| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 第二章 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株的分离与鉴定 | 第26-37页 |
| 1.材料和方法 | 第26-30页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| 2.结果与分析 | 第30-34页 |
| ·病毒培养 | 第30页 |
| ·免疫荧光抗体鉴定 | 第30-31页 |
| ·病毒中和试验 | 第31页 |
| ·病毒理化试验 | 第31-32页 |
| ·电镜观察 | 第32页 |
| ·PCR扩增实验结果 | 第32-34页 |
| 3.讨论 | 第34-36页 |
| ·关于病毒的细胞培养 | 第34-35页 |
| ·关于免疫荧光试验和电镜观察 | 第35页 |
| ·关于N基因的特征 | 第35-36页 |
| 4.小结 | 第36-37页 |
| 第三章 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株全基因组序列测定及长片段cDNA克隆 | 第37-48页 |
| 1.猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株全基因组序列测定 | 第37-43页 |
| ·材料和方法 | 第37-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·病毒基因组cDNA片段的RT-PCR扩增结果 | 第41页 |
| ·RT-PCR产物的克隆、测序与序列拼接 | 第41-42页 |
| ·TGEV全基因组序列比较和系统进化树构建 | 第42-43页 |
| 2.长片段cDNA克隆 | 第43-45页 |
| ·材料和方法 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·结果 | 第45页 |
| 3.讨论 | 第45-47页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株全基因组序列测定 | 第45-46页 |
| ·长片段cDNA克隆 | 第46-47页 |
| 4.小结 | 第47-48页 |
| 第四章 猪传染性胃肠炎病毒全基因组结构特征分析 | 第48-69页 |
| 1.材料与方法 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49页 |
| 2.结果与分析 | 第49-64页 |
| ·基因组密码子用法特点分析 | 第49-52页 |
| ·序列同源性比较 | 第52-53页 |
| ·5′端非编码区(5′UTR)结构分析 | 第53-55页 |
| ·非结构蛋白分析 | 第55-58页 |
| ·结构蛋白分析 | 第58-62页 |
| ·3′非编码区(3′UTR)分析 | 第62-64页 |
| 3.讨论 | 第64-67页 |
| ·基因组密码子偏爱性分析 | 第64页 |
| ·5′端及3′端非编码区的分析 | 第64-65页 |
| ·非结构蛋白的分析 | 第65-66页 |
| ·结构蛋白的分析 | 第66-67页 |
| 4.小结 | 第67-69页 |
| 第五章 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株N基因的原核表达及间接ELISA方法的初步建立 | 第69-88页 |
| 1.猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株N基因的原核表达及纯化 | 第69-78页 |
| ·实验材料 | 第69-71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·结果与分析 | 第74-78页 |
| ·PET-N重组质粒的构建 | 第74-75页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第75页 |
| ·重组质粒表达条件的优化 | 第75-77页 |
| ·融合蛋白表达产物Western Blotting检测 | 第77页 |
| ·重组表达蛋白在宿主菌中的分布 | 第77页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第77-78页 |
| 2.重组蛋白间接ELISA方法的初步建立 | 第78-83页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-83页 |
| ·抗原和抗体最佳浓度的确定 | 第81页 |
| ·最适封闭液的确定 | 第81页 |
| ·血清最适结合时间的确定 | 第81-82页 |
| ·酶标二抗稀释倍数和作用时间的确定 | 第82页 |
| ·底物作用时间的确定 | 第82-83页 |
| ·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第83页 |
| ·特异性试验 | 第83页 |
| 3.讨论 | 第83-87页 |
| ·关于N蛋白的表达系统 | 第83-84页 |
| ·关于N蛋白表达条件的优化 | 第84-85页 |
| ·关于N蛋白的回收 | 第85-86页 |
| ·关于重组质粒的构建及N蛋白的活性 | 第86页 |
| ·关于ELISA方法 | 第86-87页 |
| 4.小结 | 第87-88页 |
| 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-99页 |
| 附录 | 第99-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第117页 |
