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绵羊毛性状相关基因的鉴定及初步研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-9页
符号、缩略语词表第9-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-24页
第二章 GHR 基因的扩增及差异表达基因的筛选与克隆第24-43页
 1 材料与方法第24-33页
   ·实验材料第24-25页
     ·实验动物第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24页
     ·引物设计第24-25页
   ·实验方法第25-33页
     ·样品的处理第25页
     ·总RNA 的提取及检测第25-26页
     ·反转录合成cDNA 第一条链第26-27页
     ·GHR 基因PCR 及差异显示PCR第27-28页
     ·1096非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析第28页
     ·目的条带的回收第28页
     ·差异条带的二次扩增第28页
     ·目的条带的回收及纯化第28-29页
     ·PCR 产物的克隆第29-31页
     ·差异片段的测序及生物信息学分析第31页
     ·Northern 杂交第31-33页
 2 结果第33-40页
   ·RNA 样品的制备第33-34页
   ·GHR cDNA 扩增第34页
   ·差异表达基因的筛选第34-36页
   ·差异条带的二次扩增及纯化第36-37页
   ·目的基因的克隆第37页
   ·差异表达基因片段的序列分析第37-39页
   ·Northern Blot 鉴定差异片段的真实性第39-40页
 3 讨论与小结第40-43页
第三章 组织原位杂交第43-52页
 1. 材料与方法第43-47页
   ·实验材料及试剂第43页
     ·实验材料第43页
     ·主要试剂第43页
   ·实验方法第43-47页
     ·载玻片的处理第43-44页
     ·石蜡切片的制备第44页
     ·地高辛cDNA 探针标记第44页
     ·杂交前准备工作第44-45页
     ·杂交前处理第45-46页
     ·预杂交及杂交第46页
     ·杂交后洗涤第46页
     ·杂交信号的检测第46-47页
 2 结果与分析第47-49页
   ·绵羊毛囊活性分析第47页
   ·生长激素受体mRNA 在绵羊毛囊的定位第47-48页
   ·差异表达基因mRNA 在绵羊毛囊的定位第48-49页
 3 小结与讨论第49-52页
   ·固定液的选择及固定时间的影响第50页
   ·探针标记物的选择第50页
   ·取材与固定对杂交的影响第50-51页
   ·增强组织的通透性和核酸探针的穿透性第51页
   ·探针和杂交温度对杂交信号的影响第51页
   ·脱片的处理第51页
   ·防止 RNase 污染第51-52页
结论与展望第52-53页
参考文献第53-58页
附录第58-64页
 附录1第58-60页
 附录2第60-61页
 附录3第61-62页
 附录4第62-63页
 附录5第63-64页
致谢第64-65页
作者简历第65-66页
导师评阅表第66页

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