| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 概述 | 第12页 |
| 2. 鸭肝炎病毒病原学特点 | 第12-17页 |
| ·DHV-I的病原学特点 | 第13-14页 |
| ·DHV-II的病原学特点 | 第14-15页 |
| ·DHV-III的病原学特点 | 第15页 |
| ·新型鸭病毒性肝炎病毒的病原学特点 | 第15页 |
| ·鸭病毒性肝炎的分子生物学特征 | 第15-17页 |
| 3 鸭病毒性肝炎流行病学 | 第17-18页 |
| 4 临床症状及诊断方法研究进展 | 第18-25页 |
| ·经典方法为中和试验 | 第19页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第19-20页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第20-23页 |
| ·间接ELISA | 第20-21页 |
| ·Dot-ELISA法 | 第21-23页 |
| ·双夹心ELISA | 第23页 |
| ·胶体金法 | 第23-24页 |
| ·血凝试验 | 第24页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第24-25页 |
| ·直接荧光抗体检测 | 第25页 |
| 5. 鸭肝炎病毒培养方面 | 第25-27页 |
| ·细胞培养 | 第25-27页 |
| ·胚胎培养 | 第27页 |
| 6. DHV的防治 | 第27-30页 |
| 第二章 鸭病毒性肝炎病毒的分离及鉴定 | 第30-40页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-34页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·试验相关溶液的配置 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31页 |
| ·病料来源 | 第31页 |
| ·病料处理 | 第31页 |
| ·鸭胚接种与传代 | 第31页 |
| ·病毒的鉴定 | 第31-33页 |
| ·鸭抗DHV阳性血清的制备 | 第31-32页 |
| ·鸡胚半数致死量的测定(ELD50) | 第32页 |
| ·鸡胚中和试验(固定病毒稀释血清法) | 第32页 |
| ·动物回归试验 | 第32页 |
| ·雏鸭保护试验 | 第32-33页 |
| ·病毒的电镜观察 | 第33页 |
| ·病毒理化性质 | 第33-34页 |
| ·温度对病毒存活的影响 | 第33页 |
| ·不同浓度氯仿对病毒存活的影响 | 第33页 |
| ·病毒对红细胞的凝集试验 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·细菌分离结果 | 第34页 |
| ·病毒分离结果 | 第34页 |
| ·病毒的理化特性 | 第34页 |
| ·病毒的鉴定 | 第34-37页 |
| ·ELD_(50)测定结果 | 第34-35页 |
| ·中和试验结果 | 第35-36页 |
| ·动物回归试验 | 第36页 |
| ·雏鸭保护试验 | 第36页 |
| ·病毒的电镜观察 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| ·关于病毒分离 | 第37页 |
| ·关于中和试验 | 第37-38页 |
| ·病毒的鉴定 | 第38页 |
| 5 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 鸭抗DHV、兔抗DHV和山羊抗兔IgG高免血清的制备及山羊抗兔IgG的HRP标记 | 第40-54页 |
| 1 研究的目的和意义 | 第40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·鸭病毒性肝炎病毒(DHV-F60) | 第40页 |
| ·兔血清 | 第40页 |
| ·鸡胚及实验动物 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-48页 |
| ·鸭肝炎病毒的增殖与纯化(浓缩) | 第42页 |
| ·健康兔血清IgG的粗提及纯化 | 第42-43页 |
| ·粗提兔血清IgG的纯化 | 第43-44页 |
| ·免疫原的乳化 | 第44页 |
| ·DHV免疫原的乳化 | 第44页 |
| ·兔IgG的乳化 | 第44页 |
| ·鸭的免疫 | 第44-45页 |
| ·家兔的免疫 | 第45页 |
| ·山羊的免疫 | 第45页 |
| ·鸭抗DHVIgG、兔抗DHV IgG和山羊抗兔IgG的粗提与纯化 | 第45页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP的标记 | 第45-46页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP标记物的纯化 | 第46-47页 |
| ·G-200纯化山羊抗兔IgG-HRP标记物 | 第46页 |
| ·ELISA纯化山羊抗兔IgG-HRP标记物 | 第46-47页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP标记物的质量鉴定 | 第47页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP标记物的克分子比值测定 | 第47页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP效价的测定 | 第47页 |
