| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-20页 |
| ·植物无融合生殖 | 第9-10页 |
| ·无融合生殖甜菜单体附加系M14品系及研究进展 | 第10-11页 |
| ·甜菜M14品系表达基因BνM14-CaM | 第11-12页 |
| ·CaM基因 | 第12-15页 |
| ·CaM结构特点 | 第12-13页 |
| ·CaM的研究进展 | 第13-15页 |
| ·基因工程中的农杆菌转化系统概述 | 第15-17页 |
| ·农杆菌转化系统的原理 | 第15-16页 |
| ·农杆菌转化系统的优点及局限性 | 第16页 |
| ·植物基因工程中的表达载体pBI121 | 第16-17页 |
| ·本实验的内容及目的 | 第17-18页 |
| ·本实验的技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-40页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第20页 |
| ·各种试剂及试剂盒 | 第20页 |
| ·实验所需常用仪器及试剂、培养基 | 第20-21页 |
| ·引物及BνM14-CaM基因cDNA和T_(NOS)-P_(CaMV35S)全长序列 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-40页 |
| ·BνM14-CaM cDNA全长的获得 | 第23-26页 |
| ·构建植物表达载体及筛选鉴定 | 第26-33页 |
| ·植物表达载体导入根癌农杆菌 | 第33-34页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第34-35页 |
| ·烟草转基因再生植株的检测 | 第35-39页 |
| ·转基因植株的胁迫处理 | 第39-40页 |
| 第3章 结果与分析 | 第40-64页 |
| ·BνM14-CaM cDNA全长的获得 | 第40-41页 |
| ·总RNA的提取 | 第40页 |
| ·BνM14-CaM基因cDNA全长的扩增 | 第40-41页 |
| ·BνM14-CaM基因在野生型烟草中的扩增 | 第41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第41-48页 |
| ·质粒载体pBI-M14-CaM的构建 | 第41-43页 |
| ·pBI-M14-CaM连接产物的筛选及鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒载体pBI-M14-CaM-T_(NOS)-P_(CaMV35S)的构建 | 第44-46页 |
| ·pBI-M14-CaM-T_(NOS)-P_(caMV35S)连接产物的筛选及鉴定 | 第46-48页 |
| ·植物表达载体pBI-M14-CaM-T_(NOS)-P_(CaMV35S)导入根癌农杆菌 | 第48-50页 |
| ·电击法转化根癌农杆菌EHA105 | 第48页 |
| ·农杆菌阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第48-50页 |
| ·根癌农杆菌介导的烟草的遗传转化 | 第50-51页 |
| ·烟草遗传转化体系 | 第50页 |
| ·转化烟草植株 | 第50-51页 |
| ·烟草转基因植株的检测 | 第51-54页 |
| ·烟草转基因植株的分子生物学检测 | 第51-53页 |
| ·烟草转基因再生植株的组织化学检测 | 第53-54页 |
| ·转基因植株胁迫处理的统计分析 | 第54-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-67页 |
| ·BvM14-CaM基因对转基因植株抗逆性的作用 | 第64页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达情况 | 第64-65页 |
| ·下一步实验设想 | 第65-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
