摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-29页 |
·基因治疗概述 | 第8-10页 |
·病毒载体 | 第10-11页 |
·非病毒载体 | 第11-13页 |
·DNA 的体外缩合 | 第13-23页 |
·DNA 缩合物的形态 | 第13-14页 |
·缩合的条件和过程 | 第14-16页 |
·缩合条件 | 第14页 |
·缩合过程 | 第14-15页 |
·缩合的连续性和可逆性 | 第15-16页 |
·缩合过程的动力学和热力学 | 第16-17页 |
·缩合的熵驱动过程 | 第16-17页 |
·缩合过程中的能量变化 | 第17页 |
·影响缩合的因素 | 第17-21页 |
·DNA 的影响 | 第17-18页 |
·缩合剂的影响 | 第18-19页 |
·离子盐的影响 | 第19-20页 |
·其它因素(溶剂,pH 值,检测方法) | 第20-21页 |
·DNA 缩合在转基因中的应用进展 | 第21-23页 |
·温度敏感性非病毒载体 | 第23-27页 |
·温敏性脂质体 | 第23-24页 |
·温敏性高聚物修饰的脂质体 | 第24-25页 |
·温敏性阳离子高聚物载体 | 第25-27页 |
·论文工作的提出 | 第27-29页 |
第二章 温敏性N-异丙基丙烯酰胺-丙烯胺共聚物(PNI-AAM)及其胍基衍生物(PNI-AAM-G)的制备与表征 | 第29-38页 |
·引言 | 第29页 |
·实验部分 | 第29-30页 |
·原料 | 第29页 |
·NIPAAm/AAM 共聚物的制备 | 第29-30页 |
·PNI-AAM 的胍基化反应 | 第30页 |
·共聚物表征 | 第30-31页 |
·傅立叶转换红外光谱(FTIR)检测 | 第30页 |
·液体核磁氢谱(~1H NMR)和碳谱(~(13)C NMR)检测 | 第30-31页 |
·元素分析 | 第31页 |
·浊度测定 | 第31页 |
·结果与讨论 | 第31-37页 |
·红外光谱分析 | 第31-32页 |
·NMR 分析 | 第32-35页 |
·元素分析 | 第35-36页 |
·共聚物溶液的LCST | 第36-37页 |
·结论 | 第37-38页 |
第三章 PNI-AAM 及PNI-AAM-G 与DNA 复合物的研究 | 第38-50页 |
·引言 | 第38页 |
·实验部分 | 第38-39页 |
·原料 | 第38页 |
·复合物的形成 | 第38-39页 |
·复合物的表征 | 第39-41页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
·变温紫外检测 | 第39页 |
·复合物粒径检测 | 第39-40页 |
·TEM 检测 | 第40-41页 |
·结果与讨论 | 第41-49页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第41-43页 |
·变温紫外检测分析 | 第43-45页 |
·复合物粒径检测分析 | 第45-47页 |
·TEM | 第47-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
第四章 PNI-AAM 及PNI-AAM-G 介导的体外基因转染 | 第50-62页 |
·引言 | 第50页 |
·实验部分 | 第50-56页 |
·原料 | 第50-51页 |
·实验仪器 | 第51页 |
·菌体的培养与质粒的提取纯化 | 第51-53页 |
·配制LB 液体培养基 | 第51页 |
·操作 | 第51页 |
·质粒DNA 的大量提取 | 第51-53页 |
·C2C12 细胞的培养 | 第53-55页 |
·培养用液的制备 | 第53-54页 |
·操作 | 第54-55页 |
·质粒体外转染C2C12 细胞 | 第55页 |
·复合物的形成 | 第55页 |
·细胞转染 | 第55页 |
·荧光素酶活性分析 | 第55-56页 |
·细胞的裂解与荧光检测 | 第55页 |
·BCA 法测蛋白 | 第55-56页 |
·荧光素酶活性的确定 | 第56页 |
·结果与讨论 | 第56-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
攻读硕士期间的学术成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |