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Src磷酸化参与低剂量铅暴露致大脑屏障损伤及其转运的机制研究

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-10页
英文摘要第10-13页
前言第14-15页
文献回顾第15-51页
实验一 Src参与铅破坏BBB/BCB紧密连接的机制第51-82页
    1 材料第51-60页
        1.1 细胞系第51页
        1.2 试剂第51-54页
        1.3 主要仪器第54-55页
        1.4 主要试剂配置第55-60页
    2 方法第60-69页
        2.1 RBE4/ Z310细胞的培养第60-61页
        2.2 Western blot检测蛋白的表达水平第61-63页
        2.3 qRT-PCR检测GRP78的mRNA水平第63-65页
        2.4 siRNA转染第65-66页
        2.5 免疫细胞化学第66-67页
        2.6 免疫电镜第67-68页
        2.7 细胞膜表面蛋白的检测第68-69页
        2.8 统计学分析第69页
    3 结果第69-79页
        3.1 铅暴露对Src蛋白磷酸化的影响第69-71页
        3.2 Src磷酸化参与铅致TJPs水平的下调第71-72页
        3.3 铅暴露对GRP78表达的影响第72-73页
        3.4 GRP78参与铅激活Src磷酸化第73-74页
        3.5 Src磷酸化未调节GRP78的表达水平第74-75页
        3.6 铅暴露通过上调GRP78降低occludin第75-76页
        3.7 铅引起GRP78分布的改变第76页
        3.8 铅引起GRP78亚细胞定位的改变第76-77页
        3.9 铅引起膜表面GRP78的表达第77-78页
        3.10 细胞膜表面GRP78可能与Src的激活无关第78-79页
    4 讨论第79-82页
实验二 Cx43在BBB/BCB铅转运中的作用及Src对其表达的调控研究第82-106页
    1 材料第82-85页
        1.1 细胞系第82页
        1.2 试剂第82-83页
        1.3 主要仪器第83-84页
        1.4 主要试剂配置第84-85页
    2 方法第85-92页
        2.1 RBE4/Z310细胞的培养第85页
        2.2 AAS法检测细胞铅含量第85页
        2.3 免疫细胞化学鉴定Cx43的表达与分布第85-86页
        2.4 Western blot检测蛋白的表达水平第86页
        2.5 Cx43半孔道功能检测实验第86-87页
        2.6 细菌转化与质粒提取第87页
        2.7 DNA转染第87页
        2.8 qRT-PCR检测Cx43的mRNA水平第87-89页
        2.9 四环素调控Cx43可诱导表达细胞系的构建第89-92页
        2.10 统计学分析第92页
    3 结果第92-103页
        3.1 铅蓄积的时间-剂量效应第92-93页
        3.2 Cx43表达与分布第93-94页
        3.3 铅暴露引起Cx43表达的改变第94-96页
        3.4 Cx43半孔道的激活与细胞铅吸收呈正相关第96-97页
        3.5 Cx43半孔道可能具有铅转运的功能第97-99页
        3.6 iZCx43与铅吸收第99-101页
        3.7 Src磷酸化正向调控Cx43第101-102页
        3.8 Src磷酸化与铅吸收的关系第102-103页
    4 讨论第103-106页
小结第106-108页
参考文献第108-129页
个人简历和研究成果第129-131页
致谢第131-132页

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