| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·C. glycerinogenes | 第9-10页 |
| ·C. glycerinogenes 菌株特性 | 第9页 |
| ·C. glycerinogenes 在分子生物学方面的研究现状 | 第9页 |
| ·C. glycerinogenes 生产其他重要化工原料的现状和前景 | 第9-10页 |
| ·酵母质粒 | 第10-13页 |
| ·酵母整合型质粒 | 第10-11页 |
| ·酵母复制型质粒 | 第11-12页 |
| ·酵母附加型质粒 | 第12页 |
| ·酵母着丝粒质粒 | 第12-13页 |
| ·报告基因 | 第13-14页 |
| ·荧光蛋白基因 | 第13页 |
| ·β半乳糖苷酶 | 第13-14页 |
| ·荧光素酶 | 第14页 |
| ·酵母转化子的抗药性选择标记 | 第14-15页 |
| ·腐草霉素 | 第14-15页 |
| ·铜 | 第15页 |
| ·G418 | 第15页 |
| ·潮霉素B | 第15页 |
| ·立题背景与意义 | 第15-16页 |
| ·本课题研究目的与内容 | 第16-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-25页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株、质粒及其培养条件 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·主要化学试剂(盒)及工具酶 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-25页 |
| ·酵母染色体DNA 的制备 | 第20页 |
| ·PCR 扩增及扩增产物的克隆 | 第20-21页 |
| ·序列测定 | 第21-22页 |
| ·质粒的提取、酶切及酶切产物去磷酸化 | 第22页 |
| ·C. glycerinogenes 对抗真菌药物的敏感性实验 | 第22页 |
| ·重组质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·E. coli 和C. glycerinogenes 的转化 | 第23页 |
| ·转化子稳定性分析 | 第23页 |
| ·蛋白分析 | 第23-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-39页 |
| ·载体pGAPZU 的构建和C. glycerinogenes 的电转化 | 第25页 |
| ·载体pGUGGA 的构建与C. glycerinogenes 电转化 | 第25-30页 |
| ·载体pGUGGA 的构建 | 第26页 |
| ·E. coli 中pGUGGA 质粒稳定性测定 | 第26页 |
| ·穿梭载体pGUGGA 的酵母转化和酵母转化子的验证 | 第26-28页 |
| ·酵母转化子的稳定性分析 | 第28-29页 |
| ·C. glycerinogenes 转化子的蛋白表达分析 | 第29-30页 |
| ·C. glycerinogenes 转化子筛选标记的选择 | 第30-32页 |
| ·测试药物的选择 | 第30-31页 |
| ·固体培养基中C. glycerinogenes 对抗真菌药物的敏感性 | 第31页 |
| ·液体YEPD 培养基中C. glycerinogenes 对Cu2+的敏感性 | 第31-32页 |
| ·载体pGUC 的构建与转化 | 第32-39页 |
| ·含S. cerevisiae CUP1 基因的pGUC 质粒的构建 | 第33页 |
| ·C. glycerinogenes 电转化和转化子验证 | 第33-35页 |
| ·酵母转化子对铜的敏感性实验 | 第35-36页 |
| ·含有pGUC 的酵母转化子的稳定性分析 | 第36-39页 |
| 结论和展望 | 第39-41页 |
| ·主要结论 | 第39页 |
| ·展望 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 附录A：附表 | 第47-48页 |
| 附录B：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
