中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第一章 绪论 | 第10-23页 |
·引言 | 第10-11页 |
·恶性脑胶质瘤的化疗现状 | 第11-14页 |
·胶质瘤常用的化疗药物 | 第11-13页 |
·胶质瘤控缓释的药物化疗 | 第13-14页 |
·脑胶质瘤的基因治疗 | 第14-17页 |
·微小RNA(microRNA) | 第15页 |
·microRNA-21 | 第15-16页 |
·microRNA-21 在人脑胶质瘤中的异常表达 | 第16-17页 |
·microRNA-21 与P13k-Akt 信号转导通路的关系 | 第17页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 树形大分子载体 | 第17-22页 |
·聚阳离子基因载体介导的基因转染的一般过程 | 第18页 |
·Starburst PAMAM dendrimers 作基因载体的优势 | 第18-21页 |
·PAMAM 树形大分子作为药物载体 | 第21-22页 |
·本论文工作的提出 | 第22-23页 |
第二章 PAMAM/as-miRNA-21 的制备和表征 | 第23-31页 |
·引言 | 第23-24页 |
·实验部分 | 第24-26页 |
·仪器和试剂 | 第24-25页 |
·PAMAM/as-miR-21 的合成与表征 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-28页 |
·复合物琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
·PAMAM/ as-miR-21 的透射电镜形貌观察 | 第27页 |
·PAMAM/ as-miR-21 的zeta 电位测试 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
·本章结论 | 第30-31页 |
第三章 PAMAM 介导反义miR-21 抑制U251 人脑胶质瘤细胞系的体外研究 | 第31-42页 |
·引言 | 第31-32页 |
·实验部分 | 第32-35页 |
·仪器和试剂 | 第32-33页 |
·反义寡核苷酸的靶序列的选择与合成 | 第33页 |
·细胞培养 | 第33页 |
·基因转染 | 第33-34页 |
·流式细胞仪分析转染效率 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-38页 |
·PAMAM/as-miR-21 在U251 细胞中FITC 荧光的表达量 | 第35-36页 |
·流式细胞仪检测PAMAM /as-miR-21 在 U251 细胞中的转染效率 | 第36-38页 |
·讨论 | 第38-41页 |
·本章结论 | 第41-42页 |
第四章 PAMAM 介导5-FU 联合反义miR-21 抑制U251 人脑胶质瘤细胞的体外研究 | 第42-64页 |
·引言 | 第42-43页 |
·实验部分 | 第43-50页 |
·实验仪器和原料 | 第43-44页 |
·反义miR-21 的靶序列的选择与合成 | 第44页 |
·承载5-FU 的PAMAM 纳米微粒(5-FU | 第44-46页 |
·5-FU/PAMAM/as-miR-21 的制备与表征 | 第46-47页 |
·细胞培养与实验分组 | 第47页 |
·基因转染 | 第47-48页 |
·流式细胞仪分析转染效率 | 第48页 |
·(噻唑兰比色分析)法分析细胞增殖活性 | 第48-49页 |
·Anexin V-FITC 检测细胞凋亡 | 第49页 |
·U251 胶质瘤细胞侵袭能力的体外实验 | 第49页 |
·统计学处理 | 第49-50页 |
·结果 | 第50-59页 |
·5-FU/PAMAM 的表征 | 第50-51页 |
·5-FU/PAMAM/as-miR-21 的表征 | 第51-53页 |
·流式细胞仪分析转染效率 | 第53-54页 |
·MTT(噻唑兰比色分析)法分析细胞增殖活性 | 第54-55页 |
·Anexin V 检测细胞凋亡 | 第55-57页 |
·Transwell 法检测细胞侵袭能力 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59-63页 |
·本章小节 | 第63-64页 |
第五章 紫杉醇在U251、LN229 人脑胶质瘤细胞中IC50 的测定 | 第64-74页 |
·引言 | 第64-65页 |
·实验部分 | 第65-68页 |
·仪器和试剂 | 第65-66页 |
·PAMAM 与miR-21 抑制剂的合成与表征 | 第66页 |
·细胞培养与紫杉醇溶液的配置 | 第66页 |
·实验分组 | 第66-67页 |
·MTT 法检测紫杉醇在人脑胶质瘤U251 和LN229 细胞系的半数抑制浓度(IC50) | 第67页 |
·统计学方法 | 第67-68页 |
·结果 | 第68-71页 |
·PAMAM/miR-21 抑制剂复合物凝胶电泳 | 第68页 |
·不同浓度紫杉醇溶液对人脑胶质瘤细胞U251 和LN229 的抑制作用 | 第68-70页 |
·紫杉醇在人脑胶质瘤细胞系U251 和LN229 中的IC50 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
·本章小节 | 第73-74页 |
第六章 PAMAM 介导的miR-21 抑制剂联合紫杉醇抑制U251 和LN229 人脑胶质瘤细胞系的体外研究 | 第74-115页 |
·引言 | 第74-75页 |
·实验部分 | 第75-82页 |
·仪器和试剂 | 第75-77页 |
·细胞培养与实验分组 | 第77页 |
·MTT(噻唑兰比色分析)法分析细胞增殖活性 | 第77页 |
·Anexin V 检测细胞凋亡 | 第77-78页 |
·流式细胞术分析细胞周期 | 第78页 |
·Transwell 法检测细胞侵袭能力 | 第78页 |
·Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第78-81页 |
·统计学方法 | 第81-82页 |
·结果 | 第82-104页 |
·细胞增殖活性的分析(MTT 实验) | 第82-84页 |
·Anexin V 检测细胞凋亡 | 第84-89页 |
·流式细胞术分析细胞周期 | 第89-93页 |
·Transwell 法检测细胞体外侵袭能力 | 第93-99页 |
·Western blot 检测相关蛋白的表达 | 第99-104页 |
·讨论 | 第104-114页 |
·紫杉醇联合miR-21 抑制剂对胶质瘤细胞增殖的调控 | 第104-105页 |
·紫杉醇联合miR-21 抑制剂对胶质瘤细胞凋亡的调控 | 第105-107页 |
·紫杉醇联合miR-21 抑制剂对胶质瘤细胞周期的调控 | 第107-108页 |
·紫杉醇联合miR-21 抑制剂对胶质瘤细胞侵袭能力的调控 | 第108-109页 |
·紫杉醇联合miR-21 抑制剂对EGFR 信号转导通路的调控. | 第109-114页 |
·本章小结 | 第114-115页 |
第七章 结论 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-127页 |
发表论文和科研情况说明 | 第127-128页 |
致谢 | 第128页 |