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苦瓜籽中生物活性物质的分离纯化及表征

第一章 引言第1-23页
   ·苦瓜概述第7-10页
     ·苦瓜的组成成分第7-9页
       ·苦瓜的营养成分第7-8页
       ·苦瓜的化学成分第8-9页
     ·苦瓜生物活性的研究进展第9-10页
       ·降血糖作用第9页
       ·抗肿瘤作用第9页
       ·抗菌作用第9-10页
       ·抗病毒作用第10页
       ·抗生育作用第10页
   ·生物活性多肽的研究进展第10-16页
     ·活性多肽的来源第10-11页
       ·从人体中分离得到多肽第10-11页
       ·从动物体内分离得到多肽第11页
       ·从植物体内分离得到多肽第11页
     ·生物活性多肽的分离方法第11-13页
       ·离子交换色谱法第12页
       ·凝胶过滤色谱法第12-13页
       ·反相高效液相色谱法第13页
     ·生物活性多肽的分类第13-16页
       ·生理活性肽第13-15页
       ·其他生物活性肽第15-16页
   ·抗真菌肽的研究进展第16-18页
     ·抗真菌肽的来源第16页
     ·抗真菌肽的作用机理第16-18页
       ·抗真菌肽对真菌细胞壁的作用第16页
       ·抗真菌肽对真菌细胞膜的作用第16-17页
       ·抗真菌肽对真菌内细胞器的作用第17-18页
   ·抗真菌蛋白的研究进展第18-22页
     ·抗真菌蛋白的种类第19-21页
       ·病程相关蛋白第19页
       ·防卫素第19页
       ·硫堇第19-20页
       ·核糖体失活蛋白第20页
       ·几丁质连接蛋白第20页
       ·脂转移蛋白第20-21页
       ·类甜味蛋白第21页
       ·蛋白酶抑制剂第21页
     ·抗真菌蛋白的研究展望第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-35页
   ·仪器设备与材料第23-26页
     ·仪器设备第23-24页
     ·主要材料及试剂第24-26页
       ·苦瓜籽第24页
       ·菌种第24页
       ·细胞株第24页
       ·培养基第24-25页
       ·其他生化试剂及材料第25-26页
   ·实验方法第26-34页
     ·苦瓜籽粗提液的制备第26页
     ·苦瓜籽中活性组分的分离纯化方法第26-27页
       ·离子交换色谱法第26-27页
       ·凝胶过滤色谱法第27页
       ·反相高效液相色谱法第27页
     ·苦瓜籽中活性组分的成分分析方法第27-31页
       ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第27-29页
       ·Tricine-SDS-PAGE 电泳第29-30页
       ·毛细管液相色谱法(cLC)第30页
       ·基质辅助激光解吸附/离子化飞行时间质谱分析第30-31页
       ·蛋白质含量测定—Folin-酚法第31页
     ·苦瓜籽中活性组分的活性鉴定方法第31-34页
       ·体外抗真菌活性的鉴定第31-32页
       ·体外抗细菌活性的鉴定第32页
       ·体外抗氧化活性的鉴定第32页
       ·体外细胞抑制活性的鉴定第32-34页
   ·本课题的实验流程第34-35页
第三章 结果与讨论第35-57页
   ·苦瓜籽小分子蛋白MAP13 的分离纯化第35-37页
     ·DEAE-650C弱阴离子交换柱初步分离第35页
     ·阳离子交换色谱柱纯化MAP13第35-37页
   ·MAP13 的表征第37-44页
     ·纯度鉴定和分子量标定第37-38页
     ·MAP13 的体外抑菌活性第38-43页
       ·MAP13 对细菌的作用第38页
       ·MAP13 对植物致病真菌的抑制作用第38-42页
       ·MAP13 抑菌机理初步分析第42-43页
     ·MAP13 的体外抗氧化活性第43-44页
   ·苦瓜籽中活性组分P2 的分离纯化第44-46页
     ·Sephadex G-75 凝胶色谱柱初步纯化第44-45页
     ·确定多肽组分的最适检测波长第45页
     ·LUNA C18 反相液相色谱的分离第45-46页
   ·苦瓜籽活性组分P2的表征第46-57页
     ·纯度鉴定和分子量标定第46-49页
       ·cLC 毛细管液相色谱分析第46-47页
       ·质谱鉴定第47-49页
     ·P2 的体外抗真菌活性第49-51页
     ·P2 对真菌菌丝形态的影响第51-52页
     ·P2 的体外细胞抑制活性第52-57页
       ·对人肝癌细胞株HepG2 的抑制作用第52-54页
       ·对狗肾上皮细胞MDCK的抑制作用第54-56页
       ·P2 对HepG2 和MDCK 细胞抑制活性的比较第56-57页
总结与展望第57-59页
 总结第57-58页
 展望第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66-67页
个人简历第67页

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