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RNA干扰和合成小分子对大肠杆菌外排泵抑制作用研究

中文摘要第1-6页
abstract第6-10页
1.前言第10-31页
   ·外排泵与细菌耐药性研究进展第10-15页
     ·细菌耐药性机制第10-11页
     ·外排泵分类第11-13页
     ·RND多重药物外排泵第13-15页
   ·大肠杆菌AcrAB-TolC外排泵系统研究进展第15-21页
     ·外排系统AcrAB-TolC与大肠埃希氏菌多重耐药性的关系第15-16页
     ·大肠埃希氏菌外排系统AcrAB-TolC的组成及分子结构第16-21页
   ·RNAi分子机制和研究方法进展第21-27页
     ·RNAi的分子机制第22-25页
     ·RNAi研究方法进展第25-27页
   ·人工合成小分子抑制剂研究进展第27-29页
     ·干扰外排泵组装的外排泵抑制剂第27-28页
     ·阻断外排泵能量来源的外排泵抑制剂第28页
     ·阻碍底物通过外排泵通道的外排泵抑制剂第28页
     ·机制未知的外排泵抑制第28-29页
   ·本研究的前期工作基础第29页
   ·存在的问题第29-30页
   ·本研究的目的意义和创新点第30-31页
2.RNAi对大肠杆菌外排泵AcrA基因抑制作用研究第31-47页
   ·菌株第31页
   ·试剂和仪器第31-32页
   ·耐药菌株的临床筛选第32页
   ·菌株的人工诱导耐药性第32-33页
     ·细菌含量的标准曲线制作第32页
     ·诱导耐药第32-33页
   ·菌株3类抗生素耐药基因的PCR检测第33-34页
   ·菌株外排泵AcrA基因的PCR鉴定第34-35页
     ·引物设计第34-35页
     ·DNA模板制备第35页
     ·AcrA基因的扩增第35页
     ·PCR产物的电泳观察和目的基因的回收测序第35页
   ·siRNA的设计合成第35-36页
   ·siRNA对耐药菌株的抑制研究第36-38页
     ·实验设计原则第36页
     ·实验分组第36-37页
     ·实验方法第37-38页
   ·耐药菌株的临床筛选结果第38-39页
   ·人工诱导耐药菌株实验结果第39-41页
     ·细菌含量的标准曲线制作结果第39-40页
     ·质控大肠杆菌的诱导结果第40-41页
   ·菌株3类抗生素耐药基因的PCR检测结果第41-43页
   ·菌株AcrA基因的扩增结果第43页
   ·siRNA的设计合成结果第43-44页
   ·siRNA对耐药菌株的抑制研究结果第44-47页
3.合成小分子对大肠杆菌外排泵抑制作用研究第47-54页
   ·菌株第47页
   ·试剂和仪器第47页
   ·小分子化合物的设计与合成第47-48页
   ·菌株外排泵TolC基因的PCR检测第48页
   ·合成小分子对大肠杆菌外排泵TolC基因抑制作用研究第48-49页
   ·小分子化合物合成结果第49-51页
   ·菌株外排泵TolC基因的PCR检测结果第51页
   ·合成小分子对大肠杆菌外排泵TolC基因抑制作用结果第51-54页
4.讨论第54-58页
   ·实验菌株外排活性和耐药性第54-55页
   ·RNA干扰靶基因选择第55-56页
   ·RNA干扰策略和研究方法第56页
   ·小分子抑制剂对外排泵的影响第56-58页
5.结论第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63-64页
附录第64-71页
攻读硕士学位期间发表论文第71页

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