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与海岛棉纤维发育相关AG-Subfamily和MYB类转录因子的功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
目录第12-16页
缩略词表第16-18页
第一章 文献综述第18-43页
 1 引言第18页
 2 棉纤维细胞发育特点和基本过程第18-20页
 3 棉纤维、叶表皮毛和根毛形态比较第20-24页
 4 与毛状体发育有关转录因子研究进展第24-28页
 5 与棉纤维发育相关基因研究进展第28-34页
   ·MYB 类转录因子和棉纤维发育第28-30页
   ·其它与棉纤维发育相关基因研究进展第30-34页
 6 AG-SUBFAMILY 类转录因子和花发育模式第34-41页
   ·MADS 转录因子的基本结构特点第34-35页
   ·花发育相关转录因子第35-37页
   ·“ABCDE”模型和四聚体模型第37-41页
 7 本研究的立题依据、目的、意义及技术路线第41-43页
第二章 材料和方法第43-92页
   ·实验材料第43-53页
     ·植物材料第43-44页
     ·菌株和质粒第44-45页
     ·各种酶、试剂盒和常用试剂第45-46页
     ·各种试剂及培养基第46-50页
     ·各种引物序列第50-52页
     ·主要仪器设备第52-53页
   ·研究方法第53-92页
     ·棉花胚珠Total RNA 抽提第53-54页
     ·RNA 样品纯度及浓度检测第54-56页
     ·cDNA 样品制备第56页
     ·核心片段的克隆第56-62页
       ·核心片段的扩增第56-58页
       ·核心片段的回收第58-59页
       ·核心片段的连接第59页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第59-60页
       ·核心片段转化和验证第60-61页
       ·质粒抽提第61-62页
     ·目标基因的3’端克隆第62-65页
       ·3’cDNA 样品准备第63-64页
       ·目标基因的3’端克隆第64-65页
       ·基因3’端片段的回收、连接、转化和验证第65页
     ·目标基因的5’端克隆第65-67页
       ·5’端cDNA 样品准备第65-66页
       ·5’RACE 扩增基因5’端第66页
       ·基因5’端片段的回收、连接、转化和测序第66-67页
     ·全长cDNA 基因获得第67-68页
     ·基因组Southern blot 分析第68-73页
       ·海岛棉基因组DNA 提取第68页
       ·基因组全长序列获得第68-69页
       ·目标基因的全长分析第69页
       ·海岛棉基因组Southern blot 分析第69-73页
         ·基因组酶切和电泳第69-70页
         ·转膜,固定第70-71页
         ·探针制备第71页
         ·杂交第71-72页
         ·洗膜第72页
         ·检测第72-73页
     ·生物信息学分析第73-74页
     ·RT-PCR 分析第74-76页
       ·cDNA 样品准备第74-75页
       ·海岛棉不同组织RT-PCR 分析第75-76页
     ·Real-time PCR 分析第76-78页
       ·cDNA 样品准备第76-77页
       ·标准曲线绘制第77页
       ·海岛棉Real-time PCR 分析第77-78页
     ·RNA in situ hybridization 分析第78-81页
       ·试剂配制第78页
       ·材料固定第78页
       ·探针合成第78-79页
       ·切片第79页
       ·杂交前样品处理第79-80页
       ·杂交第80页
       ·杂交后处理第80页
       ·抗体染色和显色反应第80-81页
     ·拟南芥培养与转化第81-92页
       ·植物表达载体构建方法第81-85页
         ·ORF-pMD18-T 重组子的构建第81-82页
         ·ORF 片段的分离第82-83页
         ·pCAMBIA-1304 载体大片段的分离第83页
         ·植物表达载体构建第83页
         ·农杆菌GV3101 感受态细胞制备第83-84页
         ·质粒转化农杆菌GV3101第84-85页
       ·拟南芥培养和转化第85-92页
         ·拟南芥培养第85页
         ·拟南芥转化第85-86页
         ·转基因植株抗生素筛选第86页
         ·转基因拟南芥PCR 分析第86-88页
           ·拟南芥DNA 快速抽提第86-87页
           ·转基因拟南芥PCR 验证第87-88页
         ·转基因拟南芥RT-PCR 分析第88-90页
           ·拟南芥Total RNA 快速抽提第88-89页
           ·转基因拟南芥RT-PCR 分析第89-90页
         ·转基因拟南芥表型考察第90-92页
           ·扫描电镜观察第90-91页
           ·GUS 染色第91-92页
第三章 结果和分析第92-168页
   ·海岛棉GBAGL1 基因的克隆及功能分析第92-111页
