| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 一、前言 | 第11-27页 |
| ·马铃薯的生产现状 | 第11页 |
| ·马铃薯淀粉 | 第11-14页 |
| ·马铃薯淀粉用途 | 第11-12页 |
| ·马铃薯淀粉性质及合成途径 | 第12-13页 |
| ·马铃薯淀粉研究现状 | 第13-14页 |
| ·马铃薯病毒病 | 第14-19页 |
| ·马铃薯Y病毒 | 第14-16页 |
| ·马铃薯X病毒 | 第16-17页 |
| ·马铃薯卷叶病毒 | 第17页 |
| ·马铃薯病毒病的危害及解决方法 | 第17-19页 |
| ·RNAi技术 | 第19-21页 |
| ·RNAi的发现 | 第19页 |
| ·RNAi作用机理 | 第19-20页 |
| ·RNAi在植物育种中的应用 | 第20-21页 |
| ·转基因植物的研究现状 | 第21-25页 |
| ·转基因植株的安全性问题 | 第21-22页 |
| ·获得无筛选标记转基因植物的方法 | 第22-25页 |
| ·本文研究内容 | 第25-27页 |
| ·获得含高支链淀粉的抗病毒转基因马铃薯 | 第25-26页 |
| ·获得无筛选标记转基因马铃薯 | 第26-27页 |
| 二、获得含高支链淀粉的抗病毒转基因马铃薯的研究 | 第27-41页 |
| ·实验材料与方法 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-38页 |
| ·阳性转基因植株的鉴定 | 第28-30页 |
| ·检测转基因植株GBSS表达量 | 第30-32页 |
| ·马铃薯淀粉颗粒碘染色 | 第32-33页 |
| ·摩擦接种病毒 | 第33-35页 |
| ·Real-time PCR检测病毒积累量 | 第35-37页 |
| ·摩擦接种转基因马铃薯植株的病毒积累量与GBSS相对表达量的关系 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·阳性转基因植株的鉴定 | 第38-39页 |
| ·转基因植株相对表达量分析 | 第39页 |
| ·转基因植株的病毒抗性 | 第39-40页 |
| ·摩擦接种转基因马铃薯植株的病毒积累量与GBSS相对表达量的关系 | 第40-41页 |
| 三、获得含高支链淀粉的无筛选标记转基因马铃薯的研究 | 第41-51页 |
| ·实验材料与方法 | 第41-44页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·无筛选标记的表达载体的改造 | 第44-45页 |
| ·GBSS启动子-GBSS反义序列-GBSS终止子为目的序列的载体构建 | 第45-46页 |
| ·CaMV35s启动子-GBSS反向重复序列-ocs终止子为目的序列的载体构建 | 第46-47页 |
| ·目的序列导入无筛选标记表达载体中 | 第47页 |
| ·三亲融合 | 第47页 |
| ·测序鉴定 | 第47页 |
| ·转化马铃薯 | 第47页 |
| ·马铃薯转化株鉴定 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·构建载体 | 第49页 |
| ·鉴定无筛选标记转基因植株 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录1 实验所用引物 | 第57-58页 |
| 附录2 试剂的配方及储存 | 第58-59页 |
| 附录3 植物叶片总RNA和植物基因组DNA的提取方法 | 第59-61页 |
| 附录4 反转录、PCR和酶切 | 第61-63页 |
| 附录5 农杆菌转化 | 第63-64页 |
| 附录6 摩擦接种方法 | 第64-65页 |
| 附录7 抗PVY的高支链淀粉转基因马铃薯检测结果 | 第65-66页 |
| 附录8 抗三种病毒(PVX、PVY、PLRV)的高支链淀粉转基因马铃薯检测结果 | 第66-67页 |
| 附录9 RNAi载体图 | 第67-68页 |
| 附录10 pGEM-T Easy载体图 | 第68-69页 |
| 附录11 显微镜下观察碘染色试管薯效果图 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
