| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 1 前言 | 第7-33页 |
| ·卤虫生物学特征和相关基因的研究 | 第8-20页 |
| ·卤虫形态和生物学特性 | 第8-10页 |
| ·卤虫的经济价值 | 第10页 |
| ·与胚胎发育相关的基因 | 第10-15页 |
| ·Hox基因家族概述 | 第11-13页 |
| ·SOX 基因家族 | 第13-15页 |
| ·DMRT 基因家族 | 第15页 |
| ·卤虫生物学的研究 | 第15-17页 |
| ·卤虫分子生物学研究 | 第17-20页 |
| ·V-ATPase分子结构,功能 | 第20-27页 |
| ·V-ATPase 的分子结构、功能及其调节 | 第21-24页 |
| ·ATPase 在肿瘤细胞生长及转移中的作用 | 第24-27页 |
| ·V-ATPase 对肿瘤细胞生长的影响 | 第24-25页 |
| ·V-ATPase 与肿瘤细胞侵袭性的关系 | 第25-26页 |
| ·V-ATPase 与肿瘤细胞多重耐药性的关系 | 第26-27页 |
| ·V-ATPase 与肿瘤新生血管形成的关系及对宿主免疫功能的影响 | 第27页 |
| ·实时定量 PCR 技术及应用 | 第27-33页 |
| ·RT - PCR的原理 | 第27-29页 |
| ·RT - PCR检测系统 | 第29-31页 |
| ·标准曲线的制作 | 第31页 |
| ·RT- PCR技术在分子生物学中的应用 | 第31-33页 |
| ·RT - PCR技术展望 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-41页 |
| ·材料 | 第33-37页 |
| ·卤虫孵化及培养条件 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·总 RNA 模板的纯化 | 第38页 |
| ·RNA 分子量和浓度的测定 | 第38页 |
| ·反转录 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增，克隆及其测序 | 第39-40页 |
| ·Real Time PCR 法检测各目的基因相对表达量 | 第40-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-64页 |
| ·总 RNA 的电泳结果 | 第41-42页 |
| ·V-ATPase 基因测序结果 | 第42-43页 |
| ·V-ATPase 基因核酸序列及其推断的氨基酸序列 | 第43-44页 |
| ·利用 V-ATPase 基因的保守区域和氨基酸建立系统发生树 | 第44-51页 |
| ·Real –Time PCR 检测结果 | 第51-64页 |
| ·标准曲线和线性关系 | 第52页 |
| ·扩增曲线和融解曲线分析 | 第52页 |
| ·孤雌和两性生殖卤虫actin 基因和 V-ATPase 基因扩增曲线和融解曲线 | 第52-53页 |
| ·V-ATPase 各样品相对表达量 | 第53-64页 |
| 4 讨论 | 第64-73页 |
| ·中国孤雌生殖卤虫 V-ATPase 基因的序列及进化分析 | 第64页 |
| ·V-ATPase 基因mRNA 在卤虫胚胎发育不同时期表达分析 | 第64-66页 |
| ·实验条件的优化 | 第66-71页 |
| ·总 RNA 的质量的优化 | 第66-67页 |
| ·反转录及其引物设计原则 | 第67-68页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光嵌合法的 Real Time PCR 反应条件优化 | 第68-71页 |
| ·引物设计 | 第68页 |
| ·Real Time PCR 相关试剂选择 | 第68-69页 |
| ·Real Time PCR基本参数的优化 | 第69-70页 |
| ·PCR 条件优化顺序 | 第70-71页 |
| ·V-ATPase 研究展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
| 论文发表情况 | 第83-84页 |
