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中国鲎鲎素对人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化作用与机理研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
前言第11-17页
材料与方法第17-25页
 一、 细胞培养与诱导分化处理第17页
  1. 细胞株第17页
  2. 细胞培养第17页
  3. 诱导分化试剂与诱导分化处理第17页
 二、 细胞生长曲线的测定第17-18页
 三、 细胞分裂指数测定第18页
 四、 细胞集落形成率测定第18页
 五、 细胞周期测定第18页
 六、 甲胎蛋白表达的免疫细胞化学观察第18-19页
 七、 增殖细胞核抗原表达的免疫细胞化学观察第19页
 八、 γ-谷氨酸转肽酶活性测定第19页
 九、 碱性磷酸酶活性生化检测与细胞化学观察第19-20页
  1. 碱性磷酸酶活性测定第19-20页
  2. 碱性磷酸酶细胞化学观察第20页
 十、 酪氨酸-酮戊二酸转氨酶活性测定第20页
 十一、 光学显微镜样品制备与观察第20页
 十二、 扫描电镜样品制备与观察第20-21页
 十三、 透射电镜样品制备与观察第21页
 十四、 细胞骨架光镜观察第21页
 十五、 微丝肌动蛋白免疫荧光观察第21页
 十六、 中间纤维蛋白免疫荧光观察第21-22页
 十七、 微管管蛋白免疫荧光观察第22页
 十八、 核骨架-中间纤维系统光镜观察第22页
 十九、 肝癌相关癌基因蛋白MTp53、Cyclin D1、CDK4、c-myc、NF-κ B、bc1-2免疫细胞化学检测第22-23页
 二十、 肝癌相关抑癌基因p21~(WAF1/CIP1)、p16、Rb蛋白免疫细胞化学检测第23页
 二十一、 肝癌细胞PKC、p185、TGF-βRⅡ蛋白免疫细胞化学检测第23页
 二十二、 肝癌细胞c-myc、p21~(WAF1/CIP1)基因表达核酸原位杂交检测第23-24页
 二十三、 统计分析第24-25页
结果第25-48页
 一、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用第25-29页
  1. 细胞生长曲线的测定第25-27页
  2. 细胞分裂指数测定第27-29页
  3. 细胞集落形成率测定第29页
 二、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞增殖分化相关酶活性和抗原表达的影响第29-33页
  1. 甲胎蛋白检测第29-30页
  2. 增殖细胞核抗原检测第30页
  3. γ-谷氨酸转肽酶活性检测第30-31页
  4. 碱性磷酸酶活性生化检测与细胞化学观察第31-32页
  5. 酪氨酸—酮戊二酸转氨酶活性检测第32-33页
 三、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞形态与超微结构的影响第33-35页
  1. 光学显微镜观察第33-34页
  2. 扫描电镜观察第34-35页
  3. 透射电镜观察第35页
 四、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞骨架与细胞核骨架的影响第35-38页
  1. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞骨架的影响第35-36页
  2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞微丝的影响第36页
  3. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞中间纤维的影响第36-37页
  4. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞微管的影响第37页
  5. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞核骨架-中间纤维系统的影响第37-38页
 五、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞周期分布的影响第38-41页
 六、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞周期相关基因表达的调控第41-44页
  1. 鲎素、HNBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞MTp53、p21~(WAF1/CIP1)和p16基因蛋白表达的影响第41-42页
  2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞CDK4、Cyclin D1、Rb和c-myc基因蛋白表达的影响第42-44页
 七、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞NF-κB和bc1-2基因蛋白表达的影响第44-45页
 八、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞PKC、C-erbB-2和TGF-βⅡR基因蛋白表达的影响第45-46页
 九、 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞c-myc、p21~(WAF1/CIP1)基因mRNA转录的影响第46-48页
  1. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞c-myc mRNA转录的影响第46页
  2. 鲎素、HMBA及其组合对人肝癌SMMC-7721细胞p21~(WAF1/CIP1)mRNA转录的影响第46-48页
讨论第48-62页
 一、 中国鲎鲎素对人肝癌细胞的诱导分化作用第48-53页
  1. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞增殖的抑制作用第48-49页
  2. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞形态与超微结构的影响第49-51页
  3. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞的诱导分化第51-53页
 二、 中国鲎鲎素诱导人肝癌细胞分化的作用机理第53-59页
  1. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞周期的调控作用第53-55页
  2. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞癌基因、抑癌基因表达的调控作用第55-57页
  3. 中国鲎鲎素对人肝癌细胞信号传导通路的影响第57-58页
  4. 中国鲎鲎素诱导人肝癌细胞分化的作用机理第58-59页
 三、 中国鲎鲎素和HMBA对人肝癌细胞分化的联合诱导作用第59-61页
 四、 鲎素在海洋生物活性物质抗肿瘤研究中的意义第61-62页
结论第62-63页
参考文献第63-76页
附录第76-81页
致谢第81-82页
图版及说明第82-119页

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