一、缩写词表(ABBREVIATIONS) | 第1-7页 |
二、中文摘要 | 第7-9页 |
三、Abstract | 第9-12页 |
四、正文 | 第12-48页 |
(一)、引言 | 第12-13页 |
(二)、材料和方法 | 第13-20页 |
1.材料 | 第13页 |
2.试剂来源 | 第13-14页 |
3.仪器 | 第14页 |
4.实验方法 | 第14-20页 |
·大鼠大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型 | 第14-15页 |
·缺血脑内ERCC1表达的时程变化研究 | 第15页 |
·侧脑室内注射质粒 | 第15-16页 |
·ERCC1 antisense质粒 | 第15-16页 |
·ERCC1蛋白表达质粒 | 第16页 |
·免疫印迹(Western blot)实验 | 第16-17页 |
·蛋白提取 | 第16页 |
·Western blot | 第16-17页 |
·脑组织切片和组织化学染色 | 第17-20页 |
·冰冻组织切片的制备 | 第17页 |
·Fluoro-Jade B染色 | 第17页 |
·焦油紫(CV)染色 | 第17-18页 |
·ERCC1免疫组织化学染色 | 第18页 |
·EGFP免疫组织化学染色 | 第18页 |
·ERCC1与MAP-2免疫组织化学双标记染色 | 第18-19页 |
·ERCC1与GFAP免疫组织化学双标记染色 | 第19页 |
·DNA聚合酶Ⅰ介导的脱氧尿嘧啶核苷酸缺口平移标记(DNA polymerase Ⅰ-mediated digoxigenin-dUTP nick-translation,PUNT)染色 | 第19-20页 |
·数据统计与分析 | 第20页 |
·Western blot半定量 | 第20页 |
·细胞计数 | 第20页 |
(三)、实验结果 | 第20-24页 |
1.正常大鼠脑内ERCC1的蛋白表达分布 | 第20-21页 |
2.缺血大鼠脑内ERCC1蛋白的时间依赖性表达 | 第21-22页 |
·缺血大鼠脑内ERCC1蛋白表达的时程变化 | 第21页 |
·缺血大鼠脑内ERCC1蛋白表达的区域和细胞分布特征 | 第21-22页 |
3.侧脑室注射ERCC1 antisense抑制内源性ERCC1的表达 | 第22页 |
·ERCC1 antisense抑制ERCC1表达的剂量反应 | 第22页 |
·ERCC1 antisense抑制ERCC1表达的时程反应 | 第22页 |
4.侧脑室注射ERCC1 antisense加重缺血性脑损伤 | 第22-23页 |
·ERCC1 antisense减少脑内内源性ERCC1表达 | 第22-23页 |
·ERCC1 antisense增加缺血脑内DNA损伤 | 第23页 |
·ERCC1 antisense增加缺血性脑梗塞灶体积 | 第23页 |
5.ERCC1过表达对缺血损伤脑的保护作用 | 第23-24页 |
·质粒在脑内有效表达的鉴定 | 第23-24页 |
·ERCC1过表达减轻缺血性脑梗塞灶体积 | 第24页 |
(四)、讨论 | 第24-28页 |
1.ERCC1参与正常脑内的DNA修复 | 第25页 |
2.ERCC1参与缺血脑内的DNA修复 | 第25-26页 |
3.内源性ERCC1表达上调对急性缺血脑损伤具有保护作用 | 第26-27页 |
4.对ERCC1通过NER途径发挥作用机制的探讨 | 第27-28页 |
(五)、小结 | 第28-29页 |
(六)、图版说明 | 第29-42页 |
(七)、参考文献 | 第42-48页 |
五、文献综述 | 第48-72页 |
六、附录一 博士期间完成的另一部分工作(一) | 第72-79页 |
七、附录二 博士期间完成的另一部分工作(二) | 第79-82页 |
八、附录三 致谢 | 第82-83页 |
九、附录四 已发表和待发表的文章 | 第83-84页 |