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大豆胞囊线虫环境适应性的研究

中文摘要第1-18页
英文摘要第18-21页
前言第21-23页
第一章 大豆胞囊线虫的环境适应性及热激蛋白的研究进展第23-55页
   ·大豆胞囊线虫的环境适应性第24-41页
     ·土壤温度第24-28页
     ·土壤湿度(含水量)第28-30页
     ·土壤类型(矿质成分)第30-31页
     ·pH值(酸碱度)第31-32页
     ·离子、化合物及渗透压第32-35页
     ·植物根系分泌物第35-37页
     ·农用化学品第37-38页
     ·线虫对逆境的适应性第38-41页
   ·热激蛋白第41-53页
     ·热激蛋白的发现及研究历史第42-43页
     ·热激蛋白的分类及特点第43-45页
     ·热激蛋白的生物学功能第45-48页
     ·热激蛋白的表达调控第48-49页
     ·植物寄生线虫热激蛋白第49-50页
     ·热激蛋白与环境适应性第50-52页
     ·热激蛋白与进化第52-53页
   ·展望第53-55页
第二章 化合物对大豆胞囊线虫存活、孵化和繁殖的影响第55-67页
   ·材料与方法第55-57页
     ·供试药品第55-56页
     ·大豆胞囊线虫的培养第56页
     ·化合物对SCN J2存活的影响第56页
     ·化合物对SCN卵孵化的影响第56页
     ·化合物对大豆种子的影响第56-57页
     ·温室盆栽试验第57页
     ·田间试验第57页
     ·数据分析第57页
   ·结果与分析第57-64页
     ·不同化合物对SCN J2存活的影响第57-61页
     ·不同化合物对SCN卵孵化的影响第61页
     ·SCN J2敏感化合物对大豆种子萌发和根生长的影响第61-62页
     ·温室盆栽条件下SCN J2敏感化合物对SCN繁殖的影响第62-63页
     ·SCN J2敏感化合物对大田SCN繁殖的影响第63-64页
     ·SCN J2敏感化合物对大豆地下部分生长的影响第64页
   ·结论与讨论第64-67页
第三章 除草剂对大豆胞囊线虫存活、孵化和繁殖的影响第67-75页
   ·材料与方法第67-69页
     ·供试除草剂第67-68页
     ·大豆胞囊线虫的培养第68页
     ·除草剂对SCN J2存活的影响第68页
     ·除草剂对SCN卵孵化的影响第68页
     ·除草剂对大豆种子的处理第68-69页
     ·温室盆栽试验及大田试验第69页
   ·结果与分析第69-73页
     ·除草剂对SCN J2存活的影响第69-70页
     ·除草剂对SCN卵孵化试验第70-71页
     ·除草剂对大豆种子萌发的影响第71-72页
     ·乙草胺和2,4-滴丁酯+异丙草胺对温室和田间SCN繁殖的影响第72页
     ·乙草胺和2,4-滴丁酯+异丙草胺对苗期大豆根系生长的影响第72-73页
   ·结论与讨论第73-75页
第四章 相关逆境因子对大豆胞囊线虫的影响第75-90页
   ·材料与方法第75-78页
     ·供试药品第75页
     ·溶液配制第75-76页
     ·仪器设备第76页
     ·大豆胞囊线虫的培养第76页
     ·SCN J2对不同pH值的适应性第76页
     ·不同pH值条件对SCN休眠卵孵化的影响第76页
     ·SCN对逆境温度的适应性第76-77页
     ·J2体内海藻糖变化与SCN耐冷耐热性关系的分析第77-78页
     ·温度对SCN卵孵化的影响第78页
     ·光照对SCN孵化的影响第78页
     ·土壤含水量对SCN孵化的影响第78页
   ·结果与分析第78-88页
     ·SCN J2对不同pH值的适应性第78-79页
     ·不同pH值条件对SCN休眠卵孵化的影响第79-83页
     ·SCN对逆境温度的适应性第83-85页
     ·海藻糖与SCN耐高低温关系的分析第85-86页
     ·温度对SCN卵孵化的影响第86页
     ·光照对SCN孵化的影响第86-87页
     ·土壤含水量对SCN孵化的影响第87-88页
   ·结论与讨论第88-90页
     ·结论第88页
     ·讨论第88-90页
第五章 大豆胞囊线虫热激蛋白基因(Hsp70,Hsp90)的克隆第90-130页
   ·材料与方法第90-105页
     ·供试材料第90页
     ·主要试剂第90-91页
     ·培养基配制第91页
     ·常用溶液的配制第91页
     ·基因组DNA的提取第91-92页
     ·ITS rDNA片段的扩增第92-93页
     ·SCN Hsp70基因(Hg-Hsp-70)的扩增第93-100页
     ·SCN Hsp90基因(Hg-Hsp-90)的扩增第100-101页
     ·DNA片段的回收:第101页
     ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备:第101-102页
