| 第一章 绪论 | 第1-18页 |
| ·引言 | 第8页 |
| ·壳寡糖的性质、功能及用途 | 第8-12页 |
| ·壳寡糖的抗肿瘤及免疫调节作用 | 第8-10页 |
| ·壳寡糖的抗感染作用 | 第10页 |
| ·壳寡糖在食品方面的应用 | 第10-11页 |
| ·壳寡糖在农业方面的应用 | 第11-12页 |
| ·壳寡糖在化妆品方面的应用 | 第12页 |
| ·壳寡糖的制备 | 第12-14页 |
| ·化学降解法制取壳寡糖 | 第12页 |
| ·物理降解法制取壳寡糖 | 第12-13页 |
| ·酶法降解法制取壳寡糖 | 第13-14页 |
| ·壳聚糖酶 | 第13页 |
| ·溶菌酶 | 第13页 |
| ·脂肪酶 | 第13-14页 |
| ·其他非专一性酶 | 第14页 |
| ·壳聚糖酶 | 第14-17页 |
| ·壳聚糖酶的发现 | 第14-15页 |
| ·壳聚糖酶的来源 | 第15页 |
| ·壳聚糖酶的分离纯化 | 第15页 |
| ·壳聚糖酶的理化性质 | 第15-16页 |
| ·壳聚糖酶的催化降解性质 | 第16页 |
| ·壳聚糖酶降解壳聚糖不同取代产物的活性比较 | 第16页 |
| ·壳聚糖酶降解部分乙酰化壳聚糖的特异性 | 第16页 |
| ·壳聚糖酶降解产物的分析 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 产壳聚糖酶菌株的筛选和鉴定 | 第18-28页 |
| ·前言 | 第18页 |
| ·材料与方法 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·分析试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·土样 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·分析方法 | 第20-22页 |
| ·氨基葡萄糖标准曲线的绘制 | 第20-21页 |
| ·酶活力测定方法 | 第21-22页 |
| ·酶解产物分析方法 | 第22页 |
| ·菌种的筛选 | 第22-23页 |
| ·分离平板筛选 | 第22页 |
| ·产酶平板筛选 | 第22页 |
| ·摇瓶培养条件 | 第22-23页 |
| ·菌种的鉴定 | 第23页 |
| ·菌种的培养特征 | 第23页 |
| ·菌种的显微形态分析 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-28页 |
| ·壳聚糖酶产生菌的筛选 | 第23-24页 |
| ·菌种的鉴定 | 第24-27页 |
| ·菌种鉴定结果 | 第27-28页 |
| 第三章 菌种的诱变选育和发酵条件的优化 | 第28-37页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料和方法 | 第28-30页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·诱变选育的方法 | 第29-30页 |
| ·壳聚糖酶活力的测定 | 第30页 |
| ·发酵条件的优化 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30页 |
| ·菌种的诱变选育 | 第30页 |
| ·紫外线诱变 | 第30页 |
| ·亚硝酸诱变 | 第30页 |
| ·菌株产酶的稳定性 | 第30页 |
| ·发酵条件的优化 | 第30-37页 |
| ·摇瓶装量对产酶的影响 | 第31页 |
| ·发酵起始pH对产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·壳聚糖浓度对产酶的影响 | 第32页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·温度对产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第34页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·产酶条件的优化——正交试验 | 第35-37页 |
| 第四章 内切壳聚糖酶的分离纯化和酶学特性研究 | 第37-47页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·粗酶液 | 第37页 |
| ·仪器和药品 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·主要药品 | 第37-38页 |
| ·分析方法 | 第38-39页 |
| ·蛋白质浓度的测定方法 | 第38-39页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定酶的纯度及分子量 | 第39页 |
| ·壳聚糖酶的分离纯化 | 第39-41页 |
| ·乙醇分级沉淀 | 第39-40页 |
| ·透析 | 第40页 |
| ·SP-Sepharose FF离子交换层析分离 | 第40页 |
| ·酶蛋白纯度的分析 | 第40-41页 |
| ·壳聚糖酶的基本性质研究 | 第41-47页 |
| ·壳聚糖酶作用模式的分析 | 第41-42页 |
| ·内切壳聚糖酶最适pH测定 | 第42-43页 |
| ·不同pH的1%壳聚糖溶液的配制 | 第42-43页 |
| ·内切壳聚糖酶活力的测定 | 第43页 |
| ·内切壳聚糖酶最适温度测定 | 第43-44页 |
| ·内切壳聚糖酶的热稳定性 | 第44页 |
| ·内切壳聚糖酶的酸碱稳定性 | 第44-45页 |
| ·金属离子对内切壳聚糖酶酶活的影响 | 第45页 |
| ·内切壳聚糖酶的动力学常数(Km和Vmax)的测定 | 第45-46页 |
| ·内切壳聚糖酶的N-端氨基酸序列测定 | 第46-47页 |
| 第五章 壳寡糖的酶法制备与分离纯化 | 第47-54页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-48页 |
| ·主要实验仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·离子交换树脂的预处理 | 第48页 |
| ·活性炭的预处理 | 第48页 |
| ·分析方法 | 第48页 |
| ·酶解产物的薄层层析(TLC)分析 | 第48页 |
| ·壳寡糖的得率 | 第48页 |
| ·壳寡糖的酶法制备与分离纯化 | 第48-49页 |
| ·壳聚糖溶液的制备 | 第48页 |
| ·壳聚糖溶液的酶解 | 第48页 |
| ·阳离子交换树脂(或活性炭)纯化 | 第48页 |
| ·JK204阴离子交换树脂脱色 | 第48-49页 |
| ·壳寡糖的沉淀和干燥 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-54页 |
| ·壳聚糖的溶解方法对酶解的影响 | 第49页 |
| ·壳聚糖的浓度对酶解的影响 | 第49-50页 |
| ·内切壳聚糖酶用量对酶解的影响 | 第50-51页 |
| ·反应时间对酶解的影响 | 第51页 |
| ·壳寡糖的得率 | 第51页 |
| ·离子交换树脂层析结果 | 第51-53页 |
| ·732强酸性树脂 | 第51-52页 |
| ·HZ-001层析专用强酸性树脂 | 第52页 |
| ·大孔弱酸性阳离子树脂D155 | 第52-53页 |
| ·活性碳-硅藻土层析结果 | 第53-54页 |
| ·60%乙醇溶液洗脱 | 第53页 |
| ·0～60%乙醇溶液梯度洗脱 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |