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黄瓜离体子叶节花分化的生理和分子基础研究

摘要第1-10页
Abstract第10-14页
第一章 文献综述第14-35页
 1 引言第14页
 2 高等植物成花的生理学研究进展第14-19页
   ·温度第15-16页
   ·激素第16-17页
   ·多胺第17-18页
   ·钙离子第18-19页
 3 高等植物成花的分子机理研究进展第19-21页
   ·开花时间基因(Flowering time gene)第19-20页
   ·花分生组织特征基因(Floral meristem identity gene)第20页
   ·花器官特征基因(Floral organ identity gene)第20-21页
 4 LFY基因在花启动和花发育中的作用第21-36页
   ·LFY基因的时空表达和阈值第22-24页
   ·LFY基因在成花各阶段中的作用第24-25页
   ·LFY基因表达的基因调控网络第25-29页
   ·影响LFY基因表达的生理因子第29-36页
     ·生长素(IAA)第29-31页
     ·赤霉素(GAs)第31页
     ·细胞分裂素(CTKs)第31页
     ·脱落酸(ABA)第31-32页
     ·乙烯(Eth)第32页
     ·蔗糖(Sucrose)第32页
     ·昼夜节律性(circadian rhythm)第32-36页
 5 展望第36-35页
第二章 黄瓜子叶培养物成花实验系统的建立和优化第35-45页
 第一节 培养基pH对离体黄瓜子叶形成花芽的影响第35-40页
  1 材料与方法第36页
  2 结果与分析第36-38页
   ·培养基灭菌后培养期间的pH变化第36-37页
   ·不同pH值培养基对花芽形成的影响第37-38页
   ·不同pH值培养基预培养对花芽形成的影响第38页
  3 讨论第38-40页
 第二节 三碘苯甲酸和多效唑对黄瓜去顶苗直接成花的协同促进效应和作用部位第40-45页
  1 材料与方法第40-41页
  2 结果与分析第41-43页
   ·TIBA和PP333相配合对黄瓜去顶苗成花的影响第41页
   ·不同浓度TIBA对黄瓜去顶苗直接成花的影响第41-43页
   ·下胚轴长度对TIBA促进成花的效应第43页
  3 讨论第43-45页
第三章 黄瓜子叶培养物花芽分化过程中的形态变化第45-53页
 1 材料与方法第45-46页
   ·育苗与接种第45页
   ·材料准备第45-46页
 2 结果与分析第46-47页
   ·0~7天苗子叶节的石蜡切片观察第46页
   ·去顶后0~8天苗子叶节的石蜡切片观察第46页
   ·去顶后0~6天苗子叶节的电镜扫描观察第46-47页
 3 讨论第47-53页
第四章 黄瓜子叶节离体培养物花芽分化的生理学研究第53-65页
 第一节 离体黄瓜子叶节花芽分化与内源激素及多胺的关系第53-60页
  1 材料与方法第53-54页
   ·育苗、分化培养与取样第53页
   ·内源激素含量测定第53-54页
   ·内源多胺含量的测定第54页
  2 结果与分析第54-57页
   ·花芽分化过程中内源激素含量变化第54-55页
   ·花芽分化过程中内源多胺含量变化第55-57页
  3 讨论第57-60页
 第二节 黄瓜子叶节离体培养物花分化Ca~(2+)敏感期的研究第60-65页
  1 材料与方法第60-61页
  2 结果与分析第61-63页
   ·离体培养黄瓜子叶节的花芽和营养芽分化过程第61页
   ·培养1~7d期间CaCl_2脉冲处理对花芽分化的影响第61-63页
  3 讨论第63-65页
第五章 黄瓜CFL基因在花芽和营养芽形成中的时空表达第65-82页
 1 材料与方法第66-70页
   ·育苗、分化培养与取样第66页
   ·材料固定、脱水、包埋与切片第66-67页
   ·RNA探针合成与标记第67-69页
     ·CFL基因中3′端片段的PCR扩增第67页
     ·转录模板线性化第67-68页
     ·RNA探针的地高辛标记第68-69页
     ·RNA探针的检测第69页
   ·杂交第69-70页
     ·材料预处理第69页
     ·杂交第69页
     ·冲洗第69-70页
     ·抗体染色第70页
     ·荧光显色第70页
 2 结果与分析第70-76页
   ·通过PCR扩增得到CFL基因中3′端目的片段第70-72页
   ·目的片段的克隆及鉴定第72-73页
   ·反义和正义RNA探针的制备第73-74页
   ·RNA原位杂交分析CFL基因在黄瓜花芽分化中的时空表达第74-76页
     ·诱花培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果第74-75页
     ·诱芽培养基上不同培养时期子叶节切片原位杂交结果第75-76页
 3 讨论第76-82页
第六章 农杆菌介导的黄瓜CFL基因转化大岩桐的研究第82-97页
 1 材料与方法第82-88页
   ·植物表达载体的构建第82-83页
   ·农杆菌介导的大岩桐的遗传转化第83-84页
     ·植物材料第83页
     ·农杆菌菌株第83-84页
     ·主要试剂第84页
     ·操作步骤第84页
   ·转基因植株的检测第84-88页
     ·基因组DNA的提取第84-85页
     ·转基因植株的PCR检测第85页
     ·转基因植株的PCR-Southern杂交检测第85-87页
     ·转基因植株的DNA斑点杂交检测第87-88页
 2 结果与分析第88-95页
   ·pBC-cfl质粒的鉴定第88-89页
   ·CFL基因植物表达载体的构建第89-92页
   ·农杆菌介导的CFL转化大岩桐第92页
   ·再生植株的分子检测第92-95页
 3 讨论第95-97页
结束语与展望第97-100页
参考文献第100-119页
致谢第119-120页
附录: 在读博士学位期间主要科研业绩第120-121页

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