| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 第一章 抗原蛋白RLD2的表达和纯化 | 第16-30页 |
| 1.材料与方法 | 第16-25页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·主要培养基和溶液的配制 | 第16-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·设计合成引物 | 第19页 |
| ·PCR扩增目的条带 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的构建 | 第20-23页 |
| ·RLD2蛋白的表达 | 第23-24页 |
| ·蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| ·Folin酚法测定蛋白含量 | 第25页 |
| 2.结果与讨论 | 第25-30页 |
| ·RLD2 PCR的结果 | 第25-26页 |
| ·RLD2蛋白的诱导表达、纯化 | 第26-28页 |
| ·小结 | 第28-30页 |
| 第二章 噬菌体抗体库的筛选及初步鉴定 | 第30-39页 |
| 1.材料与方法 | 第30-33页 |
| ·菌株、蛋白和抗体库 | 第30页 |
| ·酶和主要生化试剂 | 第30页 |
| ·主要培养基和溶液的配制 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·靶抗原蛋白的处理 | 第31-32页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第32-33页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第33页 |
| 2.结果与讨论 | 第33-39页 |
| ·抗体库回收率 | 第33-34页 |
| ·抗体亲和力的鉴定 | 第34-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 活性测定 | 第39-46页 |
| 1.材料与方法 | 第39-42页 |
| ·细胞株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要细胞培养基及溶液配制 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·细胞测活 | 第40-42页 |
| 2.结果与讨论 | 第42-46页 |
| ·样品对SKBR-3、MCF-7和ECV 304细胞的抑制作用 | 第42-43页 |
| ·样品对Balb／c-3T3细胞的抑制作用 | 第43页 |
| ·样品不同作用时间的抑制效果 | 第43-44页 |
| ·抗体抑制效果的量效关系 | 第44页 |
| ·RLD2蛋白对抗体抑制效果的阻断作用 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 抗体在大肠杆菌中的表达 | 第46-55页 |
| 1.材料与方法 | 第46-51页 |
| ·菌株、质粒、酶和主要生化试剂 | 第46页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·抗体Fab段的表达 | 第47-51页 |
| 2.结果与讨论 | 第51-55页 |
| ·载体酶切结果 | 第51-52页 |
| ·抗体Fab段的诱导表达 | 第52-53页 |
| ·发酵结果 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 实验总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60页 |