     ·海岛棉GbAGL1 基因全长克隆第93页
     ·海岛棉基因GbAGL1 基因的生物信息学分析第93-96页
     ·GbAGL1 基因Southern blot 分析第96-97页
     ·GbAGL1 基因在海岛棉中的表达模式分析第97-104页
       ·GbAGL1 基因在海岛棉不同组织中的RT-PCR 分析第97-98页
       ·GbAGL1 基因在海岛棉不同组织中的Real-time PCR 分析第98-101页
       ·GbAGL1 基因RNA in situ hybridization 分析第101-104页
     ·GbAGL1 基因在拟南芥中的超表达分析第104-109页
       ·转GbAGL1 基因拟南芥抗生素筛选第105页
       ·转GbAGL1 基因拟南芥分子检测第105-106页
       ·转GbAGL1 基因拟南芥表型分析第106-109页
     ·小结第109-111页
   ·海岛棉GBAGL2 基因的克隆及功能分析第111-129页
     ·海岛棉GbAGL2 基因全长克隆第111-113页
     ·海岛棉GbAGL2 基因生物信息学分析第113-115页
     ·GbAGL2 基因Southern blot 分析第115页
     ·GbAGL2 基因在海岛棉中的表达模式分析第115-123页
       ·GbAGL2 基因RT-PCR 分析第116-117页
       ·GbAGL2 基因在海岛棉不同组织中的Real-time PCR 分析第117-120页
       ·GbAGL2 基因RNA in situ hybridization 分析第120-123页
     ·GbAGL2 基因在拟南芥中的超表达分析第123-128页
       ·转GbAGL2 基因拟南芥抗生素筛选第123-124页
       ·转GbAGL2 基因拟南芥分子检测第124-125页
       ·转GbAGL2 基因拟南芥表型分析第125-128页
     ·小结第128-129页
   ·海岛棉MYB 家族基因的克隆及功能分析第129-145页
     ·海岛棉MYB 基因全长克隆第130-131页
     ·海岛棉基因MYB 基因生物信息学分析第131-134页
     ·GbMYB1 基因Southern blot 分析第134-135页
     ·GbMYB1 基因在海岛棉中表达模式分析第135-140页
       ·GbMYB1 基因RT-PCR 分析第135-136页
       ·GbMYB1 基因Real-time PCR 分析第136-139页
       ·GbMYB1 基因RNA in situ hybridization 分析第139-140页
     ·GbMYB1 基因在拟南芥中的超表达分析第140-144页
       ·转GbMYB1 基因拟南芥抗生素筛选第141页
       ·转GbMYB1 基因拟南芥分子检测第141-142页
       ·转GbMYB1 基因拟南芥的表型分析第142-144页
     ·小结第144-145页
   ·GBMYB2 基因的克隆和功能分析第145-156页
     ·GbMYB2 基因的全长克隆第145页
     ·GbMYB2 基因的生物信息学分析第145页
     ·GbMYB2 基因Southern blot 分析第145-146页
     ·GbMYB2 基因在海岛棉中表达模式分析第146-151页
       ·GbMYB2 基因RT-PCR 分析第146-147页
       ·GbMYB2 基因Real-time PCR 分析第147-150页
       ·GbMYB2 基因RNA in situ hybridization 分析第150-151页
     ·GbMYB2 基因在拟南芥中的超表达分析第151-156页
       ·转GbMYB2 基因拟南芥抗生素筛选第152页
       ·转GbMYB2 基因拟南芥分子检测第152-153页
       ·转GbMYB2 基因拟南芥的表型分析第153-156页
     ·小结第156页
   ·GBMYB3 基因的功能分析第156-168页
     ·GbMYB3 基因的全长克隆第156页
     ·GbMYB3 基因的生物信息学分析第156-157页
     ·GbMYB3 基因Southern blot 分析第157-158页
     ·GbMYB3 基因在海岛棉中的表达模式分析第158-163页
       ·GbMYB3 基因RT-PCR 分析第158-159页
       ·GbMYB3 基因Real-time PCR 分析第159-162页
       ·GbMYB3 基因RNA in situ hybridization 分析第162-163页
     ·GbMYB3 基因在拟南芥中的超表达分析第163-167页
       ·转GbMYB3 基因拟南芥抗生素筛选第164页
       ·转GbMYB3 基因拟南芥分子检测第164-165页
       ·转GbMYB3 基因拟南芥表型分析第165-167页
     ·小结第167-168页
第四章 总结与展望第168-172页
   ·研究总结第168-169页
   ·本工作的创新点第169-170页
   ·后续工作展望第170-172页
参考文献第172-181页
攻读博士学位期间已发表或录用的论文第181-182页
攻读博士学位期间参与的科研项目第182-183页
致谢第183-186页

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