| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 插图和附表清单 | 第5-6页 |
| 英文缩写表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-20页 |
| ·高致病性蓝耳病的研究进展 | 第9-12页 |
| ·HP-PRRSV的遗传学分析 | 第9-10页 |
| ·HP-PRRSV致病力的研究 | 第10页 |
| ·检测方法 | 第10-11页 |
| ·HP-PRRSV疫苗研究 | 第11-12页 |
| ·影响PRRSV感染宿主细胞的因素 | 第12-16页 |
| ·细胞受体 | 第12-14页 |
| ·胞内大分子物质 | 第14-15页 |
| ·细胞因子的作用 | 第15页 |
| ·小结 | 第15-16页 |
| ·实验研究内容与主要方法 | 第16-19页 |
| ·实验研究内容 | 第16页 |
| ·实验主要方法-消减抑制杂交技术 | 第16-19页 |
| ·研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PRRSV GD株不同代次间Marc-145细胞适应性比较与基因组全序列的测定 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·细胞与毒株 | 第20页 |
| ·生物试剂 | 第20-21页 |
| ·溶液配制 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-26页 |
| ·Marc-145细胞的培养 | 第22页 |
| ·PRRSV GD株的体外传代 | 第22页 |
| ·PRRSV GD株体外传代各代次TCID_(50)值的测定 | 第22页 |
| ·PRRSV GD株体外传代各代次CPE产生时间的观察 | 第22-23页 |
| ·总RNA的提取 | 第23页 |
| ·RT-PCR | 第23-25页 |
| ·PCR产物电泳验证 | 第25页 |
| ·PRRSV GD株各代次基因组全序列测序结果的分析 | 第25页 |
| ·PRRSV GD株基因组全序列5'UTR的序列分析 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26-32页 |
| ·PRRSV GD株体外传代各代次TCID_(50)值 | 第26-27页 |
| ·PRRSV GD株体外传代各个代次CPE时间观察结果 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增产物电泳检测结果 | 第28页 |
| ·高低代次PRRSV GD株基因组全序列碱基突变分析 | 第28-30页 |
| ·高低代次PRRSV GD株基因组全序列氨基酸突变分析 | 第30-32页 |
| ·PRRSV GD传代毒株5'UTR的序列分析 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Marc-145细胞基因转录差异文库的建立 | 第34-50页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·细胞与毒株 | 第34页 |
| ·生物试剂 | 第34-35页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-44页 |
| ·Marc-145细胞的培养 | 第37页 |
| ·PRRSV GD株5代与100代感染Marc-145细胞CPE产生时间观察 | 第37页 |
| ·mRNA的提取 | 第37-38页 |
| ·mRNA第一链cDNA的合成 | 第38页 |
| ·第二链cDNA合成 | 第38-39页 |
| ·双链cDNA末端修饰 | 第39页 |
| ·双链cDNA的RsaⅠ酶切消化 | 第39页 |
| ·接头的制备 | 第39-40页 |
| ·消化产物与接头连接 | 第40页 |
| ·消减抑制杂交 | 第40-41页 |
| ·套式PCR扩增差异基因 | 第41-42页 |
| ·PCR产物与T载体连接 | 第42页 |
| ·构建载体的转化与克隆 | 第42-43页 |
| ·检测与测序 | 第43页 |
| ·构建文库的序列分析 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-48页 |
| ·PRRSV GD体外传代毒株5代与100代感染Marc-145细胞之后CPE产生情况 | 第44页 |
| ·RsaⅠ酶切图 | 第44-45页 |
| ·PCR检测图 | 第45-47页 |
| ·差异基因文库的构建 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-51页 |
| ·实验总结 | 第50页 |
| ·下一步工作设想 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
