| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 第二章 绪论 | 第20-21页 |
| 第三章 桔青霉全局性调控因子Pci-laeA基因的克隆与鉴定 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·菌株与载体 | 第21页 |
| ·试剂、培养基 | 第21页 |
| ·引物、酶与试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·基因组DNA和总RNA的提取 | 第23页 |
| ·紫外分光光度法检测总RNA含量 | 第23页 |
| ·RT-PCR扩增Pci-laeA cDNA的中间片段 | 第23-24页 |
| ·cDNA 3’末端快速扩增(RACE技术) | 第24页 |
| ·TAIL-PCR | 第24-26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·Pci-laeA基因全长的克隆 | 第26页 |
| ·生物信息学分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·Pci-laeA基因中间片段的分离克隆 | 第26-27页 |
| ·Pci-laeA基因cDNA 3′末端序列的分离克隆 | 第27-28页 |
| ·Pci-laeA基因5′末端片段扩增 | 第28-29页 |
| ·Pci-laeA基因编码区全长DNA和cDNA的扩增与内含子分析 | 第29-30页 |
| ·Pci-laeA基因编码的蛋白质特性和同源性分析 | 第30-32页 |
| 第四章 Pci-laeA在美伐他汀生物合成过程中的差异表达研究 | 第32-43页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·试剂、培养基 | 第32页 |
| ·酶与试剂盒 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·生物量的检测 | 第33页 |
| ·HPLC法定量分析美伐他汀的产量 | 第33页 |
| ·总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·紫外分光光度法检测总RNA含量 | 第34页 |
| ·半定量RT-PCR法条件优化 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-43页 |
| ·美伐他汀产量计算 | 第35-36页 |
| ·美伐他汀的比生产率 | 第36-37页 |
| ·内标基因pgk的RT-PCR扩增平台期的确定 | 第37-38页 |
| ·Pci-laeA基因的RT-PCR扩增平台期的确定 | 第38-40页 |
| ·Pci-laeA基因表达水平的RT-PCR半定量分析 | 第40-43页 |
| 第五章 讨论 | 第43-49页 |
| ·Pci-laeA同源基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·Pci-LaeA的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·Pci-laeA的表达与美伐他汀的生物合成 | 第45-47页 |
| ·展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
