盒与化学试剂 | 第23页 |
| ·培养基、抗生素和相关试剂 | 第23-24页 |
| ·人工合成引物 | 第24-25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·高纯度小量质粒提取方法(按东盛试剂盒) | 第26-27页 |
| ·DNA片段凝胶回收方法(按东盛试剂盒) | 第27页 |
| ·DNA片纯化方法(按东盛试剂盒) | 第27-28页 |
| ·实验步骤 | 第28-45页 |
| ·基因抓捕载体的制备 | 第28-33页 |
| ·连续三步基因抓捕过程 | 第33-45页 |
| ·实验结果 | 第45-52页 |
| ·载体“pBR322-T12,6”和T345片段的电泳检测 | 第45页 |
| ·pBR322-T12,6和T345的连接PCR鉴定 | 第45-46页 |
| ·基因抓捕载体“pBR322-T1-6-gaprepair”酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·三步连续基因抓捕结果 | 第47-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第3章 “mWAP-hLYZ”乳蛋白杂合基因座在小鼠乳腺中的表达 | 第54-78页 |
| ·材料与试剂 | 第55-56页 |
| ·工具酶与试剂 | 第55页 |
| ·主要溶液 | 第55-56页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-70页 |
| ·显微注射片断的制备 | 第56-58页 |
| ·转基因小鼠制备 | 第58-60页 |
| ·酚-氯仿法抽提小鼠基因组DNA | 第60-61页 |
| ·“mWAP-hLYZ”转基因小鼠鉴定 | 第61-62页 |
| ·转基因小鼠的Southern杂交分析 | 第62-65页 |
| ·转基因小鼠乳汁中人LYZ表达的鉴定 | 第65-70页 |
| ·实验结果与分析 | 第70-73页 |
| ·“mWAP-hLYZ”杂合基因座载体的核显微注射结果和转基因小鼠系PCR鉴定 | 第70-72页 |
| ·hLYZ转基因小鼠系Southern-Blot鉴定 | 第72-73页 |
| ·hLYZ转基因小鼠乳汁SDS-PAGE考马斯亮蓝染色结果 | 第73页 |
| ·转基因小鼠乳汁中人LYZ的Western-blot分析 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-78页 |
| 总结 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第88页 |
