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剪切修复偶联因子1(ERCC1)在大鼠脑缺血损伤病理过程中的作用研究

一、缩写词表(ABBREVIATIONS)第1-7页
二、中文摘要第7-9页
三、Abstract第9-12页
四、正文第12-48页
 (一)、引言第12-13页
 (二)、材料和方法第13-20页
  1.材料第13页
  2.试剂来源第13-14页
  3.仪器第14页
  4.实验方法第14-20页
   ·大鼠大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型第14-15页
   ·缺血脑内ERCC1表达的时程变化研究第15页
   ·侧脑室内注射质粒第15-16页
     ·ERCC1 antisense质粒第15-16页
     ·ERCC1蛋白表达质粒第16页
   ·免疫印迹(Western blot)实验第16-17页
     ·蛋白提取第16页
     ·Western blot第16-17页
   ·脑组织切片和组织化学染色第17-20页
     ·冰冻组织切片的制备第17页
     ·Fluoro-Jade B染色第17页
     ·焦油紫(CV)染色第17-18页
     ·ERCC1免疫组织化学染色第18页
     ·EGFP免疫组织化学染色第18页
     ·ERCC1与MAP-2免疫组织化学双标记染色第18-19页
     ·ERCC1与GFAP免疫组织化学双标记染色第19页
     ·DNA聚合酶Ⅰ介导的脱氧尿嘧啶核苷酸缺口平移标记(DNA polymerase Ⅰ-mediated digoxigenin-dUTP nick-translation,PUNT)染色第19-20页
   ·数据统计与分析第20页
     ·Western blot半定量第20页
     ·细胞计数第20页
 (三)、实验结果第20-24页
  1.正常大鼠脑内ERCC1的蛋白表达分布第20-21页
  2.缺血大鼠脑内ERCC1蛋白的时间依赖性表达第21-22页
   ·缺血大鼠脑内ERCC1蛋白表达的时程变化第21页
   ·缺血大鼠脑内ERCC1蛋白表达的区域和细胞分布特征第21-22页
  3.侧脑室注射ERCC1 antisense抑制内源性ERCC1的表达第22页
   ·ERCC1 antisense抑制ERCC1表达的剂量反应第22页
   ·ERCC1 antisense抑制ERCC1表达的时程反应第22页
  4.侧脑室注射ERCC1 antisense加重缺血性脑损伤第22-23页
   ·ERCC1 antisense减少脑内内源性ERCC1表达第22-23页
   ·ERCC1 antisense增加缺血脑内DNA损伤第23页
   ·ERCC1 antisense增加缺血性脑梗塞灶体积第23页
  5.ERCC1过表达对缺血损伤脑的保护作用第23-24页
   ·质粒在脑内有效表达的鉴定第23-24页
   ·ERCC1过表达减轻缺血性脑梗塞灶体积第24页
 (四)、讨论第24-28页
  1.ERCC1参与正常脑内的DNA修复第25页
  2.ERCC1参与缺血脑内的DNA修复第25-26页
  3.内源性ERCC1表达上调对急性缺血脑损伤具有保护作用第26-27页
  4.对ERCC1通过NER途径发挥作用机制的探讨第27-28页
 (五)、小结第28-29页
 (六)、图版说明第29-42页
 (七)、参考文献第42-48页
五、文献综述第48-72页
六、附录一 博士期间完成的另一部分工作(一)第72-79页
七、附录二 博士期间完成的另一部分工作(二)第79-82页
八、附录三 致谢第82-83页
九、附录四 已发表和待发表的文章第83-84页

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