| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 一、文献综述 | 第13-27页 |
| ·水稻遗传转化方法 | 第14-21页 |
| ·DNA 直接导入基因转化法 | 第14-17页 |
| ·PEG 介导基因转化 | 第14-15页 |
| ·脂质体介导基因转化 | 第15页 |
| ·电击法介导基因转化 | 第15-16页 |
| ·基因枪法介导基因转化 | 第16页 |
| ·花粉管通道法 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导法 | 第17-21页 |
| ·农杆菌介导水稻遗传转化的研究 | 第17-18页 |
| ·影响农杆菌介导水稻遗传转化率的因素 | 第18-21页 |
| ·选择标记基因及其安全性 | 第21-23页 |
| ·标记基因的种类 | 第22页 |
| ·标记基因的安全性问题 | 第22-23页 |
| ·提高标记基因安全性策略 | 第23页 |
| ·无选择标记转化系统 | 第23页 |
| ·无争议的生物安全标记基因 | 第23页 |
| ·去除选择标记基因 | 第23页 |
| ·脂肪氧化酶的研究进展 | 第23-26页 |
| ·脂肪氧化酶简介 | 第23-24页 |
| ·脂肪氧化酶的代谢途径 | 第24-25页 |
| ·脂肪氧化酶的活性及测定方法 | 第25页 |
| ·水稻中的脂肪氧化酶 | 第25页 |
| ·脂肪氧化酶缺失与稻谷的耐储藏性 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·质粒与菌株 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·药品和仪器 | 第27-28页 |
| ·主要药品 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-42页 |
| ·载体构建 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌DH5α和农杆菌EHA105 的质粒转化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌DH5α质粒转化 | 第30-31页 |
| ·表达载体质粒冻融法转化农杆菌 | 第31页 |
| ·农杆菌介导水稻遗传转化 | 第31-34页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·愈伤组织的诱导及继代 | 第32页 |
| ·农杆菌转化水稻 | 第32-34页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第34-41页 |
| ·PCR 检测 | 第34-36页 |
| ·Southern 杂交与斑点杂交检测 | 第36-39页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第39-41页 |
| ·白化苗与正常苗根、茎、叶显微结构的比较分析 | 第41-42页 |
| 三、结果与分析 | 第42-51页 |
| ·不同培养基及其组合对愈伤组织生长的影响 | 第42页 |
| ·胚性愈伤组织增重情况 | 第42-44页 |
| ·PPT 对胚性愈伤组织的致死浓度 | 第44页 |
| ·转反义 Lox-3 基因植株的获得 | 第44-45页 |
| ·常规转化法与快速转化法 | 第45-47页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第45-46页 |
| ·农杆菌转化 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第47页 |
| ·转基因植株的斑点杂交检测 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的RT-PCR 检测 | 第48页 |
| ·白化苗与正常苗根、茎、叶的显微结构差异 | 第48-51页 |
| 四、讨论 | 第51-55页 |
| ·获得高质量水稻胚性愈伤组织的条件 | 第51-52页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·转化受体 | 第51页 |
| ·愈伤组织褐化率 | 第51-52页 |
| ·共培养的几个因素对转化效率的影响 | 第52页 |
| ·影响洗菌效果的几个因素 | 第52-53页 |
| ·影响愈伤组织分化频率的因素 | 第53页 |
| ·产生白化苗的因素 | 第53页 |
| ·工作的延续性 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录1.几种主要培养基的配方 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65页 |