珙桐产黄酮内生真菌的分离及鉴定
| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-24页 |
| ·珙桐植物简介 | 第8页 |
| ·植物内生真菌及其次生代谢产物的研究进展 | 第8-24页 |
| ·内生真菌的起源、分布及其生物多样性 | 第10-12页 |
| ·内生真菌生态学 | 第12-14页 |
| ·内生真菌的生态类群 | 第12-13页 |
| ·内生真菌的寄主专一性 | 第13页 |
| ·内生真菌的组织专一性 | 第13-14页 |
| ·植物内生真菌的生物学及生态学作用 | 第14-15页 |
| ·促进宿主的生长 | 第14页 |
| ·增加宿主对环境胁迫的抗性 | 第14-15页 |
| ·增加宿主植物的他感作用 | 第15页 |
| ·植物内生真菌的活性代谢产物的研究 | 第15-19页 |
| ·抗生素类 | 第15-16页 |
| ·杀昆虫物质类 | 第16页 |
| ·植物生长调节剂类 | 第16-17页 |
| ·抗肿瘤活性物质类 | 第17页 |
| ·黄酮类物质的药理作用机制 | 第17-19页 |
| ·分子生物学技术在内生真菌研究中的应用 | 第19-24页 |
| ·现阶段内生真菌研究的一般方法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学技术的引入 | 第20-21页 |
| ·应用分子生物学技术在内生真菌研究中发现的新问题 | 第21-24页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 3 实验材料与方法 | 第25-42页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·供试细菌: | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·试剂的配制及灭菌 | 第26页 |
| ·培养基的配制 | 第26页 |
| ·试剂的配制: | 第26页 |
| ·抗生素用法与用量: | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-42页 |
| ·珙桐组织的采样 | 第27页 |
| ·内生真菌的分离: | 第27-28页 |
| ·内生真菌的纯化 | 第28页 |
| ·内生真菌的形态学鉴定方法 | 第28-29页 |
| ·保存方法 | 第29-30页 |
| ·内生真菌产黄酮的提取 | 第30页 |
| ·抑菌试验 | 第30-31页 |
| ·菌种活化 | 第30页 |
| ·菌悬液的制备 | 第30页 |
| ·最低抑菌浓度的测定 | 第30-31页 |
| ·纸片扩散法检测 | 第31页 |
| ·内生真菌活性代谢产物的鉴定 | 第31-33页 |
| ·薄层层析法 | 第31页 |
| ·高效液相色谱法 | 第31-32页 |
| ·内生真菌菌株D37产黄酮类物质的产率 | 第32-33页 |
| ·产孢结构的形态学鉴定 | 第33页 |
| ·ITS序列的扩增、克隆和测序 | 第33-42页 |
| ·DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·胶回收: | 第35页 |
| ·PCR的扩增和克隆: | 第35-36页 |
| ·DNA的连接 | 第36-37页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第37-38页 |
| ·阳性菌落的筛选与鉴定 | 第38-42页 |
| 4 结果 | 第42-49页 |
| ·消毒剂及消毒时间的确定 | 第42-43页 |
| ·珙桐内生真菌的筛选 | 第43页 |
| ·内生真菌代谢产物的抑菌作用 | 第43-44页 |
| ·高效液相色谱 | 第44-46页 |
| ·内生真菌的形态鉴定 | 第46-47页 |
| ·ITS的扩增 | 第47页 |
| ·ITS的核苷酸序列测定及分析 | 第47-49页 |
| 5 讨论 | 第49-53页 |
| ·内生真菌的分离 | 第49页 |
| ·内生真菌分离方法的有效性 | 第49-50页 |
| ·珙桐不同组织中内生真菌数量分布的探讨 | 第50页 |
| ·内生真菌的活性代谢产物抑菌研究 | 第50页 |
| ·内生真菌代谢产物的鉴定 | 第50-51页 |
| ·珙桐内生真菌D37菌株的鉴定 | 第51页 |
| ·内生真菌与植物的关系 | 第51-53页 |
| 6 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
