| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| ·土壤有效磷缺乏已严重影响作物生长发育 | 第10页 |
| ·发掘利用磷高效基因是解决作物磷素问题最新途径 | 第10-11页 |
| ·酸性磷酸酶对于提高土壤有机磷利用具有重要作用 | 第11-13页 |
| ·本研究目的意义 | 第13-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-33页 |
| ·试验材料 | 第14页 |
| ·供试品种 | 第14页 |
| ·试剂材料 | 第14页 |
| ·试验方法 | 第14-33页 |
| ·大豆幼苗培养与处理 | 第14页 |
| ·总RNA 提取与琼脂糖电泳检测 | 第14-15页 |
| ·合成cDNA 方法 | 第15-16页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 序列拼接 | 第16页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 开放阅读框PCR 扩增 | 第16-19页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 生物信息学分析 | 第19-20页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 不同品种表达分析 | 第20页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 原核表达 | 第20-23页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 酶活分析 | 第23-24页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 亚细胞定位 | 第24-27页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 超表达载体构建 | 第27-29页 |
| ·真核表达载体的农杆菌转化方法 | 第29页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第29页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 的遗传转化 | 第29-30页 |
| ·转GmPAP4 拟南芥的筛选 | 第30-31页 |
| ·转GmPAP4 拟南芥的鉴定 | 第31页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 功能分析 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 的克隆 | 第33-35页 |
| ·GmPAP4 和GmPAP14 拼接序列的获得 | 第33页 |
| ·大豆植株根系总RNA 提取与cDNA 合成 | 第33-34页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 的克隆 | 第34-35页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 的生物信息学分析 | 第35-40页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 的生物信息学分析 | 第35-37页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP14 生物信息学分析 | 第37-38页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 和GmPAP14 的同源性分析 | 第38-40页 |
| ·GmPAP4 在不同类型大豆品种中的差异表达分析 | 第40-41页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 原核表达与酶活测定 | 第41-44页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 原核表达载体构建 | 第41-42页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 的原核诱导表达 | 第42-43页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 酶活检测分析 | 第43-44页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 亚细胞定位分析 | 第44-45页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 融合表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 亚细胞定位分析 | 第45页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 超表达载体构建与功能分析 | 第45-49页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 超表达载体构建 | 第45页 |
| ·农杆菌转化拟南芥及阳性植株的获得 | 第45-46页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 的生物学功能分析 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·紫色酸性磷酸酶及其在植物磷素利用中的作用 | 第49页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 在细胞中的定位及其作用 | 第49-50页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 分解利用有机态磷的能力 | 第50页 |
| ·GmPAP4 在大豆磷高效与低效品种间的差异表达 | 第50-51页 |
| ·紫色酸性磷酸酶GmPAP4 生物学功能的后续研究 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
