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水稻逆境基因的克隆与相关分析

中文摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 植物对逆境应答的分子机制研究第12-28页
 引言第12页
 1.植物抗渗透胁迫的分子机制第12-27页
   ·渗透胁迫诱导基因产物及功能第13-14页
     ·第一类基因效应产物第13-14页
     ·第二类基因调控产物第14页
   ·渗透胁迫信号传导和基因表达调控第14-21页
     ·渗透胁迫信号的感受及信号的跨膜传递第14-16页
     ·渗透胁迫信号转导中的第二信使第16-18页
     ·渗透胁迫诱导基因的表达调控第18-21页
   ·逆境基因克隆的策略及功能验证的方法第21-27页
     ·差异表达基因筛选第21-24页
     ·基因表达的检测第24-27页
 2.研究设想第27-28页
第二章 基因克隆及差显分析第28-99页
 第一部分 材料与方法第28-40页
  1.实验材料第28-29页
   ·材料及处理第28页
   ·质粒和菌种第28页
   ·工具酶及主要试剂第28页
   ·主要仪器第28-29页
  2.实验方法第29-40页
   ·水稻总RNA提取第29页
   ·水稻RNA检测第29-30页
   ·mRNA差异显示及基因片段克隆第30-40页
     ·cDNA第一链的合成第30-32页
     ·玻璃粉纯化回收片段第32页
     ·连接转化第32-33页
     ·DNA测序第33-35页
     ·RT-PCR分析第35-36页
     ·生物信息学分析第36-37页
     ·cDNA全长的RACE克隆第37页
     ·SDS-PAGE原核蛋白表达检测第37-40页
 第二部分 结果与分析第40-99页
  1.逆境基因的克隆与分离第40-43页
   ·RNA的提取及检测第40页
   ·荧光差异显示筛选片段第40-41页
   ·大矩阵筛选差异基因第41-43页
     ·干旱处理后差异显示大矩阵第41页
     ·干旱处理后组织特异性表达差异第41-42页
     ·阳性克隆的筛选及转化第42-43页
  2.逆境基因的分析第43-99页
   第一节 osRAN2基因的分析第43-51页
   第二节 一个类远红光修复蛋白基因的克隆与分析第51-56页
   第三节 一个类GA响应蛋白基因的克隆与分析第56-62页
   第四节 一个水稻核糖体蛋白osL24e相似基因的克隆及表达分析第62-67页
   第五节 一个类休眠相关基因os879x008的克隆与分析第67-72页
   第六节 细胞膜上一个类Na~+/H~+蛋白基因的克隆与分析第72-77页
   第七节 一个水稻类26S蛋白基因的克隆与分析第77-82页
   第八节 一个预测蛋白基因的克隆与功能分析第82-88页
   第九节 水稻ABC转运器蛋白基因的克隆与分析第88-95页
   第十节 依据ABA信号传导的基因分类第95-99页
第三章 ABA对水稻内部生理物质的影响第99-106页
 1.材料与方法第100页
   ·愈伤组织的诱导与处理第100页
   ·碳水化合物的提取和测定第100页
   ·碳水化合物相关酶提取和活性测定第100页
 2.结果与分析第100-106页
   ·ABA对水稻愈伤组织内碳水化合物的影响第100-101页
   ·ABA对培养过程中非还原糖的影响第101-102页
   ·ABA对水稻愈伤组织中淀粉含量的影响第102页
   ·ABA对水稻愈伤组织内还原糖的影响第102-103页
   ·ABA对愈伤组织内F/G动态影响第103-104页
   ·ABA对与糖代谢有关酶活性的影响第104-106页
第四章 讨论第106-109页
   ·FDD荧光差异显示技术第106页
   ·逆境基因作用的复杂性第106-107页
   ·信号传导与ABA的关系第107页
     ·不依赖ABA调节的基因第107页
     ·依赖ABA调节的基因第107页
   ·逆境基因序列中的互作位点特性第107页
   ·ABA与水稻生理代谢的关系第107-109页
展望第109-110页
参考文献第110-120页
博士在读期间论文发表情况第120-121页
致谢第121页

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