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柑橘溃疡病菌单链二硫键稳定重组抗体的设计构建与表达

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-10页
1 绪论第10-26页
   ·柑橘溃疡病简介第10-19页
     ·柑橘溃疡病的发生与危害第10-12页
     ·柑橘溃疡病菌系及分类研究第12-14页
     ·柑橘溃疡病菌的基因组及抗性基因的研究第14-15页
     ·柑橘溃疡病菌的检疫检验技术第15-17页
     ·柑橘溃疡病的防治第17-19页
   ·基因工程抗体概论第19-23页
     ·抗体的基本结构第19-20页
     ·重组小分子抗体第20-22页
     ·单链二硫键稳定Fv 抗体第22-23页
   ·研究的目的和意义第23页
   ·研究内容和技术路线第23-25页
     ·研究内容第23-25页
     ·技术路线第25页
   ·本研究的创新之处第25-26页
2 材料与方法第26-39页
   ·供试菌株及载体第26页
   ·主要仪器第26-27页
   ·主要试剂及耗材第27-30页
   ·Xcc-sc-dsFv 基因的构建、克隆及表达第30-35页
     ·sc-dsFv 基因的构建第30-32页
     ·VH-linker-VL(sc-dsFv)基因的克隆第32-34页
     ·sc-dsFv 的诱导表达第34页
     ·sc-dsFv 的SDS-PAGE 及western-blot 分析第34-35页
   ·sc-dsFv 抗体的复性及纯化第35-36页
     ·sc-dsFv 抗体的稀释复性第35页
     ·sc-dsFv 抗体的纯化第35-36页
     ·复性及纯化后sc-dsFv 抗体的分析第36页
   ·Xcc-sc-dsFv 抗体亲和力的测定第36-37页
   ·sc-dsFv 抗体抗原特异性的测定第37-38页
     ·Dot-blot 检测sc-dsFv 抗体的抗原特异性第37页
     ·ELISA 检测sc-dsFv 抗体的抗原特异性第37-38页
   ·sc-dsFv 抗体稳定性的测定第38-39页
3 结果与分析第39-49页
   ·sc-dsFv 基因的构建、克隆及表达第39-41页
     ·sc-dsFv 基因的构建第39-40页
     ·VL-linker-VH 基因序列的测定第40-41页
     ·sc-dsFv 的表达及产物分析第41页
   ·sc-dsFv 抗体的复性及纯化第41-43页
   ·sc-dsFv 抗体亲和力的测定第43-45页
     ·预偶联确定包被缓冲液最适pH 值第43页
     ·预偶联确定sc-dsFv 最适浓度第43-44页
     ·Xcc-dsFv 抗体在芯片表面的包被第44-45页
     ·sc-dsFv 抗体亲和力的测定第45页
   ·sc-dsFv 抗体特异性的测定第45-47页
     ·Dot-blot 检测sc-dsFv 抗体的特异性第45-46页
     ·ELISA 检测sc-dsFv 抗体的特异性第46-47页
   ·sc-dsFv 抗体的稳定性检测第47-49页
4 讨论第49-52页
   ·VH 与VL 突变基因的构建及表达第49-50页
     ·VH-linker-VL 基因的构建第49页
     ·sc-dsFv 的包涵体表达第49-50页
   ·sc-dsFv 的复性及纯化第50-51页
     ·sc-dsFv 抗体的复性第50页
     ·sc-dsFv 抗体的纯化第50-51页
   ·sc-dsFv 抗体的生物学活性检测第51-52页
     ·sc-dsFv 亲和力的测定第51页
     ·sc-dsFv 抗体特异性与稳定性的测定第51-52页
5 后续工作第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-60页
附录第60页
 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第60页

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