摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-29页 |
第一章 植物抗病毒基因工程 | 第10-22页 |
1. 毒蛋白介导的抗病性 | 第10-14页 |
·外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因 | 第11-12页 |
·复制酶(Replicase)基因 | 第12-14页 |
·运动蛋白(Movement Protein,MP)基因 | 第14页 |
2. RNA 介导的抗病性 | 第14-18页 |
·R NA 积累介导的抗病性 | 第15-17页 |
·R NA 沉默介导的抗病性 | 第17-18页 |
3.其他类型的抗病性 | 第18-22页 |
·利用植物抗病基因获得病毒抗性 | 第18-19页 |
·核糖体失活蛋白基因 | 第19-22页 |
·植物抗体基因 | 第22页 |
4. 展望 | 第22页 |
第二章 马铃薯Y病毒属病毒HC-Pro研究进展 | 第22-29页 |
1.蚜虫传毒活性 | 第23-24页 |
2.蛋白酶解活性 | 第24页 |
3.扩增和系统移动 | 第24-25页 |
4.协生和症状产生 | 第25页 |
5.核酸互作 | 第25-26页 |
6.抑制基因沉默 | 第26-29页 |
第二部分实验研究 | 第29-67页 |
第一章 HC-Pro基因缺失突变体片断的获得与植物表达载体的构建 | 第31-47页 |
1.材料与方法 | 第31-37页 |
·材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-37页 |
2.结果与分析 | 第37-44页 |
·PVYN HC-Pro 基因缺失突变体片断的扩增 | 第37-38页 |
·突变体片断与pUC18 质粒的连接及重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
·基因序列的测定与分析 | 第39-41页 |
·突变体基因植物表达载体的构建 | 第41-44页 |
3.结论与讨论 | 第44-47页 |
·结论 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第二章 PVYN HC基因及其突变体在烟草中的表达和其介导的抗病性比较 | 第47-61页 |
1.材料与方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
2. 结果与分析 | 第51-57页 |
·基因转化及转基因植株的再生 | 第51页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第51-52页 |
·转基因烟草植株的抗病性分析 | 第52-56页 |
·蚜虫传病毒实验 | 第56-57页 |
3. 结论与讨论 | 第57-61页 |
·结论 | 第57页 |
·讨论 | 第57-61页 |
第三章 PVYN HC基因的原核表达及抗血清制备 | 第61-67页 |
1. 材料与方法 | 第61-63页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-63页 |
2. 结果与分析 | 第63-67页 |
·原核表达载体的构建 | 第63页 |
·基因的原核表达与SDS-PAGE 分析 | 第63-64页 |
·抗血清制备及其western blot 分析 | 第64-67页 |
3. 结论与讨论 | 第67页 |
·结论 | 第67页 |
·讨论 | 第67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |