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绿豆生物活性物质的研究

第1章 综述第1-37页
   ·绿豆生物活性物质及生理功能第11-15页
     ·绿豆第11页
     ·绿豆组成第11-12页
     ·绿豆生物活性物质第12-14页
     ·绿豆生理功能第14-15页
   ·植物抗菌蛋白(肽)第15-21页
     ·植物抗菌蛋白(肽)的研究意义第15-16页
     ·植物抗菌蛋白(肽)的种类第16-20页
       ·植物抗菌蛋白第16-17页
       ·植物抗菌肽第17-20页
     ·植物抗菌蛋白(肽)抑菌机理第20-21页
     ·植物抗菌蛋白(肽)实际应用第21页
   ·豆科植物中生物活性物质的研究进展第21-32页
     ·苹果酸脱氢酶的研究进展第21-23页
       ·苹果酸脱氢酶的催化活性和生理作用第21-22页
       ·苹果酸脱氢酶的研究进展第22-23页
     ·几丁质酶的研究进展第23-26页
       ·几丁质酶的酶学性质第23-25页
       ·几丁质酶的生物活性第25页
       ·几丁质酶基因的转化第25-26页
     ·溶菌酶的研究进展第26-29页
       ·溶菌酶的性质及生理功能第26页
       ·溶菌酶的研究与应用第26-29页
     ·植物脂转移蛋白的研究进展第29-32页
       ·植物脂转移蛋白的生物性质第29-31页
       ·植物脂转移蛋白的结构研究第31-32页
   ·豆科植物生物活性蛋白的研究方法第32-33页
     ·蛋白质的分离纯化第32页
     ·蛋白质的生物活性表征第32页
     ·蛋白质的结晶第32-33页
   ·本研究的意义与目的第33-37页
     ·绿豆研究的新思路第33-34页
     ·本研究的意义与目的第34-37页
第2章 材料与方法第37-67页
   ·绿豆生物活性物质的分离纯化第37-41页
     ·绿豆汁的硫酸铵沉降第37-38页
       ·盐析原理第37页
       ·材料与仪器第37页
       ·实验步骤第37-38页
     ·离子交换色谱法(IEC)第38-40页
       ·原理第38-39页
       ·常压色谱第39页
       ·高效离子交换液相色谱第39-40页
     ·凝胶过滤色谱法(SEC)第40-41页
       ·原理第40-41页
       ·材料与仪器第41页
       ·实验流程第41页
   ·绿豆生物活性物质组分分分析方法第41-49页
     ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳第41-45页
       ·原理第41-42页
       ·材料与仪器第42页
       ·溶液配制第42页
       ·实验流程第42-45页
     ·毛细管液相色谱(CLC)第45-46页
       ·原理第45页
       ·材料与仪器第45-46页
       ·色谱条件第46页
     ·蛋白质含量测定第46-47页
       ·原理第46页
       ·材料与仪器第46页
       ·实验步骤第46-47页
     ·N-末端序列测定及序列分析第47-49页
       ·原理第47-48页
       ·材料与仪器第48页
       ·N-末端序列测定第48页
       ·序列分析第48-49页
     ·基质辅助激光解吸附/离子化飞行时间质谱分析第49页
       ·MALDI-TOF 技术原理第49页
       ·材料与仪器第49页
       ·质谱分析第49页
   ·绿豆生物活性物质的分子量标定第49页
   ·绿豆生物活性物质的等电点测定第49-50页
     ·等电聚焦凝胶电泳法原理第49-50页
     ·等电点测定第50页
   ·绿豆生物活性物质的酶学表征第50-54页
     ·苹果酸脱氢酶的酶学性质第50-52页
       ·酶活力的测定第50-51页
       ·最适反应pH 的测定第51页
       ·最适反应温度的测定第51页
       ·热稳定性实验第51页
       ·米氏常数(Km)的测定第51页
       ·金属离子对酶活力的影响第51-52页
     ·几丁质酶的酶学性质第52-53页
       ·酶活力的测定第52页
       ·最适反应pH 的测定第52-53页
       ·最适反应温度的测定第53页
       ·热稳定性实验第53页
     ·溶菌酶的酶学性质第53-54页
       ·酶活力的测定第53页
       ·最适反应pH 的测定第53-54页
       ·最适反应温度的测定第54页
       ·热稳定性实验第54页
   ·绿豆生物活性物质的抑菌活性测定第54-56页
     ·原理第54页
     ·材料与仪器第54-55页
       ·受试菌种第54页
       ·仪器设备第54-55页
     ·抗真菌活性实验第55-56页
       ·抑菌圈法活性测试第55页
       ·抑菌IC50 测试第55页
       ·真菌形态的观测第55-56页
     ·抗细菌活性实验第56页
       ·抗细菌活性测定第56页
       ·细菌形态的观测第56页
       ·抑菌强度的测试第56页
   ·绿豆脂转移蛋白脂结合活性的测定第56-58页
     ·原理第56-57页
     ·材料与仪器第57页
     ·实验步骤第57-58页
