摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
目录 | 第12-16页 |
缩略词表 | 第16-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-43页 |
1 引言 | 第18页 |
2 棉纤维细胞发育特点和基本过程 | 第18-20页 |
3 棉纤维、叶表皮毛和根毛形态比较 | 第20-24页 |
4 与毛状体发育有关转录因子研究进展 | 第24-28页 |
5 与棉纤维发育相关基因研究进展 | 第28-34页 |
·MYB 类转录因子和棉纤维发育 | 第28-30页 |
·其它与棉纤维发育相关基因研究进展 | 第30-34页 |
6 AG-SUBFAMILY 类转录因子和花发育模式 | 第34-41页 |
·MADS 转录因子的基本结构特点 | 第34-35页 |
·花发育相关转录因子 | 第35-37页 |
·“ABCDE”模型和四聚体模型 | 第37-41页 |
7 本研究的立题依据、目的、意义及技术路线 | 第41-43页 |
第二章 材料和方法 | 第43-92页 |
·实验材料 | 第43-53页 |
·植物材料 | 第43-44页 |
·菌株和质粒 | 第44-45页 |
·各种酶、试剂盒和常用试剂 | 第45-46页 |
·各种试剂及培养基 | 第46-50页 |
·各种引物序列 | 第50-52页 |
·主要仪器设备 | 第52-53页 |
·研究方法 | 第53-92页 |
·棉花胚珠Total RNA 抽提 | 第53-54页 |
·RNA 样品纯度及浓度检测 | 第54-56页 |
·cDNA 样品制备 | 第56页 |
·核心片段的克隆 | 第56-62页 |
·核心片段的扩增 | 第56-58页 |
·核心片段的回收 | 第58-59页 |
·核心片段的连接 | 第59页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第59-60页 |
·核心片段转化和验证 | 第60-61页 |
·质粒抽提 | 第61-62页 |
·目标基因的3’端克隆 | 第62-65页 |
·3’cDNA 样品准备 | 第63-64页 |
·目标基因的3’端克隆 | 第64-65页 |
·基因3’端片段的回收、连接、转化和验证 | 第65页 |
·目标基因的5’端克隆 | 第65-67页 |
·5’端cDNA 样品准备 | 第65-66页 |
·5’RACE 扩增基因5’端 | 第66页 |
·基因5’端片段的回收、连接、转化和测序 | 第66-67页 |
·全长cDNA 基因获得 | 第67-68页 |
·基因组Southern blot 分析 | 第68-73页 |
·海岛棉基因组DNA 提取 | 第68页 |
·基因组全长序列获得 | 第68-69页 |
·目标基因的全长分析 | 第69页 |
·海岛棉基因组Southern blot 分析 | 第69-73页 |
·基因组酶切和电泳 | 第69-70页 |
·转膜,固定 | 第70-71页 |
·探针制备 | 第71页 |
·杂交 | 第71-72页 |
·洗膜 | 第72页 |
·检测 | 第72-73页 |
·生物信息学分析 | 第73-74页 |
·RT-PCR 分析 | 第74-76页 |
·cDNA 样品准备 | 第74-75页 |
·海岛棉不同组织RT-PCR 分析 | 第75-76页 |
·Real-time PCR 分析 | 第76-78页 |
·cDNA 样品准备 | 第76-77页 |
·标准曲线绘制 | 第77页 |
·海岛棉Real-time PCR 分析 | 第77-78页 |
·RNA in situ hybridization 分析 | 第78-81页 |
·试剂配制 | 第78页 |
·材料固定 | 第78页 |
·探针合成 | 第78-79页 |
·切片 | 第79页 |
·杂交前样品处理 | 第79-80页 |
·杂交 | 第80页 |
·杂交后处理 | 第80页 |
·抗体染色和显色反应 | 第80-81页 |
·拟南芥培养与转化 | 第81-92页 |
·植物表达载体构建方法 | 第81-85页 |
·ORF-pMD18-T 重组子的构建 | 第81-82页 |
·ORF 片段的分离 | 第82-83页 |
·pCAMBIA-1304 载体大片段的分离 | 第83页 |
·植物表达载体构建 | 第83页 |
·农杆菌GV3101 感受态细胞制备 | 第83-84页 |
·质粒转化农杆菌GV3101 | 第84-85页 |
·拟南芥培养和转化 | 第85-92页 |
·拟南芥培养 | 第85页 |
·拟南芥转化 | 第85-86页 |
·转基因植株抗生素筛选 | 第86页 |
·转基因拟南芥PCR 分析 | 第86-88页 |
·拟南芥DNA 快速抽提 | 第86-87页 |
·转基因拟南芥PCR 验证 | 第87-88页 |
·转基因拟南芥RT-PCR 分析 | 第88-90页 |
·拟南芥Total RNA 快速抽提 | 第88-89页 |
·转基因拟南芥RT-PCR 分析 | 第89-90页 |
·转基因拟南芥表型考察 | 第90-92页 |
·扫描电镜观察 | 第90-91页 |
·GUS 染色 | 第91-92页 |
第三章 结果和分析 | 第92-168页 |
·海岛棉GBAGL1 基因的克隆及功能分析 | 第92-111页 |
·海岛棉GbAGL1 基因全长克隆 | 第93页 |
·海岛棉基因GbAGL1 基因的生物信息学分析 | 第93-96页 |
