| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-27页 |
| ·猪初乳中免疫球蛋白G(IgG)的研究现状 | 第9-12页 |
| ·猪初乳中免疫球蛋白G(IgG)的特点 | 第9-10页 |
| ·初乳中IgG含量的影响因素 | 第10页 |
| ·IgG的水解片段与生物学活性 | 第10-11页 |
| ·Fab的生物学活性 | 第11页 |
| ·Fc的生物学活性 | 第11页 |
| ·初乳中IgG与仔猪的关系 | 第11-12页 |
| ·免疫球蛋白G的Fc片段受体基因(FcRn)研究进展 | 第12-17页 |
| ·FcRn的发现 | 第12-13页 |
| ·FcRn的结构特点 | 第13-14页 |
| ·FcRn的作用 | 第14-15页 |
| ·FcRn的转胞吞作用 | 第14页 |
| ·FcRn的防降解和维持动态平衡作用 | 第14-15页 |
| ·FcRn的研究进展 | 第15-17页 |
| ·ELISA法的简介 | 第17-18页 |
| ·标记抗体技术的原理 | 第17页 |
| ·酶标抗体技术(ELISA)的原理 | 第17页 |
| ·ELISA的检验方法 | 第17-18页 |
| ·候选基因分析方法 | 第18-20页 |
| ·候选基因的选择 | 第19页 |
| ·引物设计及基因相应片段的扩增 | 第19页 |
| ·候选基因多态位点的寻找 | 第19页 |
| ·候选基因与表型性状间的连锁分析 | 第19-20页 |
| ·连锁关系的验证 | 第20页 |
| ·候选基因法的优缺点 | 第20页 |
| ·PCR-SSCP技术和SNPs研究综述 | 第20-24页 |
| ·PCR-SSCP技术 | 第20-22页 |
| ·PCR-SSCP方法的原理 | 第20-22页 |
| ·PCR-SSCP方法的特点 | 第22页 |
| ·PCR-SSCP方法在动物遗传育种中的应用 | 第22页 |
| ·SNPs的研究进展及其应用 | 第22-24页 |
| ·SNPs概念及其特点 | 第22-23页 |
| ·SNP在家畜遗传育种中的应用 | 第23-24页 |
| ·BAC文库及其在基因组学中的应用 | 第24-26页 |
| ·BAC载体概述 | 第24页 |
| ·BAC文库的构建方法 | 第24页 |
| ·BAC的筛选系统 | 第24-25页 |
| ·PCR筛选系统 | 第24-25页 |
| ·HD杂交膜筛选系统 | 第25页 |
| ·BAC文库的应用 | 第25-26页 |
| ·基因组物理图谱构建 | 第25页 |
| ·基因的图位克隆 | 第25页 |
| ·基因组测序 | 第25-26页 |
| ·转基因研究 | 第26页 |
| ·BAC与比较基因组研究 | 第26页 |
| ·本研究的主要内容及目的 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27-30页 |
| ·实验样本 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·常规溶液及试剂配制 | 第27-29页 |
| ·ELISA中常规溶液及试剂配制 | 第27-28页 |
| ·分子实验中常规溶液及试剂配制 | 第28-29页 |
| ·药品和酶 | 第29-30页 |
| ·ELISA中主要的药品和酶 | 第29页 |
| ·分子实验中主要的药品和酶 | 第29-30页 |
| ·菌株和载体 | 第30页 |
| ·分析工具软件 | 第30页 |
| ·主要实验步骤 | 第30-40页 |
| ·ELISA检测猪初乳中IgG的含量 | 第30-32页 |
| ·乳清的分离 | 第30页 |
| ·最佳反应条件确定的步骤 | 第30-31页 |
| ·猪血清IgG的DAS-ELISA标准曲线的制作： | 第31-32页 |
| ·测定初乳中IgG的方法 | 第32页 |
| ·4D—两步快速PCR法筛选猪BAC文库 | 第32-34页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第32-33页 |
| ·BAC文库阳性克隆的培养与保存 | 第33页 |
| ·阳性克隆的鉴定(菌体PCR) | 第33-34页 |
| ·提取BAC基因组(醋酸钾法) | 第34页 |
| ·酶切回收阳性克隆基因组 | 第34页 |
| ·猪血样基因组DNA提取 | 第34-35页 |
| ·裂解血基因组DNA提取： | 第34-35页 |
| ·猪耳组织基因组DNA提取 | 第35页 |
| ·乳清的分离 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·最佳PCR条件的建立 | 第37-38页 |
