| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 缩写、术语表 | 第14-16页 |
| 目次 | 第16-21页 |
| 引言 | 第21-24页 |
| 第一章 聚乙烯亚胺-胆固醇的合成及表征 | 第24-36页 |
| 1 材料与仪器 | 第24-25页 |
| ·材料和试剂 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-28页 |
| ·聚乙烯亚胺-胆固醇(PEI 800-Chol)的合成 | 第25-26页 |
| ·核磁共振波谱(~1H-NMR)检测 | 第26页 |
| ·红外光谱检测 | 第26-27页 |
| ·临界胶团浓度(CMC)测定 | 第27页 |
| ·细胞毒性试验 | 第27-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-35页 |
| ·~1H-NMR 检测结果 | 第28-30页 |
| ·红外光谱检测结果 | 第30-31页 |
| ·临界胶团浓度 | 第31-32页 |
| ·细胞毒性试验 | 第32-35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 第二章 聚阳离子脂质体的制备、细胞摄取和体外转染 | 第36-63页 |
| 1 材料与仪器 | 第36-37页 |
| ·材料和试剂 | 第36-37页 |
| ·细胞 | 第37页 |
| ·质粒 | 第37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-42页 |
| ·聚阳离子脂质体(PCLs)和脂质体的制备 | 第37-38页 |
| ·PCLs 和脂质体的形态观察 | 第38页 |
| ·PCLs 缓冲能力的测定 | 第38页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·PCLs/DNA 复合物的制备 | 第39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
| ·粒径和电位测定 | 第40页 |
| ·PCLs 体外细胞毒性实验 | 第40-41页 |
| ·PCLs 的细胞摄取研究 | 第41页 |
| ·PCLs 体外细胞转染 | 第41-42页 |
| 3 结果与讨论 | 第42-61页 |
| ·脂质体和 PCLs 的形态观察 | 第42-44页 |
| ·PCLs 缓冲能力的测定 | 第44-45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第45-47页 |
| ·PCLs/DNA 复合物的粒径和电位 | 第47-48页 |
| ·细胞毒性试验 | 第48-51页 |
| ·PCLs-S 对 HeLa 细胞摄取 ODN 的影响 | 第51-53页 |
| ·体外细胞转染及血清对转染的影响 | 第53-60页 |
| ·DOPE 对 PCLs 转染的影响 | 第60-61页 |
| 4 小结 | 第61-63页 |
| 第三章 聚阳离子脂质体摄取机制及摄取动力学的初步研究 | 第63-73页 |
| 1 材料与仪器 | 第63-65页 |
| ·材料和试剂 | 第63-64页 |
| ·细胞 | 第64页 |
| ·质粒 | 第64页 |
| ·仪器 | 第64-65页 |
| 2 实验方法 | 第65-66页 |
| ·氯丙嗪对聚阳离子脂质体摄取的影响 | 第65页 |
| ·氯丙嗪及低温对聚阳离子脂质体转染效率的影响 | 第65-66页 |
| ·聚阳离子脂质体细胞摄取动力学 | 第66页 |
| 3 结果与讨论 | 第66-72页 |
| ·氯丙嗪对阳离子脂质体摄取的影响 | 第66-68页 |
| ·氯丙嗪及低温对聚阳离子脂质体转染效率的影响 | 第68-70页 |
| ·聚阳离子脂质体细胞摄取动力学 | 第70-72页 |
| 4 小结 | 第72-73页 |
| 第四章 反义寡核苷酸端粒酶抑制剂载体的研究 | 第73-84页 |
| 1 材料与仪器 | 第73-74页 |
| ·材料和试剂 | 第73-74页 |
| ·细胞 | 第74页 |
| ·仪器 | 第74页 |
| 2 实验方法 | 第74-76页 |
| ·CLs 和 CLs/ASODN 复合物的制备 | 第74-75页 |
| ·CLs 外观形态考察和粒径测定 | 第75页 |
| ·ASODN 对 HeLa 细胞的抑制作用 | 第75页 |
| ·CLs/ASODN 复合物对 HeLa 细胞的抑制作用 | 第75-76页 |
| ·PCLs 作为端粒酶抑制剂载体的研究 | 第76页 |
| 3 结果与讨论 | 第76-83页 |
| ·CLs 的外观形态和粒径分布 | 第76页 |
| ·ASODN 和 CLs/ASODN 复合物对 HeLa 细胞的抑制作用 | 第76-78页 |
| ·CLs/ASODN 复合物对 HeLa 细胞的持续抑制作用 | 第78-80页 |
| ·PCLs 作为端粒酶抑制剂载体的研究 | 第80-83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第五章 聚阳离子脂质体-鱼精蛋白-DNA 复合载体的制备及体外转染 | 第84-104页 |
| 1 材料与仪器 | 第84-86页 |
| ·材料和试剂 | 第84-85页 |
| ·细胞 | 第85页 |
| ·质粒 | 第85页 |
| ·仪器 | 第85-86页 |
| 2 实验方法 | 第86-89页 |
| ·鱼精蛋白/DNA 纳米粒的制备 | 第86页 |
| ·纳米粒凝胶阻滞电泳和平均粒径测定 | 第86页 |
| ·聚阳离子脂质体-鱼精蛋白-DNA 复合载体的制备 | 第86-87页 |
| ·复合载体的体外转染 | 第87-88页 |
| ·鱼精蛋白在不同细胞株中对 PCLs-D 转染效率的影响 | 第88页 |
| ·不同阳离子聚合物对 PCLs-D 转染效率的影响 | 第88页 |
| ·鱼精蛋白介导 DNA 细胞核靶向 | 第88-89页 |
| ·基因表达量随时间变化的研究 | 第89页 |
| 3 结果与讨论 | 第89-102页 |
| ·纳米粒凝胶阻滞电泳和粒径 | 第89-91页 |
| ·聚阳离子脂质体-鱼精蛋白-DNA 复合载体 | 第91-93页 |
| ·复合载体的体外细胞转染 | 第93-94页 |
| ·鱼精蛋白在不同细胞株中对 PCLs-D 转染效率的影响 | 第94-95页 |
| ·不同阳离子聚合物对 PCLs-D 转染效率的影响 | 第95-99页 |
| ·鱼精蛋白介导 DNA 细胞核靶向 | 第99-101页 |
| ·基因表达量随时间变化的研究 | 第101-102页 |
| 4 小结 | 第102-104页 |
| 第六章 聚阳离子脂质体及复合载体介导白介素-12质粒的抗肿瘤实验研究 | 第104-114页 |
| 1 材料与仪器 | 第104-105页 |
| ·材料和试剂 | 第104-105页 |
| ·细胞 | 第105页 |
| ·质粒 | 第105页 |
| ·动物 | 第105页 |
| ·仪器 | 第105页 |
| 2 实验方法 | 第105-107页 |
| ·ICR 小鼠肿瘤造模 | 第105-106页 |
| ·pCMV-IL-12的抗肿瘤研究 | 第106页 |
| ·聚阳离子脂质体及复合载体介导 pCMV-IL-12 的抗肿瘤研究 | 第106页 |
| ·ELISA 测定荷瘤小鼠外周血中 IFN-γ水平 | 第106-107页 |
| 3 结果与讨论 | 第107-112页 |
| ·pCMV-IL-12的抗肿瘤作用 | 第107-108页 |
| ·聚阳离子脂质体及复合载体介导 pCMV-IL-12的抗肿瘤作用 | 第108-112页 |
| ·荷瘤小鼠外周血中 IFN-γ水平 | 第112页 |
| 4 小结 | 第112-114页 |
| 全文总结 | 第114-117页 |
| 参考文献 | 第117-132页 |
| 综述 | 第132-148页 |
| 作者简历 | 第148-149页 |
