| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 缩写及中英文对照 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-19页 |
| ·胰岛素抵抗是联系肥胖,2型糖尿病和心血管疾病的重要枢纽 | 第10页 |
| ·胰岛素信号转导通路 | 第10-12页 |
| ·生理状态下胰岛素促进血管舒张功能易化骨骼肌对葡萄糖的摄取 | 第12-14页 |
| ·病理状态下内皮功能紊乱和胰岛素抵抗的相互关系 | 第14-16页 |
| ·衔接蛋白APPL1 | 第16-18页 |
| ·主要研究目标 | 第18-19页 |
| 材料与方法 | 第19-40页 |
| ·材料 | 第19-28页 |
| ·方法 | 第28-40页 |
| 第一部分 APPL1通过平衡NO和ET-1产生改善肥胖诱导的血管胰岛素抵抗 | 第40-63页 |
| ·引言 | 第40-42页 |
| ·技术路线 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-61页 |
| ·FLAG-APPL1在转基因小鼠血管组织中成功表达 | 第43页 |
| ·在APPL1转基因小鼠肠系膜动脉中,过表达APPL1选择性增强胰岛素诱导的内皮依赖的血管舒张 | 第43-47页 |
| ·在APPL1转基因小鼠肠系膜动脉中,过表达APPL1拮抗肥胖相关的胰岛素诱导的舒张功能受损 | 第47-50页 |
| ·在高脂饮食的肥胖小鼠中,过表达APPL1可以阻断胰岛素诱导的ET-1介导的血管收缩 | 第50-53页 |
| ·在饮食诱导的肥胖小鼠中,过表达APPL1增强胰岛素刺激的Akt-eNOS信号转导,同时降低ERK1/2 MAPK的激活 | 第53-56页 |
| ·APPL1敲除小鼠基因型及蛋白表达水平鉴定 | 第56-57页 |
| ·敲除APPL1基因加重小鼠内皮功能紊乱 | 第57-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第二部分 APPL1双向调节胰岛素信号转导的分子机制 | 第63-76页 |
| ·前言 | 第63-64页 |
| ·技术路线 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-73页 |
| ·利用siRNA方法在培养的人脐静脉内皮细胞系中敲低APPL1 | 第65页 |
| ·敲低APPL1导致胰岛素刺激Akt/eNOS信号途径受损 | 第65-67页 |
| ·敲低APPL1导致TRB3与Akt结合增多并抑制Akt/eNOS信号途径 | 第67-69页 |
| ·APPL1在胰岛素刺激的Akt-eNOS和ERK1/2 MAPK信号途径中起相反作用 | 第69-70页 |
| ·APPL1调节上游Raf-1磷酸化位点转变 | 第70-71页 |
| ·敲低APPL1增加胰岛素刺激内皮细胞释放ET-1 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 第三部分 过表达APPL1改善高脂饮食喂养小鼠的胰岛素敏感性 | 第76-88页 |
| ·前言 | 第76-77页 |
| ·技术路线 | 第77-78页 |
| ·结果 | 第78-86页 |
| ·过表达APPL1增加转基因小鼠的摄食量但不显著增加体重 | 第78-79页 |
| ·高脂喂养下APPL1转基因及野生型对照小鼠的体内脂肪分布 | 第79-80页 |
| ·过表达APPL1显著改善高脂饮食诱导的高血糖和高胰岛素血症 | 第80-81页 |
| ·过表达APPL1显著改善高脂喂养导致的糖耐量和胰岛素耐量受损 | 第81-82页 |
| ·高脂饮食诱导下APPL1转基因小鼠血脂水平较低 | 第82-83页 |
| ·APPL1转基因小鼠能量消耗增加 | 第83-84页 |
| ·APPL1转基因小鼠的中心体温与UCP-1mRNA表达水平显著增高 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| ·小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 附录 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 综述 | 第97-107页 |
| 参考文献 | 第103-107页 |
