中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-17页 |
材料与方法 | 第17-25页 |
一、 细胞培养与诱导分化处理 | 第17页 |
1. 细胞株 | 第17页 |
2. 细胞培养 | 第17页 |
3. 诱导分化试剂与诱导分化处理 | 第17页 |
二、 细胞生长曲线的测定 | 第17-18页 |
三、 细胞分裂指数测定 | 第18页 |
四、 细胞集落形成率测定 | 第18页 |
五、 细胞周期测定 | 第18页 |
六、 甲胎蛋白表达的免疫细胞化学观察 | 第18-19页 |
七、 增殖细胞核抗原表达的免疫细胞化学观察 | 第19页 |
八、 γ-谷氨酸转肽酶活性测定 | 第19页 |
九、 碱性磷酸酶活性生化检测与细胞化学观察 | 第19-20页 |
1. 碱性磷酸酶活性测定 | 第19-20页 |
2. 碱性磷酸酶细胞化学观察 | 第20页 |
十、 酪氨酸-酮戊二酸转氨酶活性测定 | 第20页 |
十一、 光学显微镜样品制备与观察 | 第20页 |
十二、 扫描电镜样品制备与观察 | 第20-21页 |
十三、 透射电镜样品制备与观察 | 第21页 |
十四、 细胞骨架光镜观察 | 第21页 |
十五、 微丝肌动蛋白免疫荧光观察 | 第21页 |
十六、 中间纤维蛋白免疫荧光观察 | 第21-22页 |
十七、 微管管蛋白免疫荧光观察 | 第22页 |
十八、 核骨架-中间纤维系统光镜观察 | 第22页 |
十九、 肝癌相关癌基因蛋白MTp53、Cyclin D1、CDK4、c-myc、NF-κ B、bc1-2免疫细胞化学检测 | 第22-23页 |
二十、 肝癌相关抑癌基因p21~(WAF1/CIP1)、p16、Rb蛋白免疫细胞化学检测 | 第23页 |
二十一、 肝癌细胞PKC、p185、TGF-βRⅡ蛋白免疫细胞化学检测 | 第23页 |
二十二、 肝癌细胞c-myc、p21~(WAF1/CIP1)基因表达核酸原位杂交检测 | 第23-24页 |
二十三、 统计分析 | 第24-25页 |
结果 | 第25-48页 |
一、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用 | 第25-29页 |
1. 细胞生长曲线的测定 | 第25-27页 |
2. 细胞分裂指数测定 | 第27-29页 |
3. 细胞集落形成率测定 | 第29页 |
二、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞增殖分化相关酶活性和抗原表达的影响 | 第29-33页 |
1. 甲胎蛋白检测 | 第29-30页 |
2. 增殖细胞核抗原检测 | 第30页 |
3. γ-谷氨酸转肽酶活性检测 | 第30-31页 |
4. 碱性磷酸酶活性生化检测与细胞化学观察 | 第31-32页 |
5. 酪氨酸—酮戊二酸转氨酶活性检测 | 第32-33页 |
三、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞形态与超微结构的影响 | 第33-35页 |
1. 光学显微镜观察 | 第33-34页 |
2. 扫描电镜观察 | 第34-35页 |
3. 透射电镜观察 | 第35页 |
四、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞骨架与细胞核骨架的影响 | 第35-38页 |
1. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞骨架的影响 | 第35-36页 |
2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞微丝的影响 | 第36页 |
3. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞中间纤维的影响 | 第36-37页 |
4. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞微管的影响 | 第37页 |
5. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞核骨架-中间纤维系统的影响 | 第37-38页 |
五、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞周期分布的影响 | 第38-41页 |
六、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞周期相关基因表达的调控 | 第41-44页 |
1. 鲎素、HNBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞MTp53、p21~(WAF1/CIP1)和p16基因蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞CDK4、Cyclin D1、Rb和c-myc基因蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
七、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞NF-κB和bc1-2基因蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
八、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞PKC、C-erbB-2和TGF-βⅡR基因蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
九、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞c-myc、p21~(WAF1/CIP1)基因mRNA转录的影响 | 第46-48页 |
1. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞c-myc mRNA转录的影响 | 第46页 |
2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞p21~(WAF1/CIP1)mRNA转录的影响 | 第46-48页 |
讨论 | 第48-62页 |
一、 中国鲎鲎素对人肝癌细胞的诱导分化作用 | 第48-53页 |
1. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞增殖的抑制作用 | 第48-49页 |
2. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞形态与超微结构的影响 | 第49-51页 |
3. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞的诱导分化 | 第51-53页 |
二、 中国鲎鲎素诱导人肝癌细胞分化的作用机理 | 第53-59页 |
1. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞周期的调控作用 | 第53-55页 |
2. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞癌基因、抑癌基因表达的调控作用 | 第55-57页 |
3. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞信号传导通路的影响 | 第57-58页 |
4. 中国鲎鲎素诱导人肝癌细胞分化的作用机理 | 第58-59页 |
三、 中国鲎鲎素和HMBA对人肝癌细胞分化的联合诱导作用 | 第59-61页 |
四、 鲎素在海洋生物活性物质抗肿瘤研究中的意义 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-76页 |
附录 | 第76-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
图版及说明 | 第82-119页 |