| ·14％非变性聚丙烯酰胺凝胶(30ml体积，0.1cm胶条)制作及电泳 | 第38页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染 | 第38-39页 |
| ·猪FcRn基因部分序列的克隆和分析 | 第39-40页 |
| ·利用玻璃奶洗脱法回收PCR产物 | 第39页 |
| ·连接反应 | 第39页 |
| ·重组质粒大小的快速鉴定—Cracking法 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA的小规模提取—碱裂解法 | 第40页 |
| ·数据统计分析 | 第40-42页 |
| ·FcRn基因群体遗传学分析 | 第40-41页 |
| ·关联分析模型 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-58页 |
| ·不同品种猪生产性状的基本统计分析 | 第42-43页 |
| ·不同品种猪初乳中IgG含量简单统计量 | 第42-43页 |
| ·不同品种猪仔猪3日龄窝平均增重简单统计量 | 第43页 |
| ·猪FcRn基因的PCR—SSCP分析 | 第43-44页 |
| ·猪基因组的提取结果 | 第43-44页 |
| ·猪血中提取的基因组 | 第43页 |
| ·猪耳组织中提取的基因组 | 第43-44页 |
| ·FcRn全序列的获得 | 第44-48页 |
| ·通过猪BAC文库测序获得内含子4的序列 | 第44-47页 |
| ·从猪BAC库筛选FcRn阳性克隆所用引物的选择 | 第44-45页 |
| ·猪BAC文库超级池筛选结果 | 第45页 |
| ·二级池的筛选结果 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆菌体的培养及质粒的提取 | 第46页 |
| ·质粒的酶切结果 | 第46页 |
| ·质粒测序结果 | 第46-47页 |
| ·猪FcRn基因内含子3、5、6测序结果及其分析 | 第47-48页 |
| ·内含子3、5、6区域测序结果 | 第47-48页 |
| ·扩增内含子序列提交给Genbank收录 | 第48页 |
| ·猪FcRn基因α链的PCR—SSCP检测与分析 | 第48-58页 |
| ·引物primerl的PCR—SSCP与分析结果 | 第48-50页 |
| ·引物primerl的PCR扩增结果 | 第48-49页 |
| ·引物primerl的扩增片段SSCP检测结果 | 第49页 |
| ·测序分析结果 | 第49-50页 |
| ·引物primerl基因型在三个品种中的分布情况 | 第50页 |
| ·引物primer5 PCR—SSCP与分析结果 | 第50-52页 |
| ·引物primer5的PCR扩增结果 | 第50-51页 |
| ·引物primer5扩增片段的SSCP检测结果 | 第51页 |
| ·测序分析结果 | 第51页 |
| ·引物primer5基因型在三个品种中的分布情况 | 第51-52页 |
| ·引物primer6 PCR—SSCP与分析结果 | 第52-54页 |
| ·引物primer6 PCR扩增结果 | 第52页 |
| ·引物primer6扩增片段SSCP检测结果 | 第52-53页 |
| ·测序分析结果 | 第53页 |
| ·引物primer6基因型在三个品种中的分布情况 | 第53-54页 |
| ·引物Primer1、5、6突变位点序列分析 | 第54页 |
| ·不同品种引物Primer1、5、6基因型与生产性状关系的统计分析 | 第54-56页 |
| ·不同品种引物Primer1、5、6基因型与仔猪3日龄窝平均增重的统计分析 | 第54-55页 |
| ·不同品种引物primer1、5、6基因型频率与初乳中IgG含量的统计分析 | 第55-56页 |
| ·引物primer2、3、4、7的PCR—SSCP检测分析结果 | 第56-58页 |
| ·引物primer2、3、4、7的PCR结果 | 第56页 |
| ·引物primer2、3、4、7的SSCP检测结果 | 第56-58页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第58-61页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·FcRn基因的点突变 | 第58页 |
| ·FcRn基因的突变位点与生产性状的关联分析 | 第58-59页 |
| ·本研究的检测群体 | 第59页 |
| ·FcRn基因BAC测序及PCR直接测序 | 第59页 |
| ·ELISA方法检测初乳中IgG含量 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