| ·与同类产品的比较 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-50页 |
| ·鸭病毒性肝炎病毒的增殖与纯化(浓缩) | 第48页 |
| ·兔、鸭抗DHV高免血清及山羊抗兔抗体的制备 | 第48-49页 |
| ·鸭抗DHV高免血清的制备 | 第48页 |
| ·兔抗DHV高免血清的制备 | 第48页 |
| ·山羊抗兔IgG高免血清的制备 | 第48-49页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP结合物的纯化 | 第49页 |
| ·G-200纯化山羊抗兔IgG-HRP标记物 | 第49页 |
| ·羊抗兔IgG-HRP的质量鉴定 | 第49-50页 |
| ·HRP/IgG mol数比值 | 第49页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP效价测定 | 第49-50页 |
| ·与同类产品的比较 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·抗原 | 第50-51页 |
| ·关于免疫程序 | 第51-52页 |
| ·关于羊抗兔IgG-HRP结合物的提纯 | 第52页 |
| ·山羊抗兔IgG-HRP结合物的质量鉴定 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 间接Elisa法检测鸭I型病毒性肝炎抗体的建立 | 第54-65页 |
| 1 研究目的和意义 | 第54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-57页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·病毒及微生物材料 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·ELISA试剂的配制 | 第54-55页 |
| ·主要实验器材 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·间接Elisa法测定抗体的基本实验步骤 | 第55-56页 |
| ·包被抗原和抗体(Ab)最佳工作浓度测定 | 第56页 |
| ·敏感性试验及临界点的确定(设三个重复) | 第56页 |
| ·特异性试验 | 第56-57页 |
| ·特异性交叉试验 | 第56-57页 |
| ·特异性阻断试验 | 第57页 |
| ·批内重复试验 | 第57页 |
| ·批间重复试验 | 第57页 |
| ·临床中间接ELISA法检测血清抗体的应用 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-63页 |
| ·包被抗原和抗体(Ab)最佳工作浓度测定 | 第57-58页 |
| ·敏感性试验 | 第58页 |
| ·健康鸭群的检测 | 第58-59页 |
| ·特异性交叉试验 | 第59页 |
| ·特异性阻断试验 | 第59页 |
| ·批内重复试验 | 第59-60页 |
| ·批间重复试验 | 第60页 |
| ·符合率试验 | 第60-61页 |
| ·临床中间接ELISA法检测血清抗体的应用 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| ·间接ELISA法检测抗体 | 第63-64页 |
| ·间接ELISA的初步应用 | 第64页 |
| 5 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 鸭病毒性肝炎病毒ELISA检测方法的建立 | 第65-75页 |
| 1 研究目的和意义 | 第65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-68页 |
| ·实验材料 | 第65-67页 |
| ·病毒及微生物材料 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65-66页 |
| ·ELISA试剂的配制 | 第66页 |
| ·主要实验器材 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-68页 |
| 2;2.1 夹心ELISA测定的基本实验步骤 | 第67页 |
| ·包被抗体(Ab_1)和第二抗体(Ab_2)最佳工作浓度测定 | 第67-68页 |
| ·敏感性试验及临界点的确定 | 第68页 |
| ·特异性试验 | 第68页 |
| ·特异性交叉试验 | 第68页 |
| ·特异性阻断试验 | 第68页 |
| ·夹心ELISA方法在临床中的应用 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·ELISA最佳包被抗体(Ab_1)和兔抗DHV抗体(Ab_2)最佳工作浓度测定结果 | 第68-69页 |
| ·敏感性试验及临界点的确定 | 第69-70页 |
| ·敏感性试验 | 第69-70页 |
| ·判定标准的确定 | 第70页 |
| ·其它禽类病毒交叉性试验 | 第70-71页 |
| ·特异性阻断试验 | 第71页 |
| ·重复性试验结果 | 第71页 |
| ·在临床中的应用夹心ELISA检测结果 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-74页 |
| ·夹心ELISA最佳工作浓度的选择 | 第73页 |
| ·夹心ELISA的初步应用 | 第73-74页 |
| 5 小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
