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小球藻异养/光诱导切换过程的分子响应及其功能基因组学研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
目录第11-15页
第1章 前言第15-33页
   ·微藻能源研究概况第15-16页
   ·小球藻的生物学特性及其应用概述第16-17页
     ·小球藻的分类和生物学特性第16页
     ·小球藻的应用和市场前景第16-17页
   ·微藻高效培养模式第17-21页
     ·微藻常见培养模式第17-18页
     ·小球藻培养模式及存在问题第18-19页
     ·异养-稀释-光诱导串联培养技术第19-21页
   ·微藻胞内生化组分合成和代谢的调控方式第21-23页
   ·藻类基因组学和转录组学研究进展第23-30页
     ·原核藻类基因组学研究第23页
     ·真核藻类基因组学研究第23-29页
     ·微藻转录组学研究第29-30页
   ·本文的研究目的、意义和主要研究内容第30-33页
第2章 小球藻异养/光诱导切换过程的生化和细胞水平变化特征与分析第33-47页
   ·引言第33页
   ·材料与方法第33-35页
     ·藻种和培养基第33页
     ·培养方法第33-34页
     ·藻细胞密度测定第34页
     ·碳水化合物的测定第34页
     ·蛋白质含量测定第34页
     ·叶绿体色素含量测定第34页
     ·油脂含量的测定第34-35页
     ·脂肪酸组成分析第35页
     ·细胞显微和亚显微结构的观察第35页
   ·结果与讨论第35-45页
     ·异养-稀释-光诱导培养过程中的藻细胞生长特性第35-37页
     ·异养-稀释-光诱导串联培养过程中藻细胞内生化成分变化规律第37-41页
     ·细胞显微和亚显微结构变化特征第41-43页
     ·油脂含量的快速积累和脂肪酸组成变化第43-45页
   ·本章小结第45-47页
第3章 小球藻异养/光诱导消减杂交文库的构建和ESTS功能分析第47-74页
   ·引言第47-48页
   ·材料和方法第48-55页
     ·蛋白核小球藻的培养和总RNA提取第48页
     ·mRNA分离和cDNA合成第48-49页
     ·RsaⅠ酶切和接头连接第49-50页
     ·杂交及PCR扩增第50-52页
     ·PCR产物纯化第52-53页
     ·T-载体连接、转化和单克隆检测第53-54页
     ·正反消减文库ESTs测序、数据处理与功能分析第54页
     ·差异表达基因的半定量RT-PCR验证第54-55页
   ·结果和讨论第55-73页
     ·小球藻总RNA的提取与mRNA的分离第55-56页
     ·cDNA合成与酶切效果分析第56-57页
     ·接头连接及文库插入片段的检测第57-58页
     ·正反消减文库的特性分析第58-60页
     ·序列装配、功能注释及生物信息学分析第60-63页
     ·差异表达基因的RT-PCR表达分析第63-64页
     ·差异表达ESTs生物学功能分析第64-73页
   ·本章小结第73-74页
第4章 蛋白核小球藻全基因组测序和分析第74-100页
   ·引言第74页
   ·材料和方法第74-79页
     ·蛋白核小球藻藻种及培养条件第74-75页
     ·蛋白核小球藻基因组DNA的提取和18S rDNA鉴定第75页
     ·基于Roche 454 GS-FLX Titanium的全基因组测序第75-76页
     ·454数据的质量控制第76-77页
     ·重叠区的拼接及基因组骨架的组装第77页
     ·蛋白核小球藻基因结构的预测第77-78页
     ·蛋白核小球藻细胞核编码基因的功能注释第78页
     ·小球藻氨基酸和密码子使用偏好性分析第78页
     ·前导肽和蛋白的亚细胞定位预测第78-79页
     ·基因组的重复序列标识第79页
     ·有性生殖和减数分裂相关基因的预测第79页
   ·结果和讨论第79-98页
     ·蛋白核小球藻基因组DNA的质量控制第79-80页
     ·蛋白核小球藻的18S rDNA鉴定和进化地位第80-82页
     ·基因组测序数据的QC处理及拼接组装第82-84页
     ·基因结构的预测和功能注释第84-89页
     ·小球藻的氨基酸及密码子使用频率分析第89-94页
     ·蛋白核小球藻核基因组编码蛋白的前导肽和亚细胞定位分析第94-95页
     ·蛋白核小球藻基因组的重复序列分析第95-97页
     ·蛋白核小球藻参与减数分裂和有性生殖过程的基因分析第97页
     ·蛋白核小球藻参与细胞壁代谢基因分析第97-98页
   ·本章小结第98-100页
第5章 单细胞真核微藻的比较基因组学研究第100-115页
   ·引言第100页
   ·材料和方法第100-102页
     ·核基因组编码蛋白的同源性比较分析第100-101页
     ·核心和特异性蛋白质组的鉴定和分析第101页
     ·直系同源基因的鉴定第101页
     ·直系同源基因的进化选择压力计算和功能注释第101-102页
   ·结果和讨论第102-114页
     ·蛋白核小球藻核基因组蛋白序列的遗传特性第102-104页
     ·蛋白核小球藻基因组编码蛋白的功能多样性分析第104-106页
     ·绿藻直系同源基因的鉴定和分析第106-107页
     ·绿藻直系同源基因的功能和进化分析第107-114页
   ·本章小结第114-115页
第6章 蛋白核小球藻异养/光诱导切换过程的转录组学研究第115-135页
   ·引言第115页
   ·材料和方法第115-117页
     ·藻种和培养条件第115-116页
     ·转录组文库构建方法和测序第116页
     ·测序reads统计分析第116页
     ·基因表达水平标准化处理第116页
     ·差异表达基因和代谢途径分析第116-117页
   ·结果和讨论第117-133页
     ·RNA-seq reads统计分析第117-120页
     ·差异表达基因的聚类和功能分析第120-124页
     ·异养和中心碳代谢途径重构和表达调控第124-127页
     ·光合作用和色素代谢相关途径表达调控第127-128页
     ·脂肪酸和甘油酯合成代谢途径的重构和差异表达第128-132页
     ·淀粉合成和代谢途径及其差异表达第132-133页
   ·本章小结第133-135页
第7章 结论和展望第135-139页
   ·研究结论第135-137页
   ·特色与创新之处第137页
   ·展望与建议第137-139页
参考文献第139-153页
攻读学位期间的主要研究成果第153-155页
致谢第155-157页
个人简介第157-158页
附录第158-169页

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