| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·聚乳酸概述 | 第13页 |
| ·聚乳酸的特性 | 第13-15页 |
| ·完全生物降解性 | 第14页 |
| ·植物来源性 | 第14-15页 |
| ·聚乳酸的应用 | 第15-16页 |
| ·日常生活中的应用 | 第15页 |
| ·工农业生产中的应用 | 第15页 |
| ·服装领域的应用 | 第15页 |
| ·生物医学方面的应用 | 第15-16页 |
| ·聚乳酸研究开发的进展 | 第16-20页 |
| ·高纯度乳酸的制备 | 第16页 |
| ·高分子量聚乳酸的合成 | 第16-17页 |
| ·聚乳酸的改性研究 | 第17-20页 |
| ·聚乳酸的降解 | 第20-24页 |
| ·PLA 的简单水解降解 | 第21页 |
| ·生物降解 | 第21-24页 |
| ·本论文的研究目的及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 聚乳酸降解菌株的选育 | 第26-42页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·实验菌株 | 第26页 |
| ·实验药品 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·PLA 降解菌株的初筛 | 第28-29页 |
| ·菌株的形态学观察和生理生化特征鉴定 | 第29-31页 |
| ·菌株的16S rDNA 鉴定 | 第31-32页 |
| ·实验结果 | 第32-40页 |
| ·PLA 降解菌株的筛选结果 | 第32页 |
| ·菌落及菌株的形态观察 | 第32-35页 |
| ·16s rDNA 序列分析鉴定 | 第35-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第三章 聚乳酸降解菌DS04-T 产酶条件的优化 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验菌株 | 第42页 |
| ·实验药品 | 第42页 |
| ·实验仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-49页 |
| ·培养时间对菌株产酶能力的影响 | 第43-44页 |
| ·培养基起始pH 对菌株产酶能力的影响 | 第44-45页 |
| ·培养温度对菌株产酶能力的影响 | 第45页 |
| ·接种量对菌株产酶能力的影响 | 第45-46页 |
| ·溶解氧对菌株产酶能力的影响 | 第46-48页 |
| ·正交试验 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章PLA 解聚酶LIP 的纯化及酶促反应动力学研究 | 第50-64页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验菌株 | 第50页 |
| ·实验药品 | 第50页 |
| ·试剂配制 | 第50页 |
| ·实验仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·酶的纯化 | 第51页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第51-52页 |
| ·酶的纯度鉴定及分子量测定 | 第52-53页 |
| ·反应pH 对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第53页 |
| ·反应温度对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第53页 |
| ·PLA 解聚酶的pH 稳定性的测定 | 第53页 |
| ·PLA 解聚酶热稳定性的测定 | 第53-54页 |
| ·金属离子对PLA 解聚酶活力的影响 | 第54页 |
| ·化学试剂对酶活性的影响 | 第54页 |
| ·Km 值的测定 | 第54页 |
| ·底物特异性分析 | 第54页 |
| ·N 端测序降解产物的测定 | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-62页 |
| ·PLA 解聚酶的纯化 | 第55-57页 |
| ·PLA 解聚酶的纯度鉴定及分子量测定 | 第57-58页 |
| ·反应pH 对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第58-59页 |
| ·反应温度对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第59页 |
| ·PLA 解聚酶的pH 稳定性的测定 | 第59-60页 |
| ·PLA 解聚酶的热稳定性的测定 | 第60页 |
| ·金属离子对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第60-61页 |
| ·化学试剂对PLA 解聚酶酶活力的影响 | 第61页 |
| ·PLA 解聚酶Km 值的测定 | 第61-62页 |
| ·PLA 解聚酶底物特异性分析 | 第62页 |
| ·氮端测序 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-64页 |
| 第五章PLA 解聚酶LIP 基因的克隆表达及序列分析 | 第64-73页 |
| ·实验材料 | 第64-66页 |
| ·实验菌株 | 第64页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第64-65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·序列分析及结构预测使用的数据库及软件 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·Pseudomonas sp. 菌株全基因组DNA 的提取 | 第66页 |
| ·PLA 解聚酶LIP 的重组构建 | 第66页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第66页 |
| ·序列分析及结构 | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-71页 |
| ·PLA 解聚酶LIP 的重组构建 | 第67-68页 |
| ·重组PLA 解聚酶LIP 的诱导表达 | 第68页 |
| ·PLA 解聚酶LIP 理化性质预测 | 第68-69页 |
| ·PLA 解聚酶LIP 氨基酸序列的比对 | 第69-70页 |
| ·蛋白结构域分析 | 第70页 |
| ·蛋白二级结构的预测 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第六章PLA 解聚酶PME 的基因克隆及表达 | 第73-86页 |
| ·实验材料 | 第73页 |
| ·实验菌株 | 第73页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第73页 |
| ·实验仪器 | 第73页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·Pseudomonas sp. 菌株全基因组DNA 的提取 | 第73页 |
| ·PLA 解聚酶基因的筛选及重组菌株的构建 | 第73-74页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第74页 |
| ·重组酶的纯度鉴定及分子量测定 | 第74-75页 |
| ·反应pH 对重组酶酶活力的影响 | 第75页 |
| ·反应温度对重组酶酶活力的影响 | 第75页 |
| ·重组酶的pH 稳定性的测定 | 第75页 |
| ·重组酶热稳定性的测定 | 第75页 |
| ·金属离子对重组酶活性的影响 | 第75页 |
| ·化学试剂对重组酶活性的影响 | 第75页 |
| ·重组酶Km 值的测定 | 第75-76页 |
| ·重组酶底物特异性分析 | 第76页 |
| ·实验结果 | 第76-85页 |
| ·PLA 解聚酶基因的筛选 | 第76-78页 |
| ·重组酶PME 的表达纯化 | 第78-79页 |
| ·重组酶PME 的纯度鉴定及分子量测定 | 第79页 |
| ·反应pH 对重组酶PME 酶活力的影响 | 第79-80页 |
| ·反应温度对重组酶PME 酶活力的影响 | 第80页 |
| ·重组酶PME 的pH 稳定性的测定 | 第80-81页 |
| ·重组酶PME 的热稳定性的测定 | 第81-82页 |
| ·金属离子对重组酶PME 酶活力的影响 | 第82页 |
| ·化学试剂对重组酶PME 酶活力的影响 | 第82-83页 |
| ·重组酶PME 的Km 值测定 | 第83页 |
| ·PLA 解聚酶底物特异性分析 | 第83-84页 |
| ·PLA 解聚酶PME 理化性质分析 | 第84页 |
| ·氨基酸序列的比对 | 第84页 |
| ·蛋白二级结构的预测 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第七章 菌株及PLA 解聚酶对PLA 薄膜的降解行为分析 | 第86-92页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·实验药品 | 第86页 |
| ·实验仪器 | 第86页 |
| ·实验材料 | 第86-87页 |
| ·菌株及其PLA 解聚酶对PLA 薄膜降解率的测定 | 第86页 |
| ·经降解的PLA 薄膜的电镜观察 | 第86-87页 |
| ·降解产物的质谱分析 | 第87页 |
| ·实验结果 | 第87-90页 |
| ·菌株及解聚酶对PLA 薄膜的降解率分析 | 第87-88页 |
| ·PLA 薄膜降解后的电镜观察 | 第88页 |
| ·PLA 薄膜降解产物分析 | 第88-90页 |
| ·小结 | 第90-92页 |
| 结论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第100页 |
