| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 1 引言 | 第12-36页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行与危害 | 第12-21页 |
| ·病原学 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13-16页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第16-17页 |
| ·实验室诊断方法 | 第17-21页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的主要毒力因子研究进展 | 第21-30页 |
| ·外毒素 | 第21-25页 |
| ·外膜蛋白 | 第25-26页 |
| ·荚膜多糖 | 第26-27页 |
| ·脂多糖 | 第27-28页 |
| ·转铁结合蛋白 | 第28页 |
| ·菌毛 | 第28-30页 |
| ·其他毒力因子 | 第30页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎疫苗研究进展 | 第30-33页 |
| ·灭活疫苗 | 第30-31页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第31-32页 |
| ·Ghosts 疫苗 | 第32-33页 |
| ·DNA 免疫研究进展 | 第33-34页 |
| ·基因组表达文库构建及免疫研究进展 | 第34-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-50页 |
| ·质粒与菌株 | 第36页 |
| ·血清与二抗 | 第36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第36-40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| ·APP1 型72-1 株菌种的培养及其基因组DNA 的提取 | 第41页 |
| ·APP1 型72-1 株菌种的培养 | 第41页 |
| ·APP1 型72-1 株菌种基因组 DNA 的提取 | 第41页 |
| ·APP1 型72-1 株基因文库的构建及鉴定 | 第41-44页 |
| ·APP1 型72-1 株基因组 | 第41页 |
| ·APP1 型72-1 株基因文库质粒载体的构建 | 第41-42页 |
| ·APP1 型72-1 株基因文库的载体与片段的连接 | 第42页 |
| ·电击转化用感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·电击转化基因文库重组质粒 | 第42-43页 |
| ·基因文库重组质粒的双酶切鉴定 | 第43页 |
| ·基因文库重组质粒的 PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·基因文库重组质粒在 SP2/0 细胞中的瞬时表达 | 第44页 |
| ·小鼠免疫及攻毒 | 第44-47页 |
| ·表达文库重组质粒的大量提取 | 第44-46页 |
| ·基因文库 DNA 免疫动物分组及免疫接种 | 第46页 |
| ·基因文库DNA 免疫攻毒试验 | 第46页 |
| ·基因亚文库的动物分组及DNA 免疫接种 | 第46页 |
| ·基因亚文库实验动物攻毒 | 第46-47页 |
| ·攻毒小鼠肺脏荷菌量的测定 | 第47页 |
| ·血清特异性抗体检测 | 第47-48页 |
| ·包被抗原的提取 | 第47页 |
| ·间接ELISA 方法检测血清特异性抗体 | 第47-48页 |
| ·亚文库免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化试验 | 第48页 |
| ·攻毒小鼠肺脏病理变化 | 第48-49页 |
| ·攻毒小鼠肺组织间接免疫荧光试验 | 第49页 |
| ·统计分析 | 第49-50页 |
| 3 结果 | 第50-67页 |
| ·APP1 型72-1 株基因组电泳 | 第50页 |
| ·基因组酶切最佳条件 | 第50页 |
| ·PCDNA3.1 载体酶切 | 第50-51页 |
| ·基因表达文库重组质粒的鉴定 | 第51-52页 |
| ·基因表达文库重组质粒的双酶切鉴定 | 第51页 |
| ·基因表达文库重组质粒的PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组质粒在 SP2/0 细胞中的瞬时表达 | 第52页 |
| ·基因表达文库免疫实验结果 | 第52-57页 |
| ·间接ELISA 方法检测表达文库核酸免疫小鼠血清特异性抗体 | 第52-55页 |
| ·基因表达文库核酸免疫小鼠相对保护率 | 第55页 |
| ·基因表达文库核酸免疫小鼠攻毒肺脏组织病理学变化 | 第55-56页 |
| ·基因表达文库核酸免疫小鼠攻毒肺脏组织间接免疫荧光试验 | 第56-57页 |
| ·基因表达亚文库免疫实验结果 | 第57-67页 |
| ·小鼠攻毒后肺脏荷菌数 | 第57-58页 |
| ·基因表达亚文库核酸免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化试验 | 第58-61页 |
| ·间接ELISA 方法检测表达亚文库核酸免疫小鼠血清特异性抗体 | 第61-64页 |
| ·基因表达亚文库核酸免疫小鼠相对保护率 | 第64页 |
| ·基因表达亚文库核酸免疫小鼠攻毒肺脏组织病理学变化 | 第64-65页 |
| ·基因表达亚文库核酸免疫小鼠攻毒肺脏组织间接免疫荧光试验 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·关于重组质粒表达载体的选择 | 第67页 |
| ·关于基因组表达文库构建 | 第67-68页 |
| ·关于基因组表达文库免疫保护作用 | 第68-70页 |
| ·基因组表达文库方面 | 第68页 |
| ·基因组表达亚文库方面 | 第68-70页 |
| 5. 结论 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-88页 |
| 附录 | 第88-94页 |
| 作者简介 | 第94页 |