     ·回收片段的连接和转化第102页
     ·重组质粒的鉴定第102-105页
     ·基因序列的测定与分析第105页
   ·结果与分析第105-126页
     ·不同方法提取SCN基因组总DNA比较第105-108页
     ·SCN Hsp70基因(Hg-Hsp-7D)的克隆第108-117页
     ·Hg-Hsp-70基因序列分析第117-120页
     ·SCN Hsp90基因(Hg-Hsp-90)的克隆第120-126页
     ·Hg-Hsp-90基因序列分析第126页
   ·结论与讨论第126-130页
     ·结论第126-127页
     ·讨论第127-130页
第六章 大豆胞囊线虫热激蛋白(Hsp70,Hsp90)的原核表达第130-157页
   ·材料与方法第130-142页
     ·仪器设备第130页
     ·菌种及质粒第130-131页
     ·试剂及试剂盒第131页
     ·常用溶液的配制第131-132页
     ·SCN Hsp70、Hsp90原核表达载体的构建第132-139页
     ·测序及序列分析第139页
     ·SCN Hsp70和Hsp90的表达第139-140页
     ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测第140-141页
     ·表达产物的Western Blot分析第141-142页
   ·结果与分析第142-154页
     ·载体pEASY-Hsp70构建结果第142-144页
     ·载体pEASY-Hsp90构建结果第144-146页
     ·载体pET30-Hsp70构建结果第146-149页
     ·pEASY-Hsp70、pET30-Hsp70、pEASY-Hsp90转化受体细菌转化子的筛选第149页
     ·Hsp70和Hsp90的表达第149-151页
     ·IPTG浓度对Hsp70、Hsp90融合蛋白表达量的影响第151-152页
     ·诱导时间对Hsp70、Hsp90融合蛋白表达量的影响第152-153页
     ·表达产物的Western blot分析第153-154页
   ·结论与讨论第154-157页
     ·结论第154页
     ·讨论第154-157页
第七章 热激蛋白(Hsp)及海藻糖与大豆胞囊线虫耐胁迫关系的分析第157-172页
   ·材料与方法第157-161页
     ·供试药品与试剂第157-158页
     ·大豆胞囊线虫(SCN)的繁殖第158页
     ·SCN的处理第158页
     ·线虫的观察方法第158页
     ·RNA的提取第158-159页
     ·cDNA的合成第159页
     ·引物设计第159-160页
     ·RT-PCR第160-161页
     ·PCR产物的半定量分析第161页
     ·海藻糖的提取和测定第161页
     ·海藻糖酶的提取和测定第161页
   ·结果与分析第161-169页
     ·逆境胁迫后SCN J2虫态的变化第161-163页
     ·逆境胁迫对Hg-Hsp-70和Hg-Hsp-70基因表达的影响第163-167页
     ·化学胁迫对SCN体内海藻糖含量和海藻糖酶活性的影响第167-169页
   ·结论与讨论第169-172页
     ·结论第169页
     ·讨论第169-172页
第八章 休眠期大豆胞囊线虫体内生理生化代谢特征第172-205页
   ·材料与方法第173-185页
     ·供试线虫第173页
     ·糖类测定第173-175页
     ·甘油测定第175页
     ·可溶性蛋白质含量测定第175-176页
     ·氨基酸测定第176-177页
     ·全蛋白分析第177-179页
     ·同工酶电泳第179-181页
     ·酶活性测定第181-184页
     ·主要实验仪器第184-185页
   ·结果与分析第185-200页
     ·SCN休眠期体内糖类物质含量的变化第185-187页
     ·SCN休眠期体内甘油含量的变化第187页
     ·SCN休眠期体内可溶性蛋白质含量的变化第187-188页
     ·休眠期各阶段SCN体内各类物质含量第188-189页
     ·SCN休眠期体内氨基酸含量的变化第189-194页
     ·SCN休眠前后全蛋白质SDS-PAGE电泳分析第194-195页
     ·SCN休眠前后同工酶电泳分析第195-196页
     ·SCN休眠期体内海藻糖酶、PFK、PK、FBP、Gpase和NAD-SDH活性变化第196-200页
   ·结论与讨论第200-205页
     ·结论第200-201页
     ·讨论第201-205页
第九章 结论与展望第205-208页
参考文献第208-223页
附录第223-240页
致谢第240-242页
攻读博士学位期间发表论文情况第242页

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