·GbAGL1 基因Southern blot 分析 | 第96-97页 |
·GbAGL1 基因在海岛棉中的表达模式分析 | 第97-104页 |
·GbAGL1 基因在海岛棉不同组织中的RT-PCR 分析 | 第97-98页 |
·GbAGL1 基因在海岛棉不同组织中的Real-time PCR 分析 | 第98-101页 |
·GbAGL1 基因RNA in situ hybridization 分析 | 第101-104页 |
·GbAGL1 基因在拟南芥中的超表达分析 | 第104-109页 |
·转GbAGL1 基因拟南芥抗生素筛选 | 第105页 |
·转GbAGL1 基因拟南芥分子检测 | 第105-106页 |
·转GbAGL1 基因拟南芥表型分析 | 第106-109页 |
·小结 | 第109-111页 |
·海岛棉GBAGL2 基因的克隆及功能分析 | 第111-129页 |
·海岛棉GbAGL2 基因全长克隆 | 第111-113页 |
·海岛棉GbAGL2 基因生物信息学分析 | 第113-115页 |
·GbAGL2 基因Southern blot 分析 | 第115页 |
·GbAGL2 基因在海岛棉中的表达模式分析 | 第115-123页 |
·GbAGL2 基因RT-PCR 分析 | 第116-117页 |
·GbAGL2 基因在海岛棉不同组织中的Real-time PCR 分析 | 第117-120页 |
·GbAGL2 基因RNA in situ hybridization 分析 | 第120-123页 |
·GbAGL2 基因在拟南芥中的超表达分析 | 第123-128页 |
·转GbAGL2 基因拟南芥抗生素筛选 | 第123-124页 |
·转GbAGL2 基因拟南芥分子检测 | 第124-125页 |
·转GbAGL2 基因拟南芥表型分析 | 第125-128页 |
·小结 | 第128-129页 |
·海岛棉MYB 家族基因的克隆及功能分析 | 第129-145页 |
·海岛棉MYB 基因全长克隆 | 第130-131页 |
·海岛棉基因MYB 基因生物信息学分析 | 第131-134页 |
·GbMYB1 基因Southern blot 分析 | 第134-135页 |
·GbMYB1 基因在海岛棉中表达模式分析 | 第135-140页 |
·GbMYB1 基因RT-PCR 分析 | 第135-136页 |
·GbMYB1 基因Real-time PCR 分析 | 第136-139页 |
·GbMYB1 基因RNA in situ hybridization 分析 | 第139-140页 |
·GbMYB1 基因在拟南芥中的超表达分析 | 第140-144页 |
·转GbMYB1 基因拟南芥抗生素筛选 | 第141页 |
·转GbMYB1 基因拟南芥分子检测 | 第141-142页 |
·转GbMYB1 基因拟南芥的表型分析 | 第142-144页 |
·小结 | 第144-145页 |
·GBMYB2 基因的克隆和功能分析 | 第145-156页 |
·GbMYB2 基因的全长克隆 | 第145页 |
·GbMYB2 基因的生物信息学分析 | 第145页 |
·GbMYB2 基因Southern blot 分析 | 第145-146页 |
·GbMYB2 基因在海岛棉中表达模式分析 | 第146-151页 |
·GbMYB2 基因RT-PCR 分析 | 第146-147页 |
·GbMYB2 基因Real-time PCR 分析 | 第147-150页 |
·GbMYB2 基因RNA in situ hybridization 分析 | 第150-151页 |
·GbMYB2 基因在拟南芥中的超表达分析 | 第151-156页 |
·转GbMYB2 基因拟南芥抗生素筛选 | 第152页 |
·转GbMYB2 基因拟南芥分子检测 | 第152-153页 |
·转GbMYB2 基因拟南芥的表型分析 | 第153-156页 |
·小结 | 第156页 |
·GBMYB3 基因的功能分析 | 第156-168页 |
·GbMYB3 基因的全长克隆 | 第156页 |
·GbMYB3 基因的生物信息学分析 | 第156-157页 |
·GbMYB3 基因Southern blot 分析 | 第157-158页 |
·GbMYB3 基因在海岛棉中的表达模式分析 | 第158-163页 |
·GbMYB3 基因RT-PCR 分析 | 第158-159页 |
·GbMYB3 基因Real-time PCR 分析 | 第159-162页 |
·GbMYB3 基因RNA in situ hybridization 分析 | 第162-163页 |
·GbMYB3 基因在拟南芥中的超表达分析 | 第163-167页 |
·转GbMYB3 基因拟南芥抗生素筛选 | 第164页 |
·转GbMYB3 基因拟南芥分子检测 | 第164-165页 |
·转GbMYB3 基因拟南芥表型分析 | 第165-167页 |
·小结 | 第167-168页 |
第四章 总结与展望 | 第168-172页 |
·研究总结 | 第168-169页 |
·本工作的创新点 | 第169-170页 |
·后续工作展望 | 第170-172页 |
参考文献 | 第172-181页 |
攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第181-182页 |
攻读博士学位期间参与的科研项目 | 第182-183页 |
致谢 | 第183-186页 |