中文摘要 | 第1-18页 |
英文摘要 | 第18-21页 |
前言 | 第21-23页 |
第一章 大豆胞囊线虫的环境适应性及热激蛋白的研究进展 | 第23-55页 |
·大豆胞囊线虫的环境适应性 | 第24-41页 |
·土壤温度 | 第24-28页 |
·土壤湿度(含水量) | 第28-30页 |
·土壤类型(矿质成分) | 第30-31页 |
·pH值(酸碱度) | 第31-32页 |
·离子、化合物及渗透压 | 第32-35页 |
·植物根系分泌物 | 第35-37页 |
·农用化学品 | 第37-38页 |
·线虫对逆境的适应性 | 第38-41页 |
·热激蛋白 | 第41-53页 |
·热激蛋白的发现及研究历史 | 第42-43页 |
·热激蛋白的分类及特点 | 第43-45页 |
·热激蛋白的生物学功能 | 第45-48页 |
·热激蛋白的表达调控 | 第48-49页 |
·植物寄生线虫热激蛋白 | 第49-50页 |
·热激蛋白与环境适应性 | 第50-52页 |
·热激蛋白与进化 | 第52-53页 |
·展望 | 第53-55页 |
第二章 化合物对大豆胞囊线虫存活、孵化和繁殖的影响 | 第55-67页 |
·材料与方法 | 第55-57页 |
·供试药品 | 第55-56页 |
·大豆胞囊线虫的培养 | 第56页 |
·化合物对SCN J2存活的影响 | 第56页 |
·化合物对SCN卵孵化的影响 | 第56页 |
·化合物对大豆种子的影响 | 第56-57页 |
·温室盆栽试验 | 第57页 |
·田间试验 | 第57页 |
·数据分析 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-64页 |
·不同化合物对SCN J2存活的影响 | 第57-61页 |
·不同化合物对SCN卵孵化的影响 | 第61页 |
·SCN J2敏感化合物对大豆种子萌发和根生长的影响 | 第61-62页 |
·温室盆栽条件下SCN J2敏感化合物对SCN繁殖的影响 | 第62-63页 |
·SCN J2敏感化合物对大田SCN繁殖的影响 | 第63-64页 |
·SCN J2敏感化合物对大豆地下部分生长的影响 | 第64页 |
·结论与讨论 | 第64-67页 |
第三章 除草剂对大豆胞囊线虫存活、孵化和繁殖的影响 | 第67-75页 |
·材料与方法 | 第67-69页 |
·供试除草剂 | 第67-68页 |
·大豆胞囊线虫的培养 | 第68页 |
·除草剂对SCN J2存活的影响 | 第68页 |
·除草剂对SCN卵孵化的影响 | 第68页 |
·除草剂对大豆种子的处理 | 第68-69页 |
·温室盆栽试验及大田试验 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-73页 |
·除草剂对SCN J2存活的影响 | 第69-70页 |
·除草剂对SCN卵孵化试验 | 第70-71页 |
·除草剂对大豆种子萌发的影响 | 第71-72页 |
·乙草胺和2,4-滴丁酯+异丙草胺对温室和田间SCN繁殖的影响 | 第72页 |
·乙草胺和2,4-滴丁酯+异丙草胺对苗期大豆根系生长的影响 | 第72-73页 |
·结论与讨论 | 第73-75页 |
第四章 相关逆境因子对大豆胞囊线虫的影响 | 第75-90页 |
·材料与方法 | 第75-78页 |
·供试药品 | 第75页 |
·溶液配制 | 第75-76页 |
·仪器设备 | 第76页 |
·大豆胞囊线虫的培养 | 第76页 |
·SCN J2对不同pH值的适应性 | 第76页 |
·不同pH值条件对SCN休眠卵孵化的影响 | 第76页 |
·SCN对逆境温度的适应性 | 第76-77页 |
·J2体内海藻糖变化与SCN耐冷耐热性关系的分析 | 第77-78页 |
·温度对SCN卵孵化的影响 | 第78页 |
·光照对SCN孵化的影响 | 第78页 |
·土壤含水量对SCN孵化的影响 | 第78页 |
·结果与分析 | 第78-88页 |
·SCN J2对不同pH值的适应性 | 第78-79页 |
·不同pH值条件对SCN休眠卵孵化的影响 | 第79-83页 |
·SCN对逆境温度的适应性 | 第83-85页 |
·海藻糖与SCN耐高低温关系的分析 | 第85-86页 |
·温度对SCN卵孵化的影响 | 第86页 |
·光照对SCN孵化的影响 | 第86-87页 |
·土壤含水量对SCN孵化的影响 | 第87-88页 |
·结论与讨论 | 第88-90页 |
·结论 | 第88页 |
·讨论 | 第88-90页 |
第五章 大豆胞囊线虫热激蛋白基因(Hsp70,Hsp90)的克隆 | 第90-130页 |
·材料与方法 | 第90-105页 |
·供试材料 | 第90页 |
·主要试剂 | 第90-91页 |
·培养基配制 | 第91页 |
·常用溶液的配制 | 第91页 |
·基因组DNA的提取 | 第91-92页 |
·ITS rDNA片段的扩增 | 第92-93页 |
·SCN Hsp70基因(Hg-Hsp-70)的扩增 | 第93-100页 |
·SCN Hsp90基因(Hg-Hsp-90)的扩增 | 第100-101页 |
·DNA片段的回收: | 第101页 |
