| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩写词 | 第11-13页 |
| 目录 | 第13-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-41页 |
| 1 木质素生物合成的研究进展 | 第16-32页 |
| ·木质素的组成 | 第16-17页 |
| ·木质素的生物合成 | 第17-26页 |
| ·木质素合成的分子调控 | 第26-32页 |
| 2 反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第32-39页 |
| ·反义RNA技术的操作原理 | 第33-35页 |
| ·反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第35-38页 |
| ·反义RNA技术的特点和展望 | 第38-39页 |
| 3 研究的目的意义 | 第39-41页 |
| 第二章 苎麻咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因克隆与生物信息学分析 | 第41-90页 |
| 1 材料与方法 | 第41-60页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·菌种 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-60页 |
| ·苎麻总RNA的分离 | 第43页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因cDNA核心序列的克隆 | 第43-50页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因全长cDNA序列的克隆 | 第50-56页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因组序列的克隆 | 第56-58页 |
| ·在大肠杆菌中高效表达苎麻CCoAOMT cDNA编码区 | 第58-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-88页 |
| ·苎麻总RNA的分离 | 第60页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因cDNA核心序列的克隆与测序 | 第60-62页 |
| ·RT-PCR扩增反应条件优化 | 第60-61页 |
| ·RT-PCR扩增产物阳性克隆的筛选与鉴定 | 第61-62页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因全长cDNA序列的克隆与测序 | 第62-79页 |
| ·cDNA末端的克隆 | 第62页 |
| ·cDNA末端扩增产物测序及核苷酸序列生物信息学分析 | 第62-79页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因基因组DNA片段的克隆与序列分析 | 第79-86页 |
| ·PCR扩增反应条件优化 | 第79-80页 |
| ·PCR扩增产物T载体连接及阳性克隆的筛选与鉴定 | 第80页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因基因组DNA片段的序列分析 | 第80-86页 |
| ·苎麻CCoAOMT cDNA编码区在大肠杆菌中的高效表达 | 第86-88页 |
| ·高效表达载体的构建的验证 | 第86页 |
| ·大肠杆菌中苎麻CCoAOMT cDNA编码蛋白的诱导表达 | 第86-88页 |
| 3 讨论 | 第88-90页 |
| ·苎麻总RNA的分离成功的关键 | 第88-89页 |
| ·采用简并引物需要反复实验 | 第89页 |
| ·关于序列比较与分子进化分析方法 | 第89-90页 |
| 第三章 烟草CCoAOMT基因克隆与反义表达载体的构建 | 第90-103页 |
| 1 材料与方法 | 第90-98页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·菌种与质粒 | 第90页 |
| ·主要试剂 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-98页 |
| ·烟草总RNA的分离 | 第91页 |
| ·烟草CCoAOMT基因全长cDNA的克隆 | 第91-94页 |
| ·烟草CCoAOMT基因反义表达载体的构建 | 第94-97页 |
| ·反义表达载体直接转化转化根癌农杆菌 | 第97-98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-102页 |
| ·烟草CCoAOMT基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第98-101页 |
| ·烟草CCoAOMT基因反义表达载体的构建与验证 | 第101页 |
| ·工程根癌农杆菌LBA4404(pBI121-antiNTCCoAOMT)的验证 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-103页 |
| 第四章 苎麻反义CCoAOMT基因表达载体的构建和遗传转化的研究 | 第103-117页 |
| 1 材料与方法 | 第103-108页 |
| ·材料 | 第103-104页 |
| ·植物材料 | 第103页 |
| ·菌种 | 第103页 |
| ·主要试剂 | 第103-104页 |
| ·方法 | 第104-108页 |
| ·苎麻反义CCoAOMT基因表达载体的构建 | 第104页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因反义表达载体直接转化根癌农杆菌 | 第104-105页 |
| ·苎麻叶片再生植株体系的建立 | 第105-106页 |
| ·苎麻对Kan的耐受性实验 | 第106-107页 |
| ·农杆菌介导苎麻叶片转基因操作体系的优化 | 第107页 |
| ·工程农杆菌介导反义CCoAOMT基因遗传转化的研究 | 第107-108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-116页 |
| ·苎麻CCoAOMT基因反义表达载体的构建 | 第108-110页 |
| ·苎麻反义CCoAOMT基因表达载体转化工程根癌农杆菌 | 第110页 |
| ·苎麻叶片愈伤组织的诱导和叶片直接分化芽体系的建立 | 第110页 |
| ·转基因苎麻合适的筛选压力Kan浓度的确定 | 第110-112页 |
| ·建立农杆菌介导苎麻叶片转基因操作体系 | 第112-113页 |
| ·工程农杆菌介导反义CCoAOMT基因表达载体遗传转化 | 第113-116页 |
| 3 讨论 | 第116-117页 |
| 第五章 结论 | 第117-120页 |
| 1 主要研究结果 | 第117-118页 |
| 2 主要创新之处 | 第118页 |
| 3 今后的研究方向与目标 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-137页 |
| 附录1 测序报告 | 第137-153页 |
| 附录2 GenBank登录序列 | 第153-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 在读期间的主要成果 | 第164-166页 |
| 作者简介 | 第166-167页 |
