| 目录 | 第1-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 引言 | 第12页 |
| 西尼罗河病毒研究进展 | 第12-36页 |
| 1 西尼罗河病毒简介 | 第12-15页 |
| ·西尼罗河病毒病原学 | 第12-13页 |
| ·临床表现 | 第13-15页 |
| 2 流行病学 | 第15-17页 |
| ·传染源 | 第15页 |
| ·传播媒介 | 第15页 |
| ·传播方式 | 第15-16页 |
| ·易感动物 | 第16-17页 |
| ·流行分布特点 | 第17页 |
| 3 世界流行趋势 | 第17-19页 |
| ·流行简史 | 第17-18页 |
| ·重大历史事件 | 第18-19页 |
| 4 诊断技术研究进展 | 第19-21页 |
| ·ELISA技术 | 第19-20页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术 | 第20页 |
| ·反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)技术 | 第20页 |
| ·实时荧光定量反转录PCR(Real time RT-PCR)技术 | 第20-21页 |
| ·基于核酸序列的扩增(Nucleic Acid Sequenee-based Amplifieation Assay，NASBA，也称自主序列复制)技术 | 第21页 |
| 5 西尼罗河病毒传入我国的风险分析 | 第21-22页 |
| 6 我国防范西尼罗病毒入侵的措施 | 第22-23页 |
| 7 小结 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-36页 |
| 第一章 西尼罗河病毒反转录巢式PCR(RT-NPCR)检测方法的建立 | 第36-52页 |
| 1 材料和方法 | 第36-45页 |
| ·重组质粒和日本乙型脑炎病毒冻干苗 | 第36-37页 |
| ·引物的设计与合成 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·原始质粒的转化和扩增及日本乙型脑炎病毒病毒RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·常规PCR法扩增目的片段 | 第38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| ·用于体外转录的DNA模板的构建 | 第38-41页 |
| ·体外转录 | 第41-43页 |
| ·RT-nPCR检测技术的建立 | 第43-45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| ·常规PCR法扩增目的片段切胶纯化结果 | 第45页 |
| ·菌液PCR筛选阳性菌落结果 | 第45-46页 |
| ·体外转录模板的线性化结果 | 第46页 |
| ·体外转录结果 | 第46页 |
| ·RT-nPCR扩增目的片段及特异性反应结果 | 第46-48页 |
| ·RT-nPCR的敏感性试验结果 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-52页 |
| 第二章 西尼罗河病毒基于TAQMAN探针REAL TIME RT-pCR检测方法的建立 | 第52-70页 |
| 1 材料和方法 | 第52-60页 |
| ·重组质粒及日本乙型脑炎病毒冻干苗 | 第52-53页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53-54页 |
| ·Real time RT-PCR检测方法的建立 | 第54-60页 |
| 2 结果 | 第60-66页 |
| ·常规PCR法扩增目的片段结果及切胶纯化PCR产物结果 | 第60-61页 |
| ·菌液PCR筛选阳性菌落结果 | 第61-62页 |
| ·阳性菌液测序结果 | 第62页 |
| ·体外转录模板的线性化结果 | 第62页 |
| ·体外转录结果及纯化后结果 | 第62-63页 |
| ·常规RT-PCR敏感性分析结果 | 第63页 |
| ·Real time RT-PCR扩增目的片段及特异性反应结果 | 第63-65页 |
| ·Real-time RT-PCR敏感度分析及其标准曲线的建立 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-73页 |