·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备: | 第101-102页 |
·回收片段的连接和转化 | 第102页 |
·重组质粒的鉴定 | 第102-105页 |
·基因序列的测定与分析 | 第105页 |
·结果与分析 | 第105-126页 |
·不同方法提取SCN基因组总DNA比较 | 第105-108页 |
·SCN Hsp70基因(Hg-Hsp-7D)的克隆 | 第108-117页 |
·Hg-Hsp-70基因序列分析 | 第117-120页 |
·SCN Hsp90基因(Hg-Hsp-90)的克隆 | 第120-126页 |
·Hg-Hsp-90基因序列分析 | 第126页 |
·结论与讨论 | 第126-130页 |
·结论 | 第126-127页 |
·讨论 | 第127-130页 |
第六章 大豆胞囊线虫热激蛋白(Hsp70,Hsp90)的原核表达 | 第130-157页 |
·材料与方法 | 第130-142页 |
·仪器设备 | 第130页 |
·菌种及质粒 | 第130-131页 |
·试剂及试剂盒 | 第131页 |
·常用溶液的配制 | 第131-132页 |
·SCN Hsp70、Hsp90原核表达载体的构建 | 第132-139页 |
·测序及序列分析 | 第139页 |
·SCN Hsp70和Hsp90的表达 | 第139-140页 |
·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第140-141页 |
·表达产物的Western Blot分析 | 第141-142页 |
·结果与分析 | 第142-154页 |
·载体pEASY-Hsp70构建结果 | 第142-144页 |
·载体pEASY-Hsp90构建结果 | 第144-146页 |
·载体pET30-Hsp70构建结果 | 第146-149页 |
·pEASY-Hsp70、pET30-Hsp70、pEASY-Hsp90转化受体细菌转化子的筛选 | 第149页 |
·Hsp70和Hsp90的表达 | 第149-151页 |
·IPTG浓度对Hsp70、Hsp90融合蛋白表达量的影响 | 第151-152页 |
·诱导时间对Hsp70、Hsp90融合蛋白表达量的影响 | 第152-153页 |
·表达产物的Western blot分析 | 第153-154页 |
·结论与讨论 | 第154-157页 |
·结论 | 第154页 |
·讨论 | 第154-157页 |
第七章 热激蛋白(Hsp)及海藻糖与大豆胞囊线虫耐胁迫关系的分析 | 第157-172页 |
·材料与方法 | 第157-161页 |
·供试药品与试剂 | 第157-158页 |
·大豆胞囊线虫(SCN)的繁殖 | 第158页 |
·SCN的处理 | 第158页 |
·线虫的观察方法 | 第158页 |
·RNA的提取 | 第158-159页 |
·cDNA的合成 | 第159页 |
·引物设计 | 第159-160页 |
·RT-PCR | 第160-161页 |
·PCR产物的半定量分析 | 第161页 |
·海藻糖的提取和测定 | 第161页 |
·海藻糖酶的提取和测定 | 第161页 |
·结果与分析 | 第161-169页 |
·逆境胁迫后SCN J2虫态的变化 | 第161-163页 |
·逆境胁迫对Hg-Hsp-70和Hg-Hsp-70基因表达的影响 | 第163-167页 |
·化学胁迫对SCN体内海藻糖含量和海藻糖酶活性的影响 | 第167-169页 |
·结论与讨论 | 第169-172页 |
·结论 | 第169页 |
·讨论 | 第169-172页 |
第八章 休眠期大豆胞囊线虫体内生理生化代谢特征 | 第172-205页 |
·材料与方法 | 第173-185页 |
·供试线虫 | 第173页 |
·糖类测定 | 第173-175页 |
·甘油测定 | 第175页 |
·可溶性蛋白质含量测定 | 第175-176页 |
·氨基酸测定 | 第176-177页 |
·全蛋白分析 | 第177-179页 |
·同工酶电泳 | 第179-181页 |
·酶活性测定 | 第181-184页 |
·主要实验仪器 | 第184-185页 |
·结果与分析 | 第185-200页 |
·SCN休眠期体内糖类物质含量的变化 | 第185-187页 |
·SCN休眠期体内甘油含量的变化 | 第187页 |
·SCN休眠期体内可溶性蛋白质含量的变化 | 第187-188页 |
·休眠期各阶段SCN体内各类物质含量 | 第188-189页 |
·SCN休眠期体内氨基酸含量的变化 | 第189-194页 |
·SCN休眠前后全蛋白质SDS-PAGE电泳分析 | 第194-195页 |
·SCN休眠前后同工酶电泳分析 | 第195-196页 |
·SCN休眠期体内海藻糖酶、PFK、PK、FBP、Gpase和NAD-SDH活性变化 | 第196-200页 |
·结论与讨论 | 第200-205页 |
·结论 | 第200-201页 |
·讨论 | 第201-205页 |
第九章 结论与展望 | 第205-208页 |
参考文献 | 第208-223页 |
附录 | 第223-240页 |
致谢 | 第240-242页 |
攻读博士学位期间发表论文情况 | 第242页 |