| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 缩略词 | 第16-18页 |
| 第1章 文献综述 | 第18-34页 |
| ·猪链球菌病 | 第18-28页 |
| ·历史 | 第18-19页 |
| ·病原学 | 第19页 |
| ·流行病学 | 第19-20页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第20-21页 |
| ·毒力(相关)因子 | 第21-24页 |
| ·致病机理 | 第24-26页 |
| ·疫苗研究 | 第26-27页 |
| ·全基因组序列分析 | 第27-28页 |
| ·双组分调控系统 | 第28-34页 |
| ·双组分调控系统的组成及其信号转导模式 | 第28-30页 |
| ·细菌双组分调控系统与细菌毒力的关系 | 第30-32页 |
| ·链球菌双组分调控系统概述 | 第32-34页 |
| 第2章 猪链球菌2型内皮素转换酶1基因突变株 #17的构建及生物学特性研究 | 第34-68页 |
| ·研究目的 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-44页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·细胞株 | 第34-35页 |
| ·质粒 | 第35-36页 |
| ·主要生化试剂 | 第36-37页 |
| ·培养基的配制 | 第37页 |
| ·质粒抽提相关溶液 | 第37-38页 |
| ·其它缓冲液及试剂 | 第38页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·链球菌的培养 | 第38页 |
| ·基因芯片的扫描 | 第38-39页 |
| ·定量PCR | 第39-40页 |
| ·猪链球菌2型ece1基因上下游同源臂的扩增 | 第40页 |
| ·PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41-42页 |
| ·质粒的制备 | 第42页 |
| ·重组质粒的鉴定(酶切) | 第42页 |
| ·链球菌电转化 | 第42-43页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·电转化 | 第43页 |
| ·基因缺失突变株的筛选 | 第43页 |
| ·突变株遗传稳定性分析 | 第43页 |
| ·突变株生长特性研究 | 第43-44页 |
| ·细胞黏附试验 | 第44页 |
| ·突变株对仔猪致病力试验 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-62页 |
| ·SS2双组分调控系统1660hk/rr突变株基因表达变化 | 第44-47页 |
| ·芯片结果的定量PCR验证 | 第47-48页 |
| ·重组转移质粒pSET4s-0153的构建 | 第48-50页 |
| ·ece1基因缺失突变株的筛选与鉴定 | 第50-51页 |
| ·ece1基因缺失菌株的遗传稳定性分析 | 第51-52页 |
| ·ece1基因缺失菌株的生长特性试验 | 第52页 |
| ·ece1基因缺失突变株对Hep2细胞的黏附 | 第52-53页 |
| ·ece1基因缺失突变株对断奶仔猪的毒力试验 | 第53-62页 |
| ·讨论 | 第62-67页 |
| ·关于双组分调控系统 | 第62-63页 |
| ·关于基因芯片操作和结果 | 第63-64页 |
| ·关于猪链球菌2型ece1基因 | 第64-65页 |
| ·突变株的构建 | 第65-66页 |
| ·关于突变株的特性 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第3章 猪链球菌2型6PGD蛋白的免疫原性研究 | 第68-87页 |
| ·研究目的 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-75页 |
| ·菌株 | 第68页 |
| ·细胞株 | 第68-69页 |
| ·质粒 | 第69-70页 |
| ·主要试剂、质粒抽提缓冲液 | 第70页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液 | 第70页 |
| ·Western-blot相关溶液 | 第70页 |
| ·ELISA缓冲液 | 第70-71页 |
| ·6pgd基因的克隆 | 第71页 |
| ·6PGD融合蛋白的表达与纯化 | 第71页 |
| ·SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第71-72页 |
| ·Western-blot | 第72页 |
| ·兔抗血清的制备 | 第72-73页 |
| ·链球菌的细胞壁提取 | 第73页 |
| ·抗6PGD抗体ELISA检测板的包被 | 第73页 |
| ·ELISA检测抗6PGD抗体 | 第73页 |
| ·细胞黏附抑制试验 | 第73-74页 |
| ·6PGD对小鼠的免疫保护试验 | 第74页 |
| ·6PGD对断奶仔猪的免疫保护试验 | 第74-75页 |
| ·统计分析 | 第75页 |
| ·实验结果 | 第75-84页 |
| ·6pgd基因的克隆与序列分析 | 第75-77页 |
| ·6PGD蛋白的表达与纯化 | 第77-79页 |
| ·6PGD蛋白抑制细菌黏附 | 第79页 |
| ·6PGD蛋白免疫小鼠血清检测结果 | 第79-80页 |
| ·6PGD蛋白对小鼠免疫保护 | 第80-81页 |
| ·6PGD蛋白免疫猪血清检测结果 | 第81-82页 |
| ·6PGD蛋白对猪的免疫保护 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·目前关于猪链球菌疫苗研究 | 第84页 |
| ·猪链球菌2型的6pgd基因 | 第84-85页 |
| ·展望 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-108页 |
| 附录 | 第108-109页 |
| 发表论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |