| 英文缩写 | 第1-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-34页 |
| 1 基因治疗研究进展 | 第11-19页 |
| ·基因治疗的基本概念 | 第11页 |
| ·基因治疗发展现状 | 第11-12页 |
| ·基因治疗的途径 | 第12-13页 |
| ·基因治疗的基因导入系统 | 第13-18页 |
| ·基因治疗面临的问题和挑战 | 第18-19页 |
| ·基因治疗应用前景 | 第19页 |
| 2 肿瘤基因治疗 | 第19-20页 |
| ·肿瘤基因治疗的策略 | 第19-20页 |
| ·肿瘤基因疗法存在的问题及展望 | 第20页 |
| 3 肿瘤基因-放射治疗 | 第20-25页 |
| ·肿瘤基因-放射治疗的理论 | 第21页 |
| ·Egr-1 基因的结构及其辐射诱导特性 | 第21-25页 |
| 4 TRAIL 及抗肿瘤的实验研究 | 第25-32页 |
| ·TRAIL 及其受体 | 第25-27页 |
| ·TRAIL 选择性诱导凋亡的机制 | 第27-31页 |
| ·TRAIL 在肿瘤研究中的应用 | 第31-32页 |
| 5 立题依据 | 第32-34页 |
| 第二章 pEgr-shTRAIL 辐射诱导表达特性及其体外抑瘤作用的实验研究 | 第34-70页 |
| 一、材料与方法 | 第34-45页 |
| 1 材料 | 第34-36页 |
| ·试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·质粒与菌种 | 第35页 |
| ·细胞株 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-45页 |
| ·人可溶性 TRAIL 基因的扩增及序列测定 | 第36页 |
| ·表达质粒pEgr-shTRAIL 的构建 | 第36-39页 |
| ·质粒转染 | 第39-40页 |
| ·ELISA 检测目的基因的表达 | 第40页 |
| ·G418 筛选 | 第40页 |
| ·透射电镜下细胞超微结构的观察 | 第40-41页 |
| ·细胞生长速率测定 | 第41页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第41页 |
| ·RT-PCR | 第41-42页 |
| ·蛋白质的提取 | 第42页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第42页 |
| ·免疫印迹法(Western blot) | 第42-44页 |
| ·免疫组织化学方法 | 第44页 |
| ·统计学方法 | 第44-45页 |
| 二、实验结果 | 第45-62页 |
| 1. pEgr-shTRAIL 重组质粒的构建及其辐射诱导表达特性 | 第45-54页 |
| ·人可溶性 TRAIL 基因的扩增及序列测定 | 第45-49页 |
| ·重组表达质粒pEgr-shTRAIL 的构建与鉴定 | 第49-52页 |
| ·重组质粒pEgr-shTRAIL 的辐射诱导表达 | 第52-54页 |
| 2. pEgr-shTRAIL 重组质粒对肺腺癌细胞A549 体外抗肿瘤作用 | 第54-59页 |
| ·稳定转染细胞株的筛选 | 第54页 |
| ·稳定转染细胞株 A549-wshTRAIL 细胞超微结构的变化 | 第54-56页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 线照射对肿瘤细胞A549 生长的影响 | 第56-57页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 线照射对肿瘤细胞A549 凋亡的影响 | 第57-59页 |
| 3. pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 射线照射抗肿瘤作用机制 | 第59-62页 |
| ·不同剂量X 射线照射后肺腺癌细胞A549 中的TRAIL 死亡受体的表达 | 第59-60页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 线照射对肿瘤细胞caspase-3 的表达 | 第60-61页 |
| ·稳定转染细胞株的膜结合型TRAIL 表达 | 第61-62页 |
| 三、讨论 | 第62-69页 |
| 1. pEgr-shTRAIL 重组质粒的构建及其辐射诱导表达特性 | 第62-64页 |
| ·人可溶性 TRAIL 基因的扩增及序列测定 | 第62-63页 |
| ·重组表达质粒pEgr-shTRAIL 的构建与鉴定 | 第63页 |
| ·不同剂量 X 射线照射后 TRAIL 的表达 | 第63-64页 |
| 2. pEgr-shTRAIL 重组质粒对肺腺癌细胞A549 体外抗肿瘤作用 | 第64-66页 |
| ·稳定转染细胞株的筛选 | 第64页 |
| ·稳定转染细胞株 A549-wshTRAIL 细胞超微结构的变化 | 第64-65页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合 X 线照射对肿瘤细胞 A549 生长的影响 | 第65-66页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合 X 线照射对肿瘤细胞 A549 凋亡 的影响 | 第66页 |
| 3. pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 射线照射抗肿瘤作用机制 | 第66-69页 |
| ·不同剂量X 射线照射后肺腺癌细胞A549 中的TRAIL 死亡受体的表达 | 第66页 |
| ·pEgr-shTRAIL 重组质粒体外转染联合X 线照射对肿瘤细胞caspase-3 表达的影响 | 第66-68页 |
| ·稳定转染细胞株的膜结合型TRAIL 表达 | 第68-69页 |
| 四、结论 | 第69-70页 |
| 第三章 重组腺病毒介导的hTRAIL 基因联合X 线照射对肺癌的体外抑瘤作用的实验研究 | 第70-95页 |
| 一、材料与方法 | 第70-75页 |
| 1. 材料 | 第70-71页 |
| ·器材及试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| ·细胞株 | 第71页 |
| ·其它 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-75页 |
| ·重组腺病毒的制备 | 第71-72页 |
| ·病毒转染 | 第72页 |
| ·确定适宜的感染倍数 | 第72-73页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因的表达 | 第73页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因联合X 射线照射对肺腺癌细胞A549 体外抗肿瘤作用 | 第73-74页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因联合X 射线照射抗肿瘤作用机制 | 第74-75页 |
| ·统计学方法 | 第75页 |
| 二、实验结果 | 第75-89页 |
| 1 重组腺病毒的的制备和鉴定 | 第75-77页 |
| 2 重组腺病毒对肺腺癌细胞A549 的转染效率的研究 | 第77-80页 |
| ·不同感染滴度的腺病毒Ad-CMV-EGFP 感染肿瘤细胞48 小时转染效率研究 | 第77-79页 |
| ·腺病毒 Ad-CMV-EGFP 感染肿瘤细胞转染效率时程变化 | 第79-80页 |
| 3 重组腺病毒介导的hTRAIL 基因的表达 | 第80-81页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因在293T 细胞中的表达 | 第80-81页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 在肺腺癌细胞 A549 中的表达 | 第81页 |
| 4 重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射对肺腺癌细胞A549 体外抗肿瘤作用 | 第81-87页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因对肺腺癌细胞A549 超微结构的影响 | 第81-83页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射对肺腺癌细胞A549 生长的影响 | 第83-84页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射对肺腺癌细胞A549 凋亡的影响 | 第84-87页 |
| 5 重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射抗肿瘤作用机制 | 第87-89页 |
| ·X 射线照射对肺腺癌细胞A549 中的TRAIL 死亡受体表达的影响 | 第87-88页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射对肿瘤细胞caspase-3 的表达的影响 | 第88-89页 |
| 三、讨论 | 第89-94页 |
| 1 重组腺病毒的制备和鉴定 | 第89-90页 |
| 2 重组腺病毒对肺腺癌细胞 A549 的转染效率的研究 | 第90页 |
| 3 重组腺病毒介导的hTRAIL 基因的表达 | 第90-91页 |
| ·重组腺病毒在293T细胞中的表达 | 第90页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因在肺腺癌细胞A549 中的表达 | 第90-91页 |
| 4 重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 线照射对肺腺癌细胞A549 体外抗肿瘤作用 | 第91-92页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 基因对肺腺癌细胞 A549 超微结构的影响 | 第91页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 线照射对肺腺癌细胞A549 生长的影响 | 第91页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 线照射对肺腺癌细胞A549 凋亡的影响 | 第91-92页 |
| 5 重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射抗肿瘤作用机制 | 第92-94页 |
| ·X 射线照射对肺腺癌细胞A549 中的TRAIL 死亡受体表达的影响 | 第92页 |
| ·重组腺病毒介导的hTRAIL 联合X 射线照射对肿瘤细胞caspase-3 表达的影响 | 第92-94页 |
| 四、结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-106页 |
| 作者简介 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 中文摘要 | 第108-114页 |
| Abstract | 第114-122页 |
