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Beclin 1沉默对维生素K3诱导的人肝癌细胞损伤的影响

提要第1-7页
英文缩写词表第7-9页
前言第9-10页
第1章 文献综述第10-39页
   ·细胞死亡的概述第10-13页
   ·自噬性细胞程序性死亡研究进展第13-20页
     ·自噬的形态学特点及分类第13-15页
     ·自噬发生过程的分子机制第15-18页
     ·自噬过程的信号调控第18-20页
   ·自噬与凋亡的关系第20-27页
     ·凋亡概述第20-21页
     ·凋亡的多重机制第21-22页
     ·自噬与凋亡第22-27页
     ·维生素K3 与细胞损伤第27页
   ·自噬在生理和病理过程中的作用第27-36页
     ·生理过程中的自噬第27-28页
     ·病理过程中的自噬第28-36页
   ·自噬的监测与研究方法第36-39页
     ·形态学方法第36-37页
     ·自噬的特异标志物和抑制剂第37-39页
第2章 实验材料和方法第39-52页
   ·实验材料第39-41页
     ·主要仪器第39页
     ·主要试剂第39页
     ·质粒第39-40页
     ·细胞株第40页
     ·主要试剂的配制第40页
     ·Western blot 相关试剂第40-41页
   ·实验方法第41-52页
     ·pSilencer~(TM) 3.1-H1 neo-Beclin 1 siRNA 载体构建第41-44页
     ·细胞培养第44-45页
     ·重组质粒转染及沉默效应检测第45页
     ·细胞生长抑制试验MTT 法第45-46页
     ·RT-PCR 半定量分析第46-48页
     ·Western blot 分析蛋白表达第48-50页
     ·流式细胞术(FCM)PI 染色法检测细胞凋亡率第50-51页
     ·MDC 染色检测自噬第51页
     ·Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡第51页
     ·统计学处理第51-52页
第3章 结果第52-68页
   ·维生素K3 诱导人肝癌细胞SMMC-7721 损伤的作用第52-56页
     ·不同浓度VK_3 对SMMC-7721 细胞增殖的影响第52-54页
     ·RT-PCR 检测SMMC-7721 细胞Bcl-2 及Bax m RNA 表达第54-55页
     ·Western blot 检测SMMC-7721 细胞Bcl-2 及Bax 蛋白表达第55-56页
   ·pSilencer~(TM) 3.1-H1 neo-Beclin 1 siRNA 表达载体的构建及其沉默效应第56-62页
     ·pSH1Si-Beclin 1 表达载体的构建第56-60页
     ·pSH1Si-Beclin 1 表达质粒转染及筛选第60页
     ·PCR 检测 pSH1Si-Beclin 1 质粒转染后 Beclin 1 mRNA 的表达第60-61页
     ·Western blot 检测 pSH1Si-Beclin 1 质粒转染后 Beclin 1 蛋白表达第61-62页
   ·Beclin 1 沉默对维生素K_3 诱导的SMMC-7721 细胞损伤的影响第62-68页
     ·PCR 检测VK_3 诱导细胞损伤中Beclin 1 m RNA 表达的变化第62-63页
     ·MDC 染色检测细胞自噬活性变化第63-65页
     ·Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡第65-66页
     ·FCM 检测PI 染色细胞凋亡率第66-68页
第4章 讨论第68-76页
第5章 结论第76-77页
参考文献第77-87页
攻读博士期间发表的文章第87-88页
致谢第88-89页
中文摘要第89-92页
Abstract第92-95页

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