中文摘要 | 第1-7页 |
一、 文献综述 | 第7-17页 |
1.1、 植物花粉发育的分子生物学研究进展 | 第7-14页 |
1.1.1、 花药的解剖结构 | 第7-8页 |
1.1.2、 花药、花粉形成过程中的细胞分化 | 第8页 |
1.1.3、 花粉的发育 | 第8-10页 |
1.1.4、 花粉发育相关基因的克隆及其表达 | 第10-12页 |
1.1.5、 花粉发育相关基因的调控 | 第12-13页 |
1.1.6、 花粉发育的基因工程 | 第13-14页 |
1.2、 植物花粉发育相关基因克隆方法 | 第14-17页 |
1.2.1、 功能产物的克隆方法 | 第14页 |
1.2.2、 转座子标签方法 | 第14页 |
1.2.3、 同源序列克隆方法 | 第14-15页 |
1.2.4、 减法杂交克隆方法 | 第15页 |
1.2.5、 mRNA差别显示法 | 第15-16页 |
1.2.6、 cDNA-AFLP | 第16-17页 |
二、 引言 | 第17-18页 |
三、 实验思路 | 第18-19页 |
四、 材料与方法 | 第19-31页 |
4.1、 实验材料 | 第19-21页 |
4.1.l、 棉花洞A不育材料 | 第19页 |
4.1.2、 主要化学试剂 | 第19页 |
4.1.3、 克隆载体及宿主菌 | 第19页 |
4.1.4、 主要仪器设备 | 第19-20页 |
4.1.5、 主要缓冲液组成 | 第20-21页 |
4.2、 实验方法 | 第21-31页 |
4.2.1、 田间实验 | 第21页 |
4.2.2、 细胞学实验 | 第21页 |
4.2.3、 棉花总RNA提取 | 第21-22页 |
4.2.4、 mRNA纯化 | 第22页 |
4.2.5、 cDNA合成 | 第22-23页 |
4.2.6、 cDNA-AFLP分析 | 第23-25页 |
4.2.7、 差异片段的回收、克隆、测序 | 第25-27页 |
4.2.8、 组织特异性鉴定 | 第27-28页 |
4.2.9、 基因组Southern杂交 | 第28-29页 |
4.2.10、 cDNA片段的3'RACE分析 | 第29-30页 |
4.2.11、 相似性比较 | 第30-31页 |
五、 结果与分析 | 第31-48页 |
5.1、 棉花花粉发育进程与外部形态指标 | 第31页 |
5.2、 RNA的提取及mRNA纯化 | 第31-32页 |
5.3、 cDNA-AFLP结果的检测 | 第32-33页 |
5.4、 棉花花药发育的cDNA-AFLP | 第33-35页 |
5.5、 差异片段的回收及再扩增 | 第35-36页 |
5.6、 组织特异性鉴定 | 第36-38页 |
5.7、 克隆GHA27、GHA28、GHA47的序列分析 | 第38-43页 |
5.8、 GHA27的3'RACE | 第43-44页 |
5.9、 GHA27的同源性比较 | 第44-48页 |
5.10、 GHA27的Southern杂交 | 第48页 |
六、 讨论 | 第48-53页 |
6.1、 棉花RNA的提取方法 | 第48-49页 |
6.2、 棉花花药的cDNA-AFLP与雄性不育 | 第49-50页 |
6.3、 cDNA-AFLP回收片段的特异性鉴定 | 第50-51页 |
6.4、 差别显示回收片段的延伸 | 第51-52页 |
6.5、 棉花ADP-ribosylation factor基因的功能预测 | 第52-53页 |
6.6、 棉花cDNA-AFLP的进一步研究 | 第53页 |
七、 结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
英文摘要 | 第64-66页 |
缩略词表 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |