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微囊藻伪空胞基因丛的研究

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第16-29页
 1 蓝藻水华与浮力第16-17页
 2 气囊的特征第17-22页
   ·伪空胞和气囊第17-19页
   ·气囊的分离纯化第19-20页
   ·气囊的形态和特征第20-21页
   ·气囊的化学组成第21-22页
 3 气囊的分子生物学研究第22-27页
   ·GvpA蛋白及其基因第22-23页
   ·GvpC蛋白及其基因第23-25页
   ·伪空胞基因丛第25-27页
 4 本研究的目的和总体设计第27-29页
第二章 微囊藻FACH8854的伪空胞基因丛第29-42页
 1 材料和方法第29-33页
   ·藻株和培养条件第29页
   ·微囊藻FACH8854总DNA的提取第29-30页
   ·微囊藻FACH8854基因组文库的构建和目的克隆的筛选第30页
   ·PCR和反向PCR第30-32页
   ·Southern blot杂交第32-33页
     ·探针的标记第32页
     ·转膜和杂交第32-33页
 2 结果第33-39页
   ·构建微囊藻FACHB854的基因组文库第33-35页
   ·文库中筛选到含有gvp基因的克隆第35-36页
   ·微囊藻FACHB854中伪空胞基因丛全长的获得第36-37页
   ·Southern blot证明基因组中只有这一个伪空胞基因丛第37-39页
 3 讨论第39-42页
第三章 微囊藻伪空胞基因丛的结构类型、系统演化和表达差异第42-64页
 1 材料和方法第42-48页
   ·蓝藻藻株和培养条件第42页
   ·微囊藻总DNA的提取第42-43页
   ·PCR反应及引物第43-44页
   ·进化树的构建第44页
   ·表达质粒的构建第44页
   ·原核表达和蛋白纯化第44-45页
   ·微囊藻气囊的分离和纯化第45-46页
   ·抗血清的制备第46页
   ·蓝藻总蛋白的提取和定量第46-47页
   ·SDS-PAGE第47页
   ·Western blot第47页
   ·负染色电镜观察第47-48页
 2 结果第48-60页
   ·伪空胞基因丛存在着四种基本结构类型第48-51页
   ·演化关系分析第51-55页
   ·基因丛类型与伪空胞蛋白表达水平第55-59页
   ·基因丛类型与气囊形态的关系第59-60页
 3 讨论第60-64页
第四章 gvp基因表达调控的初步研究第64-76页
 1 材料和方法第64-68页
   ·藻株和培养条件第64-65页
   ·代时和生长速率第65页
   ·叶绿素a含量测定第65页
   ·总RNA的提取第65-66页
   ·模板梯度稀释RT-PCR第66-67页
   ·实时定量RT-PCR第67-68页
     ·标准品质粒DNA的制备第67页
     ·实时定量PCR反应第67页
     ·标准曲线的制作第67页
     ·测定不同培养条件下基因转录水平的差别第67-68页
 2 结果第68-74页
   ·环境因子与漂浮性第68-70页
   ·pH对gvpA和gvpC基因转录的影响第70-74页
     ·总RNA的检测第70-71页
     ·模板梯度稀释RT-PCR第71-72页
     ·实时定量RT-PCR第72-74页
 3 讨论第74-76页
第五章 微囊藻FACH8854中微型插入因子的研究第76-86页
 1 材料和方法第77-78页
   ·蓝藻藻株和培养条件第77页
   ·PCR、反向PCR第77页
   ·基因组文库的构建和目的克隆的筛选第77页
   ·Southern blot杂交第77-78页
   ·NCBI GenBank录入编号第78页
 2 结果第78-84页
   ·微型插入因子的发现和序列分析第78-80页
   ·ISM854-1及其同源序列在其他微囊藻株中的分布第80-81页
   ·ISM854-1的靶位点特征第81-82页
   ·ISM854-1的变异体第82-84页
 3 讨论第84-86页
参考文献第86-97页
本研究的创新点第97页
攻读博士学位期间发表论文情况第97-98页
附件1第98-101页
附件2第101-103页
致谢第103页

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