摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-35页 |
1 引言 | 第14页 |
2 高等植物成花的生理学研究进展 | 第14-19页 |
·温度 | 第15-16页 |
·激素 | 第16-17页 |
·多胺 | 第17-18页 |
·钙离子 | 第18-19页 |
3 高等植物成花的分子机理研究进展 | 第19-21页 |
·开花时间基因(Flowering time gene) | 第19-20页 |
·花分生组织特征基因(Floral meristem identity gene) | 第20页 |
·花器官特征基因(Floral organ identity gene) | 第20-21页 |
4 LFY基因在花启动和花发育中的作用 | 第21-36页 |
·LFY基因的时空表达和阈值 | 第22-24页 |
·LFY基因在成花各阶段中的作用 | 第24-25页 |
·LFY基因表达的基因调控网络 | 第25-29页 |
·影响LFY基因表达的生理因子 | 第29-36页 |
·生长素(IAA) | 第29-31页 |
·赤霉素(GAs) | 第31页 |
·细胞分裂素(CTKs) | 第31页 |
·脱落酸(ABA) | 第31-32页 |
·乙烯(Eth) | 第32页 |
·蔗糖(Sucrose) | 第32页 |
·昼夜节律性(circadian rhythm) | 第32-36页 |
5 展望 | 第36-35页 |
第二章 黄瓜子叶培养物成花实验系统的建立和优化 | 第35-45页 |
第一节 培养基pH对离体黄瓜子叶形成花芽的影响 | 第35-40页 |
1 材料与方法 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-38页 |
·培养基灭菌后培养期间的pH变化 | 第36-37页 |
·不同pH值培养基对花芽形成的影响 | 第37-38页 |
·不同pH值培养基预培养对花芽形成的影响 | 第38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
第二节 三碘苯甲酸和多效唑对黄瓜去顶苗直接成花的协同促进效应和作用部位 | 第40-45页 |
1 材料与方法 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-43页 |
·TIBA和PP333相配合对黄瓜去顶苗成花的影响 | 第41页 |
·不同浓度TIBA对黄瓜去顶苗直接成花的影响 | 第41-43页 |
·下胚轴长度对TIBA促进成花的效应 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
第三章 黄瓜子叶培养物花芽分化过程中的形态变化 | 第45-53页 |
1 材料与方法 | 第45-46页 |
·育苗与接种 | 第45页 |
·材料准备 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-47页 |
·0~7天苗子叶节的石蜡切片观察 | 第46页 |
·去顶后0~8天苗子叶节的石蜡切片观察 | 第46页 |
·去顶后0~6天苗子叶节的电镜扫描观察 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-53页 |
第四章 黄瓜子叶节离体培养物花芽分化的生理学研究 | 第53-65页 |
第一节 离体黄瓜子叶节花芽分化与内源激素及多胺的关系 | 第53-60页 |
1 材料与方法 | 第53-54页 |
·育苗、分化培养与取样 | 第53页 |
·内源激素含量测定 | 第53-54页 |
·内源多胺含量的测定 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-57页 |
·花芽分化过程中内源激素含量变化 | 第54-55页 |
·花芽分化过程中内源多胺含量变化 | 第55-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
第二节 黄瓜子叶节离体培养物花分化Ca~(2+)敏感期的研究 | 第60-65页 |
1 材料与方法 | 第60-61页 |
2 结果与分析 | 第61-63页 |
·离体培养黄瓜子叶节的花芽和营养芽分化过程 | 第61页 |
·培养1~7d期间CaCl_2脉冲处理对花芽分化的影响 | 第61-63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
第五章 黄瓜CFL基因在花芽和营养芽形成中的时空表达 | 第65-82页 |
1 材料与方法 | 第66-70页 |
·育苗、分化培养与取样 | 第66页 |
·材料固定、脱水、包埋与切片 | 第66-67页 |
·RNA探针合成与标记 | 第67-69页 |
·CFL基因中3′端片段的PCR扩增 | 第67页 |
·转录模板线性化 | 第67-68页 |
·RNA探针的地高辛标记 | 第68-69页 |
·RNA探针的检测 | 第69页 |
·杂交 | 第69-70页 |
·材料预处理 | 第69页 |
·杂交 | 第69页 |
·冲洗 | 第69-70页 |
·抗体染色 | 第70页 |
·荧光显色 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-76页 |
·通过PCR扩增得到CFL基因中3′端目的片段 | 第70-72页 |
·目的片段的克隆及鉴定 | 第72-73页 |
·反义和正义RNA探针的制备 | 第73-74页 |
·RNA原位杂交分析CFL基因在黄瓜花芽分化中的时空表达 | 第74-76页 |
·诱花培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果 | 第74-75页 |
·诱芽培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-82页 |
第六章 农杆菌介导的黄瓜CFL基因转化大岩桐的研究 | 第82-97页 |
1 材料与方法 | 第82-88页 |
·植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
·农杆菌介导的大岩桐的遗传转化 | 第83-84页 |
·植物材料 | 第83页 |
·农杆菌菌株 | 第83-84页 |
·主要试剂 | 第84页 |
·操作步骤 | 第84页 |
·转基因植株的检测 | 第84-88页 |
·基因组DNA的提取 | 第84-85页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第85页 |
·转基因植株的PCR-Southern杂交检测 | 第85-87页 |
·转基因植株的DNA斑点杂交检测 | 第87-88页 |
2 结果与分析 | 第88-95页 |
·pBC-cfl质粒的鉴定 | 第88-89页 |
·CFL基因植物表达载体的构建 | 第89-92页 |
·农杆菌介导的CFL转化大岩桐 | 第92页 |
·再生植株的分子检测 | 第92-95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
结束语与展望 | 第97-100页 |
参考文献 | 第100-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
附录: 在读博士学位期间主要科研业绩 | 第120-121页 |