摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-15页 |
第二章 文献综述 | 第15-20页 |
·FMDV 受体结合位点 | 第15-16页 |
·整联蛋白结构及功能 | 第16-18页 |
·硫酸乙酰肝素受体 | 第18-19页 |
·讨论与展望 | 第19-20页 |
第三章 口蹄疫病毒猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因的克隆与分析 | 第20-36页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·组织病料 | 第20页 |
·菌种和载体 | 第20页 |
·主要试剂和酶 | 第20页 |
·主要试剂及配制 | 第20-21页 |
·实验器材 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-23页 |
·引物的设计与合成 | 第21-22页 |
·提取组织 RNA | 第22页 |
·cDNA 的合成 | 第22页 |
·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因的 PCR 扩增 | 第22-23页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第23页 |
·目的基因与克隆 T 载体的连接与转化 | 第23页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第23页 |
·结果 | 第23-35页 |
·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因 PCR 扩增 | 第23-24页 |
·目的基因与 T 载体的连接转化和鉴定 | 第24-25页 |
·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因序列测定与分析 | 第25-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
第四章 口蹄疫病毒牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的克隆与分析 | 第36-53页 |
·实验材料 | 第36页 |
·组织病料 | 第36页 |
·菌种、载体 | 第36页 |
·主要试剂和酶 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-37页 |
·引物的设计与合成 | 第36-37页 |
·提取组织 RNA | 第37页 |
·cDNA 的合成 | 第37页 |
·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的 PCR 扩增 | 第37页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第37页 |
·目的基因与克隆 T 载体的连接与转化 | 第37页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第37页 |
·结果 | 第37-52页 |
·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的 PCR 扩增 | 第37-39页 |
·目的基因与 T 载体的连接转化和鉴定 | 第39页 |
·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因序列测定与分析 | 第39-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第五章 猪源整联蛋白β1、β3 亚基基因稳定转染 CHO 细胞系的建立与鉴定 | 第53-63页 |
·实验材料 | 第53-54页 |
·克隆菌种、载体与细胞 | 第53页 |
·主要试剂和酶 | 第53页 |
·实验所用试剂及配制 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-58页 |
·引物的设计与合成 | 第54页 |
·真核表达载体 pcDNA3.1/(+)-β1 和 pcDNA3.1/(+)-β3 的构建 | 第54-55页 |
·重组表达质粒分别转染 CHO 细胞及筛选阳性细胞 | 第55-56页 |
·稳定转染猪源β1 和β3 亚基基因 CHO 细胞系的鉴定 | 第56-58页 |
·实验结果 | 第58-61页 |
·真核表达载体 pcDNA3.1/(+)-β1 和 pcDNA3.1/(+)-β3 的构建 | 第58页 |
·重组表达质粒转染 CHO 细胞及筛选稳定整合体 | 第58-59页 |
·稳定转染猪源整联蛋白β1 和β3 亚基基因 CHO 细胞株的鉴定 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第六章 研究结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |