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口蹄疫病毒受体基因的克隆及猪源受体β1和β3亚基基因稳定转染CHO细胞系的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 前言第12-15页
第二章 文献综述第15-20页
   ·FMDV 受体结合位点第15-16页
   ·整联蛋白结构及功能第16-18页
   ·硫酸乙酰肝素受体第18-19页
   ·讨论与展望第19-20页
第三章 口蹄疫病毒猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因的克隆与分析第20-36页
   ·实验材料第20-21页
     ·组织病料第20页
     ·菌种和载体第20页
     ·主要试剂和酶第20页
     ·主要试剂及配制第20-21页
     ·实验器材第21页
   ·实验方法第21-23页
     ·引物的设计与合成第21-22页
     ·提取组织 RNA第22页
     ·cDNA 的合成第22页
     ·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因的 PCR 扩增第22-23页
     ·PCR 产物的回收纯化第23页
     ·目的基因与克隆 T 载体的连接与转化第23页
     ·重组质粒的提取与鉴定第23页
   ·结果第23-35页
     ·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因 PCR 扩增第23-24页
     ·目的基因与 T 载体的连接转化和鉴定第24-25页
     ·猪源整联蛋白αv、β1、β3 和β6 亚基基因序列测定与分析第25-35页
   ·讨论第35-36页
第四章 口蹄疫病毒牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的克隆与分析第36-53页
   ·实验材料第36页
     ·组织病料第36页
     ·菌种、载体第36页
     ·主要试剂和酶第36页
   ·实验方法第36-37页
     ·引物的设计与合成第36-37页
     ·提取组织 RNA第37页
     ·cDNA 的合成第37页
     ·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的 PCR 扩增第37页
     ·PCR 产物的回收纯化第37页
     ·目的基因与克隆 T 载体的连接与转化第37页
     ·重组质粒的提取与鉴定第37页
   ·结果第37-52页
     ·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因的 PCR 扩增第37-39页
     ·目的基因与 T 载体的连接转化和鉴定第39页
     ·牛源整联蛋白αv、β1、β3、β6 和β8 亚基基因序列测定与分析第39-52页
   ·讨论第52-53页
第五章 猪源整联蛋白β1、β3 亚基基因稳定转染 CHO 细胞系的建立与鉴定第53-63页
   ·实验材料第53-54页
     ·克隆菌种、载体与细胞第53页
     ·主要试剂和酶第53页
     ·实验所用试剂及配制第53-54页
   ·实验方法第54-58页
     ·引物的设计与合成第54页
     ·真核表达载体 pcDNA3.1/(+)-β1 和 pcDNA3.1/(+)-β3 的构建第54-55页
     ·重组表达质粒分别转染 CHO 细胞及筛选阳性细胞第55-56页
     ·稳定转染猪源β1 和β3 亚基基因 CHO 细胞系的鉴定第56-58页
   ·实验结果第58-61页
     ·真核表达载体 pcDNA3.1/(+)-β1 和 pcDNA3.1/(+)-β3 的构建第58页
     ·重组表达质粒转染 CHO 细胞及筛选稳定整合体第58-59页
     ·稳定转染猪源整联蛋白β1 和β3 亚基基因 CHO 细胞株的鉴定第59-61页
   ·讨论第61-63页
第六章 研究结论第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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