提要 | 第1-7页 |
英文缩写词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-39页 |
·细胞死亡的概述 | 第10-13页 |
·自噬性细胞程序性死亡研究进展 | 第13-20页 |
·自噬的形态学特点及分类 | 第13-15页 |
·自噬发生过程的分子机制 | 第15-18页 |
·自噬过程的信号调控 | 第18-20页 |
·自噬与凋亡的关系 | 第20-27页 |
·凋亡概述 | 第20-21页 |
·凋亡的多重机制 | 第21-22页 |
·自噬与凋亡 | 第22-27页 |
·维生素K3 与细胞损伤 | 第27页 |
·自噬在生理和病理过程中的作用 | 第27-36页 |
·生理过程中的自噬 | 第27-28页 |
·病理过程中的自噬 | 第28-36页 |
·自噬的监测与研究方法 | 第36-39页 |
·形态学方法 | 第36-37页 |
·自噬的特异标志物和抑制剂 | 第37-39页 |
第2章 实验材料和方法 | 第39-52页 |
·实验材料 | 第39-41页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·质粒 | 第39-40页 |
·细胞株 | 第40页 |
·主要试剂的配制 | 第40页 |
·Western blot 相关试剂 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-52页 |
·pSilencer~(TM) 3.1-H1 neo-Beclin 1 siRNA 载体构建 | 第41-44页 |
·细胞培养 | 第44-45页 |
·重组质粒转染及沉默效应检测 | 第45页 |
·细胞生长抑制试验MTT 法 | 第45-46页 |
·RT-PCR 半定量分析 | 第46-48页 |
·Western blot 分析蛋白表达 | 第48-50页 |
·流式细胞术(FCM)PI 染色法检测细胞凋亡率 | 第50-51页 |
·MDC 染色检测自噬 | 第51页 |
·Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡 | 第51页 |
·统计学处理 | 第51-52页 |
第3章 结果 | 第52-68页 |
·维生素K3 诱导人肝癌细胞SMMC-7721 损伤的作用 | 第52-56页 |
·不同浓度VK_3 对SMMC-7721 细胞增殖的影响 | 第52-54页 |
·RT-PCR 检测SMMC-7721 细胞Bcl-2 及Bax m RNA 表达 | 第54-55页 |
·Western blot 检测SMMC-7721 细胞Bcl-2 及Bax 蛋白表达 | 第55-56页 |
·pSilencer~(TM) 3.1-H1 neo-Beclin 1 siRNA 表达载体的构建及其沉默效应 | 第56-62页 |
·pSH1Si-Beclin 1 表达载体的构建 | 第56-60页 |
·pSH1Si-Beclin 1 表达质粒转染及筛选 | 第60页 |
·PCR 检测 pSH1Si-Beclin 1 质粒转染后 Beclin 1 mRNA 的表达 | 第60-61页 |
·Western blot 检测 pSH1Si-Beclin 1 质粒转染后 Beclin 1 蛋白表达 | 第61-62页 |
·Beclin 1 沉默对维生素K_3 诱导的SMMC-7721 细胞损伤的影响 | 第62-68页 |
·PCR 检测VK_3 诱导细胞损伤中Beclin 1 m RNA 表达的变化 | 第62-63页 |
·MDC 染色检测细胞自噬活性变化 | 第63-65页 |
·Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡 | 第65-66页 |
·FCM 检测PI 染色细胞凋亡率 | 第66-68页 |
第4章 讨论 | 第68-76页 |
第5章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
攻读博士期间发表的文章 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
中文摘要 | 第89-92页 |
Abstract | 第92-95页 |