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碱茅(Puccinellia tenuifolra)超氧化物歧化酶基因功能解析及对杨树(Populus×euramericana Guariento)遗传转化研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
1 绪论第14-37页
   ·生物体内的氧自由基及其清除系统第14-16页
     ·氧与自由基第14-15页
     ·活性氧的清除系统第15-16页
   ·植物超氧化物歧化酶(SOD)研究进展第16-22页
     ·SOD在植物细胞内的分布第16-17页
     ·SOD的结构和理化性质第17-19页
     ·SOD的生物学功能第19页
     ·植物基因的组织特异性表达第19页
     ·环境胁迫与基因的表达调控第19-20页
     ·提高植物抗氧化能力的基因工程第20-22页
   ·杨树转基因研究进展第22-28页
     ·抗虫转基因工程第22-23页
     ·抗病转基因工程第23-24页
     ·降木质素转基因研究第24-25页
     ·抗除草剂转基因研究第25页
     ·耐盐碱转基因工程第25-26页
     ·抗胁迫转基因研究第26-27页
     ·转基因杨树的安全性第27-28页
     ·转基因杨树的应用前景第28页
   ·转基因植株检测第28-31页
     ·外源基因整合的鉴定第29-30页
     ·外源基因表达蛋白的检测第30页
     ·DNA芯片技术第30-31页
   ·植物转基因沉默的研究进展第31-34页
     ·转基因沉默的机理第31-33页
     ·转基因沉默的控制第33页
     ·MAR第33-34页
   ·本研究的目的与意义第34-37页
2 碱茅SOD基因克隆、亚细胞定位及其逆境下酶活性分析第37-48页
   ·材料与方法第37-41页
     ·材料第38页
     ·方法第38-41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·碱茅SOD基因的分离第41-42页
     ·碱茅SOD(PutSOD)基因的亚细胞定位第42-45页
     ·碱茅各器官在盐碱胁迫下SOD的酶活性分析第45-46页
   ·讨论第46页
   ·本章小结第46-48页
3 碱茅SOD基因在大肠杆菌和酵母中功能解析第48-60页
   ·材料和方法第48-53页
     ·材料第48-49页
     ·方法第49-53页
   ·结果与分析第53-58页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第53页
     ·重组融合蛋白在E.coli.M15中的表达第53-55页
     ·His-PutSOD融合蛋白在M15中的大量表达与纯化第55页
     ·His-PutSOD融合蛋白浓度测定结果第55-56页
     ·酵母表达质粒PutSOD的酶切鉴定第56-57页
     ·pYES2-PutSOD重组基因在酵母中的抗性实验第57-58页
   ·讨论第58-59页
   ·本章小结第59-60页
4 转PutSOD基因拟南芥对逆境适应性第60-70页
   ·材料与试剂第60页
     ·材料第60页
     ·试剂第60页
   ·方法第60-64页
     ·植物表达载体pBI121-PutSOD的构建及转化第60-62页
     ·真空浸润法转基因第62页
     ·转基因拟南芥的鉴定第62-63页
     ·转PutSOD基因拟南芥植株的抗盐碱性分析第63-64页
   ·结果与分析第64-68页
     ·植物表达载体pBI121-PutSOD的构建第64-65页
     ·卡那霉素抗性筛选转基因拟南芥第65页
     ·转pBI121-PutSOD基因的拟南芥植株PCR检测第65页
     ·转PutSOD基因的拟南芥植株的抗盐碱性分析第65-68页
   ·讨论第68-69页
   ·本章小结第69-70页
5 杨树(Populus×euramericana‘Guariento')遗传转化体系的建立及转PutSOD基因植株的获得第70-89页
   ·材料和方法第70-75页
     ·植物材料第70页
     ·培养基和植物激素第70-71页
     ·方法第71-75页
   ·结果与分析第75-86页
     ·不同类型的培养基对再生体系的影响第75-77页
     ·转基因抑菌剂头孢及筛选抗生素浓度的选择与确定第77-80页
     ·欧美杨的遗传转化第80-85页
     ·转基因植株的分子鉴定第85-86页
     ·转基因杨树SOD活性检测第86页
   ·讨论第86-88页
   ·本章小结第88-89页
结论第89-91页
参考文献第91-100页
附录第100-101页
攻读学位期间发表的学术论文第101-102页
致谢第102-103页

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