| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·苯乳酸的简介 | 第11-14页 |
| ·苯乳酸的结构与性质 | 第11页 |
| ·苯乳酸的抑菌谱 | 第11-12页 |
| ·苯乳酸的安全性 | 第12页 |
| ·苯乳酸的化学合成 | 第12页 |
| ·苯乳酸的生物合成 | 第12-13页 |
| ·苯乳酸的应用 | 第13-14页 |
| ·乳酸脱氢酶的来源和研究现状 | 第14-16页 |
| ·乳酸脱氢酶简介 | 第14-15页 |
| ·乳酸脱氢酶的来源 | 第15-16页 |
| ·乳酸菌中对苯丙酮酸有活性的乳酸脱氢酶研究 | 第16页 |
| ·乳酸脱氢酶基因的研究进展 | 第16页 |
| ·乳酸脱氢酶的基因工程 | 第16-17页 |
| ·生物信息学 | 第17-18页 |
| ·本课题的研究意义及内容 | 第18-19页 |
| ·研究意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 副干酪乳杆菌乳酸脱氢酶的生物信息学分析 | 第19-26页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·结果 | 第20-24页 |
| ·Blast 的分析结果 | 第20页 |
| ·LDH 蛋白的理化性质 | 第20-21页 |
| ·ldh 翻译后的修饰位点、亚细胞定位的预测 | 第21页 |
| ·LDH 的拓扑结构和二级结构分析 | 第21页 |
| ·L.paracasei 的 LDH 的模拟三维结构 | 第21-22页 |
| ·副干酪乳杆菌 LDH 与其他物种 LDH 的比较和分子进化的构建 | 第22-24页 |
| ·小结 | 第24-26页 |
| 第三章 副干酪乳杆菌 ldh 基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第26-40页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·材料 | 第26-30页 |
| ·菌种与质粒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·工具酶 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-29页 |
| ·主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·乳酸脱氢酶基因引物的设计 | 第30页 |
| ·L.paracasei 基因组 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增 ldh 基因 | 第31-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·副干酪乳杆菌 ldh 基因的 PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·克隆载体 pMD19-ldh 的构建 | 第36-37页 |
| ·表达载体的构建 | 第37页 |
| ·重组乳酸脱氢酶的表达 | 第37-38页 |
| ·酶活力测定 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 第四章 重组乳酸脱氢酶的酶学性质研究 | 第40-49页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·仪器与试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·LDH 粗酶液的提取 | 第41页 |
| ·温度对 LDH 酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·温度对 LDH 稳定性的影响 | 第42页 |
| ·不同 pH 对 LDH 酶活性的影响 | 第42页 |
| ·不同金属离子对 LDH 酶活性的影响 | 第42页 |
| ·重组 LDH 酶的米氏常数 Km 的测定 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-47页 |
| ·温度对 LDH 酶活性的影响 | 第42-43页 |
| ·温度对 LDH 稳定性的影响 | 第43-44页 |
| ·不同 pH 对 LDH 酶活性的影响 | 第44页 |
| ·不同金属离子对 LDH 酶活性的影响 | 第44-45页 |
| ·重组 LDH 对 NADH 和苯丙酮酸的米氏常数 Km | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 总结与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 攻读学位论文期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
