中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
前言 | 第12-18页 |
材料与方法 | 第18-44页 |
一.材料 | 第18-24页 |
1.细胞系与脐带血 | 第18页 |
2.菌株与质粒 | 第18-20页 |
3.工具酶及分子量标准 | 第20页 |
4.试剂盒 | 第20-21页 |
5.主要生化试剂 | 第21页 |
6.主要仪器 | 第21页 |
7.放射性标记化合物 | 第21-22页 |
8.引物 | 第22-23页 |
9.分析软件 | 第23-24页 |
二.实验方法 | 第24-44页 |
1.细胞学实验 | 第24-27页 |
2.RNA提取 | 第27-28页 |
3.RNA的质量检测 | 第28页 |
4.DDRT-PCR分析 | 第28-34页 |
5.Northern杂交 | 第34-35页 |
6.miRNA基因簇的鉴定与同源性分析 | 第35页 |
7.miRNA的PAGE/Northern杂交 | 第35-37页 |
8.质粒的构建 | 第37-40页 |
9.细胞的联苯胺染色 | 第40页 |
10.细胞中蛋白的提取和Western Blotting | 第40-43页 |
11.K562细胞红系分化相关miRNA-Microarray | 第43-44页 |
结果 | 第44-86页 |
第一部分 红系分化前后mRNA和miRNA差异表达分析 | 第44-52页 |
1.K562细胞红系分化前后mRNA差异表达分析 | 第44-49页 |
2.K562细胞红系分化前后miRNA差异表达microarray分析 | 第49-52页 |
第二部分 mir-223的表达鉴定及初步功能分析 | 第52-64页 |
1.mir-223的生物起源及靶基因分析 | 第52-53页 |
2.mir-223的表达鉴定 | 第53-58页 |
3.mir-223功能的初步研究 | 第58-64页 |
第三部分 人miRNA簇基因组组织及造血表达谱分析 | 第64-86页 |
1.人miRNA簇基因组组织 | 第64页 |
2.人miRNA基因簇启动子分析 | 第64-70页 |
3.人miRNA基因簇同源性分析 | 第70-74页 |
4.人miRNA基因簇的造血表达分析 | 第74-86页 |
讨论 | 第86-93页 |
一.使用改进的DDRT-PCR技术筛选红系分化相关EST | 第87-88页 |
二.使用miRNA-Microarray和PAGE/Northern方法分析miRNA表达 | 第88-89页 |
三.miRNA-Microarray和PAGE/Northern表达数据分析 | 第89-90页 |
四.miRNA-223在人造血组织中的表达鉴定和初步功能分析 | 第90-91页 |
五.人miRNA基因簇的鉴定与造血表达分析 | 第91-93页 |
展望 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-100页 |
小结 | 第100-101页 |
英文名词及缩写 | 第101-103页 |
文献综述(一) | 第103-117页 |
文献综述(二) | 第117-134页 |
攻读博士期间发表和待发表论文 | 第134-135页 |
致谢 | 第135页 |