摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
1 引言 | 第13-25页 |
1.1 瓜实蝇主要的生物学和生态学特性综述 | 第13-14页 |
1.1.1 卵期 | 第13页 |
1.1.2 幼虫期 | 第13页 |
1.1.3 成虫期 | 第13-14页 |
1.1.4 蛹期 | 第14页 |
1.2 高温对瓜实蝇各虫态的影响 | 第14-16页 |
1.2.1 高温对瓜实蝇卵的作用研究概况 | 第14页 |
1.2.2 高温对瓜实蝇幼虫的作用研究概况 | 第14页 |
1.2.3 高温对瓜实蝇蛹的作用研究概况 | 第14页 |
1.2.4 高温对瓜实蝇成虫的作用研究概况 | 第14-16页 |
1.3 高温对昆虫生理生化代谢的影响 | 第16-17页 |
1.4 瓜实蝇卵巢解剖观察主要研究概况 | 第17-18页 |
1.5 温度对昆虫转录和蛋白差异表达的影响研究概况 | 第18-23页 |
1.5.1 温度对昆虫转录的影响研究概述 | 第18-19页 |
1.5.2 温度对昆虫蛋白表达的影响研究概况 | 第19-23页 |
1.6 实时荧光定量PCR技术在高温对昆虫影响研究中的应用 | 第23页 |
1.7 目的基因片段克隆分析应用于高温对昆虫影响的研究 | 第23-24页 |
1.8 本研究内容、目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 供试虫源和养虫管理 | 第25页 |
2.1.2 主要供试试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要溶液配方 | 第25-26页 |
2.1.4 主要供试仪器 | 第26页 |
2.1.5 菌株和载体 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 短时恒定高温处理设置 | 第26-27页 |
2.2.2 变化高温处理设置 | 第27页 |
2.2.3 不同高温对瓜实蝇存活和繁殖影响观察 | 第27-28页 |
2.2.4 不同高温对瓜实蝇自主趋温行为观察 | 第28-29页 |
2.2.5 不同高温后瓜实蝇交配和产卵行为观察 | 第29页 |
2.2.6 不同高温处理后瓜实蝇6种关键生理生化代谢指标测定 | 第29-30页 |
2.2.7 不同温度处理后瓜实蝇卵巢解剖观察 | 第30页 |
2.2.8 不同高温处理后瓜实蝇转录及表达测定样本准备及分析 | 第30-31页 |
2.2.9 瓜实蝇总RNA的提取和第一链cDNA合成 | 第31页 |
2.2.10 内参基因筛选引物设计、扩增片段大小及反应体系条件 | 第31-32页 |
2.2.11 内参基因筛选 | 第32页 |
2.2.12 qRT-PCR验证目的基因表达动态分析 | 第32-33页 |
2.2.13 目的基因qRT-PCR引物设计、扩增片段大小及反应体系条件 | 第33页 |
2.2.14 目的基因片段克隆分析引物设计、扩增片段大小及反应体系条件 | 第33-34页 |
2.2.15 目的基因片段克隆PCR产物电泳与回收、连接和转化筛选、质粒提取 | 第34-36页 |
2.2.16 数据处理与分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-66页 |
3.1 不同短时恒定高温对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响 | 第37-39页 |
3.1.1 不同恒定高温处理1h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响 | 第37页 |
3.1.2 不同恒定高温处理2h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响 | 第37-38页 |
3.1.3 不同恒定高温处理3h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响 | 第38-39页 |
3.2 不同变化高温对瓜实蝇存活和繁殖的影响 | 第39-41页 |
3.2.1 不同变化高温处理7h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响 | 第39页 |
3.2.2 7h变化高温处理2次对瓜实蝇存活和繁殖的影响 | 第39-40页 |
3.2.3 7h变化高温处理3次对瓜实蝇存活和繁殖的影响 | 第40-41页 |
3.3 不同高温对瓜实蝇行为的影响 | 第41-45页 |
3.3.1 不同短时恒定高温对瓜实蝇趋温行为的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 不同变化高温对瓜实蝇趋温行为的影响 | 第42页 |
3.3.3 不同短时恒定高温对瓜实蝇交配和产卵行为的影响 | 第42页 |
3.3.4 不同变化高温对瓜实蝇交配和产卵行为的影响 | 第42-45页 |
3.4 不同高温处理对瓜实蝇6种生理生化代谢指标测定 | 第45页 |
3.5 不同高温处理后瓜实蝇卵巢解剖发育 | 第45-46页 |
3.6 不同高温处理后瓜实蝇转录组测序分析 | 第46-53页 |
3.7 不同高温处理后瓜实蝇iTRAQ分析 | 第53-57页 |
3.8 RNA-Seq和iTRAQ联合分析筛选目的基因 | 第57-61页 |
3.9 目的基因qRT-PCR分析 | 第61-64页 |
3.9.1 内参基因筛选分析 | 第61-63页 |
3.9.2 目的基因qRT-PCR分析 | 第63-64页 |
3.10 目的基因片段克隆分析 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-72页 |
4.1 不同高温对瓜实蝇存活和繁殖及其行为的影响 | 第66-67页 |
4.2 不同高温对瓜实蝇体内6种生理生化代谢指标分析 | 第67-68页 |
4.3 不同高温处理后瓜实蝇卵巢解剖分析 | 第68页 |
4.4 不同高温对瓜实蝇转录和表达的影响分析 | 第68-70页 |
4.5 不同高温对瓜实蝇内参基因筛选及目的基因QRT-PCR分析 | 第70-71页 |
4.6 产卵和热胁迫相关基因片段克隆分析 | 第71-72页 |
研究结论和创新点 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
附录 | 第86-99页 |