首页--生物科学论文--植物学论文--植物细胞遗传学论文--植物基因工程论文

烟草核基质结合序列在转基因遗传稳定性中的功能及机理分析

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
1 引言第14-39页
   ·植物转基因技术现状第14-15页
   ·核基质结合序列(MARs)第15-29页
     ·核基质结合序列(MARs)的发现第15-16页
     ·核基质结合序列(MARs)的分离与鉴定第16-17页
     ·核基质结合序列(MARs)的结构特征第17-18页
     ·核基质结合序列(MARs)的分类第18-19页
     ·核基质结合序列(MARs)对外源基因的影响第19-22页
       ·核基质结合序列(MARs)对外源基因表达的影响第19-20页
       ·核基质结合序列(MARs)对外源基因沉默的影响第20-21页
       ·核基质结合序列(MARs)对外源基因转化频率的影响..第21-22页
     ·核基质结合序列(MARs)的结合蛋白(MARs binding protei第22-26页
     ·核基质结合序列(MARs)作用的分子机理第26-29页
       ·核基质结合序列(MARs)的Loop 环模型第26-28页
       ·核基质结合序列(MARs)序列作用的其它模型第28-29页
   ·DNA 甲基化与去甲基化的分子生物学研究进展第29-38页
     ·DNA 甲基化第29-30页
     ·DNA 甲基化机制第30-34页
     ·植物DNA 甲基化的生物学功能第34-37页
       ·DNA 甲基化与植物生长发育第34-35页
       ·DNA 甲基化可调节植物基因的表达第35-36页
       ·基因组防御第36页
       ·DNA 甲基化与转基因植株的基因沉默第36-37页
     ·DNA 去甲基化第37-38页
   ·研究目的与意义第38-39页
2 材料与方法第39-55页
   ·实验材料第39-41页
     ·植物材料第39页
     ·菌株与质粒第39页
     ·酶与各种生化试剂第39-40页
     ·实验用的引物第40-41页
   ·实验方法第41-55页
     ·植物表达载体的构建第41-45页
       ·烟草和拟南芥基因组DNA 的提取(小量法)第41页
       ·烟草TM6 MAR 序列的扩增第41-42页
       ·凝胶电泳中DNA 片段的回收第42页
       ·DNA 片段与克隆载体的连接第42-43页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第43页
       ·大肠杆菌细胞的转化第43页
       ·克隆载体的酶切鉴定第43-44页
       ·质粒DNA 的提取第44-45页
       ·烟草TM6 全长表达载体的构建第45页
     ·植物表达载体的转化第45-48页
       ·根癌农杆菌LBA4404、GV3101 感受态细胞的制备第45-46页
       ·冻融法转化农杆菌第46页
       ·农杆菌的培养第46页
       ·农杆菌介导的烟草的转化第46-47页
       ·农杆菌介导的拟南芥转化第47-48页
       ·转基因烟草和拟南芥PCR 检测第48页
     ·转基因植物的GUS 表达分析第48-51页
       ·转基因烟草植株GUS 组织化学染色分析第48-49页
       ·转基因植物GUS 基因表达的定量分析第49-51页
     ·重亚硫酸盐测序法第51-54页
       ·基因组DNA 的重亚硫酸氢钠化学修饰第51-53页
       ·引物设计及PCR 扩增第53-54页
     ·DNaseI 酶解处理与PCR 扩增第54-55页
3 结果与分析第55-68页
   ·TM6 对转基因后代遗传稳定性的影响第55-60页
     ·烟草表达载体的构建第55页
     ·转基因烟草植株的获得第55-56页
     ·T_0 转基因烟草植株的GUS 活性分析第56-57页
     ·BC_1 代烟草植株的获得第57页
     ·BC_1 代烟草植株的组织化学染色分析第57-60页
   ·TM6 对启动子区域DNA 甲基化的影响第60-68页
     ·TM6 侧翼启动子区对DNaseI 敏感性分析第60-61页
     ·重亚硫酸盐测序法对启动子区域DNA 甲基化的分析第61-68页
       ·TM6 对35S-GUS 区域DNA 甲基化的影响第61-63页
       ·TM6 对NOS 启动子区域DNA 甲基化的影响第63-68页
3. TM6 序列在转基因拟南芥中对外源基因表达的影响第68-71页
   ·拟南芥转化载体的构建第68-69页
   ·转基因拟南芥植株的获得、鉴定以及纯合体的获得第69页
   ·转基因拟南芥GUS 活性的测定第69-71页
4. 讨论第71-75页
   ·TM6 能减少转基因沉默的发生,增强外源基因在转基因后代中的遗传稳定性第71-73页
   ·TM6 在拟南芥中也能提高外源基因表达第73-74页
   ·TM6 的作用依赖于启动子类型,但不能改变启动子的作用模式第74页
   ·研究设想第74-75页
5 结论第75-76页
参考文献第76-92页
附录第92-97页
致谢第97-98页
入学以来已发表的论文及成果第98页

论文共98页,点击 下载论文
上一篇:类黄酮物质对精氨酸激酶和α-葡萄糖苷酶抑制机理及分子对接研究
下一篇:利用定点突变技术对植酸酶中二硫键功能的研究