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人参皂甙肠道代谢物IH-901抗肝癌分子靶点研究

英文缩略语对照表第1-15页
中文摘要第15-17页
英文摘要第17-20页
第一章 前言第20-71页
   ·肝癌分子遗传学研究现状第20-40页
     ·癌基因、抑癌基因与肝癌第20-24页
     ·细胞凋亡与肝癌第24-31页
     ·侵袭转移与肝癌第31-40页
   ·抗肿瘤分子靶点及相关药物第40-51页
     ·细胞信号转导相关靶点第41-42页
     ·细胞凋亡相关的靶点第42-43页
     ·细胞持续增殖相关的靶点第43-45页
     ·细胞周期调控相关靶点第45-46页
     ·侵袭转移相关靶点第46-47页
     ·血管生成相关靶点第47-48页
     ·基因治疗相关靶点第48-49页
     ·抗肿瘤药物研究存在的问题及对策第49-51页
   ·人参皂甙肠道代谢物与肿瘤第51-64页
     ·人参皂甙及其抗肿瘤活性概述第52-55页
     ·人参皂甙肠道代谢途径及其产物概述第55-64页
   ·人参皂甙肠道代谢物IH-901活性概述第64-70页
     ·抗肿瘤活性第64-67页
     ·其它药理学活性第67-70页
   ·本课题研究的目标、内容和意义第70-71页
     ·研究目标和内容第70页
     ·研究意义第70-71页
第二章 实验材料与方法第71-93页
   ·实验材料第71-78页
     ·细胞株、裸鼠第71页
     ·工具酶、抗体第71-72页
     ·主要化学试剂和耗材第72-73页
     ·哺乳动物细胞培养试剂第73-74页
     ·主要仪器第74-75页
     ·主要溶液配置第75-78页
   ·实验方法第78-93页
     ·人参皂甙标准曲线的制备第78页
     ·皂甙的薄层层析第78-79页
     ·超声波提取法第79页
     ·硅胶柱层析第79-80页
     ·酶法转化二醇组皂甙制备体系的建立第80页
     ·酶法转化二醇组皂甙反应的工艺优化第80-82页
     ·柱层析分离纯化酶转化产物及其HPLC纯度测定第82-83页
     ·化合物结构鉴定第83页
     ·细胞培养第83页
     ·细胞的存活率测定(MTT法)第83-84页
     ·Hoechst 33258和AO/EB染色第84页
     ·DNA ladder分析第84页
     ·细胞周期变化及其凋亡细胞的检测第84-85页
     ·线粒体跨膜电位测定第85页
     ·细胞裂解及蛋白质浓度测定第85页
     ·Western blot第85-86页
     ·细胞黏附能力分析第86页
     ·细胞迁移能力分析—划痕实验第86-87页
     ·细胞侵袭能力分析-Transwell~(?)细胞侵袭实验第87页
     ·ELISA检测VEGF和bFGF的表达第87-88页
     ·RT-PCR检测VEGF和bFGF的表达第88-89页
     ·MMP-2和MMP-9活性分析第89-90页
     ·裸鼠皮下成瘤和转移实验第90页
     ·肿瘤微血管密度测定第90-91页
     ·石蜡切片与免疫组织化学染色第91-92页
     ·数据处理第92-93页
第三章 酶法转化制备稀有人参皂甙IH-901的研究第93-114页
   ·结果第94-110页
     ·标准曲线第94页
     ·超声波法提取三七总皂甙正交优化的条件第94-96页
     ·三七总皂甙的TLC图谱第96-97页
     ·柱层析分离纯化三醇组皂甙和二醇组皂甙第97-99页
     ·酶法转化制备体系及其产物分析第99-100页
     ·酶解转化反应的工艺优化结果第100-105页
     ·硅胶柱层析分离纯化酶解产物的TLC鉴定和HPLC分析第105-107页
     ·化合物结构鉴定结果第107-110页
   ·讨论第110-112页
   ·小结第112-114页
第四章 IH-901诱导人肝癌细胞凋亡及其凋亡信号通路第114-138页
   ·结果第115-132页
     ·IH-901对体外培养的肝癌细胞增殖活性的影响第115-117页
     ·IH-901诱导肝癌细胞凋亡的形态学观察第117-120页
     ·IH-901诱发肝癌细胞染色体DNA片段化第120页
     ·IH-901对肝癌细胞周期分布的影响第120-124页
     ·IH-901对肝癌细胞与正常肝细胞体外作用效果的比较第124-127页
     ·IH-901诱导肝癌细胞线粒体跨膜电位下降第127-128页
     ·IH-901诱导细胞色素c从线粒体释放第128页
     ·IH-901激活Caspase-9/Caspase-3第128-129页
     ·IH-901激活Fas/FasL第129-130页
     ·凋亡相关蛋白对IH-901诱导肝癌细胞凋亡的调控第130-132页
   ·讨论第132-136页
   ·小结第136-138页
第五章 IH-901抑制人肝癌细胞侵袭转移及血管生成第138-160页
   ·结果第139-155页
     ·IH-901对脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响第139-140页
     ·IH-901诱导脐静脉内皮细胞ECV304凋亡形态学观察第140-142页
     ·IH-901对脐静脉内皮细胞ECV304细胞周期相分布的影响第142-143页
     ·IH-901对肝癌细胞MHCC97-H和内皮细胞ECV304黏附能力的影响第143-144页
     ·IH-901对肝癌细胞MHCC97-H和内皮细胞ECV304迁移能力的影响第144-145页
     ·IH-901对肝癌细胞MHCC97-H侵袭能力的影响第145-146页
     ·IH-901对VEGF和bFGF在肝癌细胞MHCC97-H中表达影响第146-148页
     ·IH-901对MMP-2和MMP-9在肝癌细胞MHCC97-H中表达的影响第148-149页
     ·IH-901对肝癌细胞MHCC97-H裸鼠体内致瘤能力的影响第149-150页
     ·IH-901对肝癌细胞MHCC97-H裸鼠体内转移能力的影响第150-152页
     ·IH-901对CD34在裸鼠荷肝癌组织中表达的影响第152-153页
     ·IH-901对MMP-9在裸鼠荷肝癌组织中表达的影响第153-154页
     ·IH-901对VEGF在裸鼠荷肝癌组织中表达的影响第154-155页
   ·讨论第155-158页
   ·小结第158-160页
结论第160-161页
参考文献第161-182页
致谢第182-183页
博士研究生期间发表的学术论文第183页

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