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瓜实蝇对高温胁迫的响应及分子基础研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
1 引言第13-25页
    1.1 瓜实蝇主要的生物学和生态学特性综述第13-14页
        1.1.1 卵期第13页
        1.1.2 幼虫期第13页
        1.1.3 成虫期第13-14页
        1.1.4 蛹期第14页
    1.2 高温对瓜实蝇各虫态的影响第14-16页
        1.2.1 高温对瓜实蝇卵的作用研究概况第14页
        1.2.2 高温对瓜实蝇幼虫的作用研究概况第14页
        1.2.3 高温对瓜实蝇蛹的作用研究概况第14页
        1.2.4 高温对瓜实蝇成虫的作用研究概况第14-16页
    1.3 高温对昆虫生理生化代谢的影响第16-17页
    1.4 瓜实蝇卵巢解剖观察主要研究概况第17-18页
    1.5 温度对昆虫转录和蛋白差异表达的影响研究概况第18-23页
        1.5.1 温度对昆虫转录的影响研究概述第18-19页
        1.5.2 温度对昆虫蛋白表达的影响研究概况第19-23页
    1.6 实时荧光定量PCR技术在高温对昆虫影响研究中的应用第23页
    1.7 目的基因片段克隆分析应用于高温对昆虫影响的研究第23-24页
    1.8 本研究内容、目的和意义第24-25页
2 材料与方法第25-37页
    2.1 材料第25-26页
        2.1.1 供试虫源和养虫管理第25页
        2.1.2 主要供试试剂第25页
        2.1.3 主要溶液配方第25-26页
        2.1.4 主要供试仪器第26页
        2.1.5 菌株和载体第26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 短时恒定高温处理设置第26-27页
        2.2.2 变化高温处理设置第27页
        2.2.3 不同高温对瓜实蝇存活和繁殖影响观察第27-28页
        2.2.4 不同高温对瓜实蝇自主趋温行为观察第28-29页
        2.2.5 不同高温后瓜实蝇交配和产卵行为观察第29页
        2.2.6 不同高温处理后瓜实蝇6种关键生理生化代谢指标测定第29-30页
        2.2.7 不同温度处理后瓜实蝇卵巢解剖观察第30页
        2.2.8 不同高温处理后瓜实蝇转录及表达测定样本准备及分析第30-31页
        2.2.9 瓜实蝇总RNA的提取和第一链cDNA合成第31页
        2.2.10 内参基因筛选引物设计、扩增片段大小及反应体系条件第31-32页
        2.2.11 内参基因筛选第32页
        2.2.12 qRT-PCR验证目的基因表达动态分析第32-33页
        2.2.13 目的基因qRT-PCR引物设计、扩增片段大小及反应体系条件第33页
        2.2.14 目的基因片段克隆分析引物设计、扩增片段大小及反应体系条件第33-34页
        2.2.15 目的基因片段克隆PCR产物电泳与回收、连接和转化筛选、质粒提取第34-36页
        2.2.16 数据处理与分析第36-37页
3 结果与分析第37-66页
    3.1 不同短时恒定高温对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响第37-39页
        3.1.1 不同恒定高温处理1h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响第37页
        3.1.2 不同恒定高温处理2h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响第37-38页
        3.1.3 不同恒定高温处理3h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响第38-39页
    3.2 不同变化高温对瓜实蝇存活和繁殖的影响第39-41页
        3.2.1 不同变化高温处理7h对瓜实蝇成虫存活和繁殖的影响第39页
        3.2.2 7h变化高温处理2次对瓜实蝇存活和繁殖的影响第39-40页
        3.2.3 7h变化高温处理3次对瓜实蝇存活和繁殖的影响第40-41页
    3.3 不同高温对瓜实蝇行为的影响第41-45页
        3.3.1 不同短时恒定高温对瓜实蝇趋温行为的影响第41-42页
        3.3.2 不同变化高温对瓜实蝇趋温行为的影响第42页
        3.3.3 不同短时恒定高温对瓜实蝇交配和产卵行为的影响第42页
        3.3.4 不同变化高温对瓜实蝇交配和产卵行为的影响第42-45页
    3.4 不同高温处理对瓜实蝇6种生理生化代谢指标测定第45页
    3.5 不同高温处理后瓜实蝇卵巢解剖发育第45-46页
    3.6 不同高温处理后瓜实蝇转录组测序分析第46-53页
    3.7 不同高温处理后瓜实蝇iTRAQ分析第53-57页
    3.8 RNA-Seq和iTRAQ联合分析筛选目的基因第57-61页
    3.9 目的基因qRT-PCR分析第61-64页
        3.9.1 内参基因筛选分析第61-63页
        3.9.2 目的基因qRT-PCR分析第63-64页
    3.10 目的基因片段克隆分析第64-66页
4 讨论第66-72页
    4.1 不同高温对瓜实蝇存活和繁殖及其行为的影响第66-67页
    4.2 不同高温对瓜实蝇体内6种生理生化代谢指标分析第67-68页
    4.3 不同高温处理后瓜实蝇卵巢解剖分析第68页
    4.4 不同高温对瓜实蝇转录和表达的影响分析第68-70页
    4.5 不同高温对瓜实蝇内参基因筛选及目的基因QRT-PCR分析第70-71页
    4.6 产卵和热胁迫相关基因片段克隆分析第71-72页
研究结论和创新点第72-73页
参考文献第73-85页
致谢第85-86页
附录第86-99页

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