   ·绿豆脂转移蛋白质的晶体培养第58-61页
     ·蛋白质晶体培养原理第58-59页
     ·蛋白质晶体培养过程及要求第59-60页
     ·材料与仪器第60页
     ·实验步骤第60-61页
   ·绿豆脂转移蛋白质晶体的X-衍射第61-64页
     ·X-衍射方法原理第61-63页
     ·材料与仪器第63-64页
   ·绿豆脂转移蛋白质的结构分析第64-66页
     ·结构解析原理第64-65页
     ·结构解析第65-66页
   ·本课题的实验流程第66-67页
第3章 结果与讨论第67-140页
   ·绿豆生物活性物质的分离第67-68页
     ·绿豆汁的初步分离——硫酸铵沉淀第67页
     ·CM-Sephadex 色谱纯化及活性检测第67-68页
   ·绿豆苹果酸脱氢酶的纯化及表征第68-79页
     ·P1 组分的高效液相色谱纯化第68-69页
     ·纯度鉴定和分子量标定第69-71页
     ·等电点测定第71-72页
     ·苹果酸脱氢酶的酶学性质第72-75页
       ·苹果酸脱氢酶的酶活第72页
       ·pH 对苹果酸脱氢酶酶活的影响第72-73页
       ·温度对苹果酸脱氢酶酶活的影响第73页
       ·苹果酸脱氢酶的热稳定性第73-74页
       ·米氏常数的测定第74-75页
       ·金属离子对酶活力的影响第75页
     ·N-末端序列测定与分析第75-78页
     ·苹果酸脱氢酶的酶学性质比较及意义第78-79页
   ·绿豆几丁质酶的纯化及表征第79-88页
     ·P1 组分的高效液相色谱纯化第79-80页
     ·P0’组分的凝胶色谱进一步纯化第80-81页
     ·纯度鉴定和分子量标定第81页
       ·SDS-PAGE 电泳分析第81页
       ·毛细管液相色谱法(CLC)第81页
     ·等电点测定第81-82页
     ·几丁质酶的酶学性质第82-85页
       ·几丁质酶的酶活第82-83页
       ·pH 对几丁质酶活的影响第83-84页
       ·温度对几丁质酶活的影响第84页
       ·几丁质酶的热稳定性第84-85页
     ·几丁质酶抗真菌活性第85-88页
       ·抗真菌测试第85-87页
       ·抗菌形态观测分析第87-88页
     ·豆科植物几丁质酶的性质比较第88页
   ·绿豆溶菌酶的纯化及表征第88-99页
     ·P2 组分的水浴除杂蛋白第88-90页
     ·P2 组分的高效液相色谱纯化第90页
     ·纯度鉴定和分子量标定第90-91页
       ·SDS-PAGE 电泳分析第90-91页
       ·毛细管液相色谱法(CLC)第91页
     ·N-末端序列测定与分析第91-92页
     ·溶菌酶的酶学性质第92-94页
       ·溶菌酶的酶活第92页
       ·pH 对溶菌酶酶活的影响第92页
       ·温度对溶菌酶酶活的影响第92-93页
       ·溶菌酶的热稳定性第93页
       ·溶菌酶的的酶学性质比较第93-94页
     ·溶菌酶抗真菌活性第94-97页
       ·抗真菌测试第94-97页
       ·抗真菌形态观测分析第97页
     ·溶菌酶抗细菌活性第97-98页
     ·绿豆溶菌酶的新特性第98-99页
   ·绿豆非特异脂转移蛋白(NSLTP)的纯化及表征第99-111页
     ·P1 组分的高效液相色谱纯化第99页
     ·纯度鉴定和分子量标定第99-101页
       ·SDS-PAGE 电泳分析第99-100页
       ·MALDI-TOF 质谱鉴定第100-101页
     ·nsLTP 的N-末端序列测定与分析第101-104页
     ·nsLTP 抗真菌活性第104-106页
     ·nsLTP 抗细菌活性第106-109页
     ·nsLTP 的脂结合活性第109-111页
     ·nsLTP 抗菌形态观测分析第111页
   ·绿豆非特异脂转移蛋白的晶体培养与结构分析第111-124页
     ·结晶条件的筛选第112-118页
       ·结晶温度的选择第112-113页
       ·结晶缓冲液的初选择第113-118页
       ·结晶缓冲液的再选择第118页
       ·结晶缓冲液的优化第118页
     ·nsLTP 晶体的X-衍射第118-120页
     ·nsLTP 的结构分析第120-122页
     ·nsLTP 的结构与功能的关系第122-124页
       ·nsLTP 的结构与脂转移活性第122-124页
       ·nsLTP 的结构与抗菌活性第124页
   ·绿豆功能蛋白质组第124-133页
     ·绿豆功能蛋白质组的特性分析第124-127页
     ·绿豆功能蛋白质组的抗菌机理第127-133页
       ·抗真菌机理分析第127-130页
       ·抗细菌机理分析第130-133页
   ·植物防御蛋白第133-136页
     ·植物防御蛋白的色谱行为第133-135页
     ·植物防御蛋白的生物多样性第135-136页
   ·生物界功能分子的进化趋向第136-140页
第4章 总结与展望第140-146页
   ·总结第140-145页
   ·展望第145-146页
参考文献第146-157页
附录第157-168页
致谢第168-169页
个人简历第169页
攻读博士学位期间的学术论文及学术活动第169-170页

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