中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
1 绪论 | 第10-26页 |
·柑橘溃疡病简介 | 第10-19页 |
·柑橘溃疡病的发生与危害 | 第10-12页 |
·柑橘溃疡病菌系及分类研究 | 第12-14页 |
·柑橘溃疡病菌的基因组及抗性基因的研究 | 第14-15页 |
·柑橘溃疡病菌的检疫检验技术 | 第15-17页 |
·柑橘溃疡病的防治 | 第17-19页 |
·基因工程抗体概论 | 第19-23页 |
·抗体的基本结构 | 第19-20页 |
·重组小分子抗体 | 第20-22页 |
·单链二硫键稳定Fv 抗体 | 第22-23页 |
·研究的目的和意义 | 第23页 |
·研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
·技术路线 | 第25页 |
·本研究的创新之处 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-39页 |
·供试菌株及载体 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·主要试剂及耗材 | 第27-30页 |
·Xcc-sc-dsFv 基因的构建、克隆及表达 | 第30-35页 |
·sc-dsFv 基因的构建 | 第30-32页 |
·VH-linker-VL(sc-dsFv)基因的克隆 | 第32-34页 |
·sc-dsFv 的诱导表达 | 第34页 |
·sc-dsFv 的SDS-PAGE 及western-blot 分析 | 第34-35页 |
·sc-dsFv 抗体的复性及纯化 | 第35-36页 |
·sc-dsFv 抗体的稀释复性 | 第35页 |
·sc-dsFv 抗体的纯化 | 第35-36页 |
·复性及纯化后sc-dsFv 抗体的分析 | 第36页 |
·Xcc-sc-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第36-37页 |
·sc-dsFv 抗体抗原特异性的测定 | 第37-38页 |
·Dot-blot 检测sc-dsFv 抗体的抗原特异性 | 第37页 |
·ELISA 检测sc-dsFv 抗体的抗原特异性 | 第37-38页 |
·sc-dsFv 抗体稳定性的测定 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-49页 |
·sc-dsFv 基因的构建、克隆及表达 | 第39-41页 |
·sc-dsFv 基因的构建 | 第39-40页 |
·VL-linker-VH 基因序列的测定 | 第40-41页 |
·sc-dsFv 的表达及产物分析 | 第41页 |
·sc-dsFv 抗体的复性及纯化 | 第41-43页 |
·sc-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第43-45页 |
·预偶联确定包被缓冲液最适pH 值 | 第43页 |
·预偶联确定sc-dsFv 最适浓度 | 第43-44页 |
·Xcc-dsFv 抗体在芯片表面的包被 | 第44-45页 |
·sc-dsFv 抗体亲和力的测定 | 第45页 |
·sc-dsFv 抗体特异性的测定 | 第45-47页 |
·Dot-blot 检测sc-dsFv 抗体的特异性 | 第45-46页 |
·ELISA 检测sc-dsFv 抗体的特异性 | 第46-47页 |
·sc-dsFv 抗体的稳定性检测 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
·VH 与VL 突变基因的构建及表达 | 第49-50页 |
·VH-linker-VL 基因的构建 | 第49页 |
·sc-dsFv 的包涵体表达 | 第49-50页 |
·sc-dsFv 的复性及纯化 | 第50-51页 |
·sc-dsFv 抗体的复性 | 第50页 |
·sc-dsFv 抗体的纯化 | 第50-51页 |
·sc-dsFv 抗体的生物学活性检测 | 第51-52页 |
·sc-dsFv 亲和力的测定 | 第51页 |
·sc-dsFv 抗体特异性与稳定性的测定 | 第51-52页 |
5 后续工作 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60页 |
作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60页 |