主要英文缩略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-17页 |
前言 | 第17-19页 |
第一部分 L1-Ig(1-4)结构域基因提取和原核表达载体的构建 | 第19-36页 |
一、 材料与方法 | 第19-29页 |
(一) 试剂与材料 | 第19-22页 |
(二) 实验方法 | 第22-29页 |
1 总RNA的提取 | 第22-23页 |
2 RT-PER | 第23-24页 |
3 质粒的小量抽提 | 第24-26页 |
4 质粒的大量抽提 | 第26-27页 |
5 感受态大肠杆菌的制备 | 第27页 |
6 质粒的转化 | 第27-28页 |
7 细菌的α互补现象筛选 | 第28页 |
8 质粒/DNA的酶切 | 第28页 |
9 质粒/DNA的连接 | 第28页 |
10 DNA片段的胶回收 | 第28-29页 |
二、 结果 | 第29-32页 |
1 、 总RNA的提取和含量计算 | 第29-30页 |
2 、 L1-Ig(1-4)的基因提取和鉴定 | 第30-31页 |
3 、 原核表达载体pET28a(+)-L1-Ig(1-4)的构建 | 第31-32页 |
三、 讨论 | 第32-36页 |
第二部分 L1-Ig(1-4)融合蛋白的表达、复性和活性测定 | 第36-50页 |
一、 材料与方法 | 第36-42页 |
(一) 试剂与材料 | 第36-39页 |
(二) 实验方法 | 第39-42页 |
1 融合蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
2 表达产物溶解性分析 | 第40页 |
3 表达产物的亲和层析纯化和复性 | 第40-41页 |
4 脊髓原代神经元的培养和纯化 | 第41页 |
5 PC12细胞的培养 | 第41-42页 |
6 PC12细胞的分化检测 | 第42页 |
(三) 统计学处理 | 第42页 |
二、 结果 | 第42-45页 |
(一) 融合蛋白的表达和溶解 | 第42-43页 |
(二) 融合蛋白的纯化和复性 | 第43页 |
(三) 融合蛋白的活性测定 | 第43-45页 |
三、 讨论 | 第45-50页 |
第三部分 L1-Ig(1-4)融合蛋白对损伤脊髓的修复作用 | 第50-77页 |
一、 材料和方法 | 第50-61页 |
(一) 试剂与材料 | 第50-55页 |
(二) 实验方法 | 第55-61页 |
(1) 脊髓损伤模型的建立和分组 | 第55-56页 |
(2) 脊髓标本的收集和制片方式 | 第56-57页 |
(3) 行为学评价 | 第57-58页 |
(4) 电生理检测 | 第58-59页 |
(5) NF免疫组化染色 | 第59页 |
(6) Western Blot | 第59-60页 |
(7) 皮质脊髓束的HRP逆行示踪观察 | 第60-61页 |
(三) 计算机图像分析和统计学处理 | 第61页 |
二、 实验结果 | 第61-70页 |
(1) 动物模型的建立和饲养 | 第61页 |
(2) 脊髓标本的HE、尼氏染色形态学观察 | 第61-63页 |
(3) 大鼠的行为学改变 | 第63-64页 |
(4) 电生理实验结果 | 第64-66页 |
(5) NF染色和Western Blot | 第66-68页 |
(6) 皮质脊髓束的HRP逆行示踪 | 第68-70页 |
三、 讨论 | 第70-77页 |
结论 | 第77-78页 |
综述一 神经细胞黏附分子L1的研究进展 | 第78-86页 |
综述二 中枢神经再生的研究进展 | 第86-99页 |
主要学术活动 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |